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龙图腾网恭喜内蒙古农业大学申请的专利一种测定酵母培养物中α-甘露聚糖含量的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119574754B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510138627.1，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种测定酵母培养物中α-甘露聚糖含量的方法是由刘大程;张小洁;徐子萱;杨岚;陈灰设计研发完成，并于2025-02-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种测定酵母培养物中α-甘露聚糖含量的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种测定酵母培养物中α‑甘露聚糖含量的方法，属于化学分析技术领域，方法包括：预处理；水解；衍生化反应；标准曲线的绘制和测定。本发明用于定量分析YC中α‑甘露聚糖的含量，该方法将为YC的进一步开发和制备提供重要的参考依据，并为相关领域的发展贡献更多有价值的科学数据，借助此方法，我们能够更精确地评估YC中α‑甘露聚糖的含量，从而确保产品的质量和功能性声明的准确性。

本发明授权一种测定酵母培养物中α-甘露聚糖含量的方法在权利要求书中公布了：1.一种测定酵母培养物中α-甘露聚糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1预处理：将待测酵母培养物样品和已知纯度的酵母甘露聚糖对照品粉碎后过筛，备用；2水解：称取预处理后的待测样品和已知纯度的酵母甘露聚糖对照品，分别置于试管中加入浓度为12molL冰硫酸，震荡混匀后立刻置于冰水中孵育30min，然后向各试管中加入水，混匀后置于沸水浴中孵育30min，将装有待测样品试管中的溶液用装有MES缓冲溶液的水洗瓶转移至离心管中，将装有酵母甘露聚糖对照品试管中的溶液用装有MES缓冲溶液的水洗瓶转移至锥形瓶中，再然后向离心管和锥形瓶中分别加入氢氧化钠水溶液，用MES缓冲溶液定容至未超过且接近刻度线，用或不用氢氧化钠水溶液调节pH至4.5-5.5，最后用MES缓冲溶液定容至刻度，分别取水解后的溶液进行离心，收集上清液至离心管底部，向离心管中加入α-甘露糖苷酶悬浮液的稀释液充分混匀后置于37℃恒温水浴锅中水浴17h，分别得到样品溶液和对照品溶液；3衍生化反应：取步骤2得到的样品溶液和对照品溶液分别加入PMP-甲醇溶液和氢氧化钠水溶液后70℃水浴加热10min，然后加入盐酸，再每次用3mL三氯甲烷重复萃取4次，最后取上层水相进行离心，收集上清液针头式滤膜，得到供试品溶液和供试品对照溶液。4标准曲线的绘制和测定：将甘露糖标准品加入水溶解，配制成1mgmL的标准储备液，4℃保存，将标准储备液稀释成浓度分别为0.5、5、10、50、100、400μgmL的标准系列工作液，现用现配；将标准系列工作液分别按照步骤3进行衍生化反应；将衍生化反应后的标准系列工作液、供试品溶液和供试品对照溶液分别采用高效液相色谱仪进行测定，高效液相色谱条件为：色谱柱：AcclaimTMC30，5μm4.6×250mm液相色谱柱；流动相：浓度为0.1molL、pH为5.5的乙酸铵水溶液和乙腈的体积比为75:25的混合溶液；流速：1.0mLmin；柱温：35℃；检测器：紫外检测器；检测波长：254nm；进样量：10μL；对标准系列工作液的甘露糖目标峰进行分析得到色谱峰面积，以标准系列工作液浓度为横坐标，以标准系列工作液的色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程，分别对供试品溶液和供试品对照溶液的甘露糖目标峰进行分析得到色谱峰面积，通过线性回归方程，计算出供试品溶液和供试品对照溶液的甘露糖色谱峰面积对应的浓度，根据公式1-3计算待测酵母培养物样品中α-甘露聚糖的含量，计算公式为： 式中：Xi-待测样品中α-甘露聚糖的含量，以质量百分数表示，％；Xi对照-待测酵母甘露聚糖对照品中酵母甘露聚糖的含量，以质量百分数表示，％；c1-供试品溶液中甘露糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；c2-供试品对照溶液中甘露糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；m1-水解称取待测样品的质量，g；m2-水解称取酵母甘露聚糖对照品的质量，g；V1-水解待测样品定容体积，mL；V2-水解酵母甘露聚糖对照品定容体积，mL；F-待测样品在试验过程中α-甘露聚糖被破坏或损耗造成的结果偏低的校正因子；P-酵母甘露聚糖对照品的纯度，％；W-酵母甘露聚糖对照品的水分含量，％；n-即8.5，收集上清液制备样品溶液或对照品溶液，加入α-甘露糖苷酶，再加入PMP-甲醇溶液、氢氧化钠水溶液和盐酸后的上清液的体积稀释倍数；0.9-将甘露糖含量换算成甘露聚糖含量的系数；Xi、Xi对照和F做多个重复测定，F和Xi测定结果以多个重复测定结果的算术平均值±标准差表示，保留3位有效数字；所述α-甘露糖苷酶悬浮液的稀释液的制备方法包括如下步骤：将1mg，酶活≥15Umg的α-甘露糖苷酶悬浮于NH42SO4浓度为3molL和乙酸锌浓度为0.1mmolL的混合水溶液中，得到230-250μLpH为7.5的α-甘露糖苷酶悬浮液，向α-甘露糖苷酶悬浮液中加入1mL超纯水进行稀释，4℃储存，一周内使用完。

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