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龙图腾网恭喜成都大熊猫繁育研究基地申请的专利一种大熊猫永生化肾细胞系GPK-1、制备方法和用途获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119776258B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510286344.1，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权一种大熊猫永生化肾细胞系GPK-1、制备方法和用途是由安俊辉;刘玉良;侯蓉;肖潇;李红艳;王东辉;李媛;陈佳松设计研发完成，并于2025-03-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种大熊猫永生化肾细胞系GPK-1、制备方法和用途在说明书摘要公布了：本发明公开了一种大熊猫永生化肾细胞系GPK‑1、制备方法和用途，属于永生化细胞技术领域。其制备方法如下：（1）采集已死亡大熊猫的肾脏组织，将其置于保护液中浸泡；（2）对经步骤（1）处理后的肾脏组织进行两步消化；（3）对消化后的细胞进行培养传代，然后用携带neomycin抗性基因与SV40‑LT基因的慢病毒感染传代细胞，再筛选建立大熊猫永生化肾细胞系。本发明提供了一种大熊猫肾源细胞高效分离、培养技术，并建立了一株永生化大熊猫肾源细胞系GPK‑1。与大熊猫原代肾脏细胞进行对比，GPK‑1保留了正常的核型与相关分子特性，并在细胞传代次数、增殖效率以及转染效率方面得到了显著提升。

本发明授权一种大熊猫永生化肾细胞系GPK-1、制备方法和用途在权利要求书中公布了：1.一种大熊猫永生化肾细胞系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1采集已死亡大熊猫的肾脏组织，将其置于保护液中浸泡10～20min；所述保护液包括浓度为50～80μM的白藜芦醇、浓度为30～50μM的褪黑素以及浓度为50～100μgmL大熊猫乳汁细胞外泌体提取物；所述大熊猫乳汁细胞外泌体提取物的制备方法如下：取培养1-5代的大熊猫乳汁细胞，待细胞汇合度达80％时，弃去完全培养基，清洗贴壁细胞后加入不含FBS的低糖DMEM培养48h，收集细胞上清液并离心分离获得大熊猫乳汁细胞外泌体提取物；2对经步骤1处理后的肾脏组织进行两步消化；两步消化的具体过程为：于37℃，用消化液I水浴消化10～15min，离心后，再用消化液II继续水浴消化10～15min；所述消化液I包括DMEMF12、浓度为2～5mgmL的Ⅳ型胶原酶、浓度为1～5mgmL的透明质酸酶以及浓度为0.1～0.5mgmL的DNaseI；消化液II包括浓度为0.1～0.5mgmL的DNaseI，以及0.25％胰蛋白酶；3对消化后的细胞进行培养传代，然后用携带neomycin抗性基因与SV40-LT基因的慢病毒感染传代细胞，再筛选建立大熊猫永生化肾细胞系。

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