中国林业科学研究院亚热带林业研究所王彩霞获国家专利权
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龙图腾网获悉中国林业科学研究院亚热带林业研究所申请的专利大青组织培养快速繁殖方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119111396B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411354163.X,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权大青组织培养快速繁殖方法及应用是由王彩霞;葛万川设计研发完成,并于2024-09-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本大青组织培养快速繁殖方法及应用在说明书摘要公布了:本发明涉及植物组培技术领域,为一种大青组织培养快速繁殖方法及应用,本发明以未木质化的幼嫩茎段为外植体经清洁后依次用75%酒精、0.1%升汞溶液灭菌,通过初代诱导、继代增殖、壮芽培养和生根培养,建立了大青组培快繁技术体系,为其生产繁殖、野生种质资源的收集保存、引种驯化、开发利用等提供技术支撑。本发明通过外植体采集时机和灭菌时长的掌控,使外植体接种污染率控制在15%以内,且死亡率控制在10%以内;初代诱导时聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的加入可有效抑制外植体褐变;通过激素调控使初代诱导率高达80%以上,增殖系数达到11.6左右,生根率达95%以上;壮芽和生根培养时添加一定浓度的椰汁使叶片更加鲜绿,苗和根更加健壮,最终提高炼苗成活率。
本发明授权大青组织培养快速繁殖方法及应用在权利要求书中公布了:1.大青组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤包括:(1)外植体采集:连续晴朗2~3天后的某天,于上午10点后取未木质化的幼嫩茎段为外植体;(2)外植体灭菌:剪除叶片的茎段经清洗后转移至超净台,用75%酒精溶液浸泡震荡灭菌20~30s,无菌水涮洗2~3次,0.1%升汞溶液浸泡震荡灭菌7~8min,无菌水涮洗4~5次,无菌滤纸吸干茎段表面水分;(3)初代诱导:外植体剪成1.0~2.0cm的带节小段,按极性接种于初代诱导培养基中培养15~20天;所述初代诱导培养基的配方为:WPM培养基+6-BA0.4~0.6mgL+NAA0.01~0.02mgL+PVP3.0~5.0gL+蔗糖25.0~35.0gL+琼脂6.5~7.5gL;(4)继代增殖:初代诱导的丛生芽切成单芽,按极性接种于继代增殖培养基中培养25~35天;所述继代增殖培养基的配方为:MS培养基+6-BA1.0~1.2mgL+TDZ0.01~0.02mgL+IBA0.4~0.6mgL+蔗糖25.0~35.0gL+琼脂6.5~7.5gL;(5)壮芽培养:继代增殖培养的丛生芽分成单芽,按极性接种于壮芽培养基中培养25~35天;所述壮芽培养基的配方为:MS培养基+6-BA1.8~2.0mgL+椰汁45.0~55.0mLL+蔗糖25.0~35.0gL+琼脂6.5~7.5gL;(6)生根培养:壮芽培养后的单芽接种于生根培养基中培养30~40天;所述生根培养基的配方为:12MS培养基+NAA0.5~0.7mgL+IBA0.2~0.3mgL+椰汁45.0~55.0mLL+蔗糖25.0~35.0gL+琼脂6.5~7.5gL。
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