恭喜中国医学科学院药用植物研究所宋经元获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国医学科学院药用植物研究所申请的专利基于时珍法的中药鉴定方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118345184B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410528276.0,技术领域涉及:C12Q1/6895;该发明授权基于时珍法的中药鉴定方法及应用是由宋经元;郝利军;许文杰;齐桂红;甘雨桐;辛天怡设计研发完成,并于2023-03-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于时珍法的中药鉴定方法及应用在说明书摘要公布了:本申请公开了一种基于时珍法的大黄鉴定方法及应用,其中,利用中药基原物种的核、叶绿体和线粒体基因组得到标准特异性靶标序列,从而能够基于所述标准特异性靶标序列实现对待检测样品的物种鉴定。时珍法可筛选获得判定任意待检测中药样品与指定中药基原物种同一性的标准特异性靶标序列,消除了脱靶等失误风险,由此,时珍法可准确判定任意待检测中药样品与指定中药基原物种的同一性。
本发明授权基于时珍法的中药鉴定方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种基于时珍法的大黄鉴定方法,包括:1通过构建基因组图谱或浅层测序获得中药基原物种的核、叶绿体和线粒体基因组序列,将所述中药基原物种的核、叶绿体和线粒体基因组序列分成L-K+1个长度为K的片段,以构建小片段基因组文库,并计算每个片段的拷贝数,再通过与基因组比对确定每个片段的基因组位置,其中L表示基因组序列长度,K表示文库片段长度,其中,K为18-30bp,所述中药基原物种为药用大黄;2根据Taqmanprobe-basedreal-timePCR系统从所述小片段基因组文库中提取候选靶标序列并进行分析,从所述候选靶标序列中筛选符合如下筛选条件的候选序列作为标准特异性靶标序列,所述筛选条件包括:候选序列及扩增候选序列所在区域的引物中的G+C含量为30%-80%;根据候选序列设计的荧光探针与上下游扩增候选序列所在区域的引物退火温度分别为55℃-60℃以及68℃-70℃,且引物对间退火温度相差不超过2℃;候选序列及扩增候选序列所在区域的引物长度为15-30bp;上下游扩增候选序列所在区域的引物间隔50-150bp且正向引物靠近根据候选序列设计的荧光探针;根据候选序列设计的荧光探针与上下游扩增候选序列所在区域的引物不含发卡结构且引物对不能形成二聚体;上下游扩增候选序列所在区域的引物3'端5bp内GC碱基不超过两个;根据候选序列设计的荧光探针中的C碱基多于G碱基;和或候选序列与混伪品及近缘物种的核、叶绿体和线粒体基因组进行比对至少含有2个差异核苷酸;所述标准特异性靶标序列由SEQIDNO:17示出的靶标核苷酸序列构成;3提取待检测中药样品的基因组DNA,任选地对其进行扩增,将所述基因组DNA或其扩增产物作为DNA底物,利用靶标序列检测系统来检测所述DNA底物中是否存在所述标准特异性靶标序列,其中,所述靶标序列检测系统Taqmanprobe-basedreal-timePCR系统通过所述检测若CT值大于37,则所述待检测中药样品与指定的中药基原物种具有同一性,反之则没有。
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