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龙图腾网获悉中国农业大学申请的专利一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114763559B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-07-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110057414.8，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用是由吴森;杜旭光;鲁恒星设计研发完成，并于2021-01-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用。本发明提供一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统，该系统包含以下模块：Cas9蛋白识别位点模块，识别Cas9蛋白识别位点的sgRNA表达模块，基因捕获模块，Cas9蛋白表达模块以及识别基因捕获靶位点的sgRNA表达模块。该系统可实现高效的靶向性基因捕获，在多种哺乳动物细胞中均具有较高的敲入效率，极大地简化了突变型等位基因的制备，为高效向哺乳动物细胞中引入靶向性突变提供了新的路径。

本发明授权一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用在权利要求书中公布了：1.一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统，其特征在于，所述系统包含以下模块：Cas9蛋白识别位点模块，其由用于Cas9蛋白识别的核苷酸序列组成，所述用于Cas9蛋白识别的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；识别Cas9蛋白识别位点的sgRNA表达模块，其由启动子1以及可操作性连接在所述启动子1下游的sgRNA1组成，所述sgRNA1能够识别Cas9蛋白识别位点，用于引导Cas9蛋白将载体切割为线性，所述sgRNA1的序列如SEQIDNO.2所示；基因捕获模块，其由剪接受体SA、来源于脑心肌炎病毒的IRES、标记基因和多聚腺苷酸加尾序列polyA组成，且不包含基因捕获靶位点的同源臂；Cas9蛋白表达模块，其由启动子2以及可操作性连接在所述启动子2下游的Cas9基因组成；识别基因捕获靶位点的sgRNA表达模块，其由启动子1以及可操作性连接在所述启动子1下游的sgRNA2组成，所述sgRNA2能够识别基因捕获靶位点；所述基因捕获系统还包含基因捕获筛选模块，所述基因捕获筛选模块包含启动子3和药物筛选基因，用于筛选基因捕获模块成功插入到靶位点的细胞；所述Cas9蛋白识别位点模块、识别Cas9蛋白识别位点的sgRNA表达模块、基因捕获模块和基因捕获筛选模块位于第一载体上，其中，所述基因捕获筛选模块可操作性连接于所述基因捕获模块的下游，所述识别Cas9蛋白识别位点的sgRNA表达模块和Cas9蛋白识别位点模块沿上游至下游的方向顺次、可操作性地连接于所述基因捕获模块的上游；所述Cas9蛋白表达模块和识别基因捕获靶位点的sgRNA表达模块分别位于第二载体和第三载体上；所述启动子1为U6启动子，所述启动子2为CMV启动子，所述启动子3为SV40启动子。

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