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龙图腾网恭喜南方医科大学申请的专利基于分子定量技术检测守宫特异片段拷贝数对金龙胶囊进行质量控制的方法及引物和探针获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114292921B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2023-09-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202111560127.5，技术领域涉及：C12Q1/6888；该发明授权基于分子定量技术检测守宫特异片段拷贝数对金龙胶囊进行质量控制的方法及引物和探针是由晁志;梁永姗;李婵设计研发完成，并于2021-12-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于分子定量技术检测守宫特异片段拷贝数对金龙胶囊进行质量控制的方法及引物和探针在说明书摘要公布了：本发明公开了基于分子定量技术检测守宫特异片段拷贝数对金龙胶囊进行质量控制的方法及引物和探针。包括：根据守宫正品原动物无蹼壁虎与其混伪品线粒体基因组序列差异，设计合成特异性引物和探针；提取金龙胶囊合格品的DNA，通过qPCR或ddPCR确定金龙胶囊合格品中无蹼壁虎特异片段的拷贝数范围；提取待检测金龙胶囊样品的DNA进行qPCR或ddPCR，计算无蹼壁虎特异片段的拷贝数；与合格品比对。本发明以qPCR或ddPCR测得的无蹼壁虎特异片段的拷贝数作为质控检测指标，通过对比待检测金龙胶囊中特异片段的拷贝数与合格品的拷贝数范围，考察金龙胶囊的质量。该方法可快速、灵敏地特异性检测金龙胶囊中守宫组分及含量。

本发明授权基于分子定量技术检测守宫特异片段拷贝数对金龙胶囊进行质量控制的方法及引物和探针在权利要求书中公布了：1.基于分子定量技术检测金龙胶囊守宫成分的质量控制方法，其特征在于，包括如下步骤：根据守宫正品原动物无蹼壁虎与其混伪品线粒体基因组序列差异，设计合成物种特异性引物和特异性探针；提取金龙胶囊合格品的DNA，通过qPCR确定金龙胶囊合格品中无蹼壁虎特异片段的拷贝数范围；提取待检测金龙胶囊样品的DNA进行qPCR，计算无蹼壁虎特异片段的拷贝数；与合格品比对；或，根据守宫正品原动物无蹼壁虎与其混伪品线粒体基因组序列差异，设计合成物种特异性引物和特异性探针；提取金龙胶囊合格品的DNA，通过ddPCR确定金龙胶囊合格品中无蹼壁虎特异片段的拷贝数范围；提取待检测金龙胶囊样品的DNA进行ddPCR，计算无蹼壁虎特异片段的拷贝数；与合格品比对；其中，所述特异性探针的序列如SEQIDNO:3所示；所述特异性引物包括引物1和引物2；所述引物1的序列如SEQIDNO:1所示，所述引物2的序列如SEQIDNO:2所示；所述提取待检测金龙胶囊样品或提取金龙胶囊合格品中的DNA的方法包括如下步骤：（1）取胶囊内含物，加入缓冲液I，加入聚乙烯吡咯烷酮40和β-巯基乙醇，65℃水浴2h，水浴期间摇晃4次，离心取上清液；（2）加入上清液1~2倍体积的甲醇，-20℃静置沉淀至少1h、离心弃上清保留沉淀；（3）在沉淀中加入缓冲液II和β-巯基乙醇，65℃水浴，摇晃混匀使沉淀溶解；（4）加入等体积的氯仿异戊醇的混合液、混匀、离心，取上清液；（5）加入上清液等体积预冷的无水乙醇和上清液十分之一体积的3MNaAc溶液，-20℃沉降过夜；（6）将步骤（5）得到的液体和沉淀转移至DNA吸附柱中，离心，弃去液体；（7）向DNA吸附柱中加入缓冲液GD，离心，弃去液体；加入漂洗液PW，离心弃去液体；（8）向DNA吸附柱中加入TE缓冲液，离心，完成DNA的收集；其中，步骤（1）中的缓冲液I包括缓冲液A和缓冲液B；所述缓冲液A由CTAB细胞裂解液、Tris-HCl缓冲液、EDTA和NaCl组成；所述缓冲液B为DTT溶液；步骤（2）中的缓冲液II为缓冲液A。

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