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龙图腾网恭喜上海水大技术转移有限公司申请的专利低温胁迫生物模型和构建方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119744811B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510265178.7，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权低温胁迫生物模型和构建方法及其应用是由陈良标;胡瑞芹;刘洋;李玮;邹路芳;江守文;吴智超;黄松钱设计研发完成，并于2025-03-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本低温胁迫生物模型和构建方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术领域，具体涉及低温胁迫生物模型和构建方法及其应用。本研究通过同源重组技术，成功构建表达NPAFP蛋白的低温胁迫小鼠模型，并利用CAG启动子驱动NPAFP蛋白在小鼠体内的稳定表达。这些转基因小鼠将作为研究NPAFP蛋白在哺乳动物体内功能的基础，特别是在低温胁迫下的生理反应及机制探究。通过构建稳定表达NPAFP蛋白的低温胁迫罗非鱼模型，提高罗非鱼在低温环境下的存活率，为水产养殖业的可持续发展提供新的解决方案。通过构建稳定表达NPAFP蛋白的低温胁迫斑马鱼模型，进一步探索NPAFP在水生生物中的抗寒功能，并对其在低温胁迫及氧化应激防护中的潜力进行验证。

本发明授权低温胁迫生物模型和构建方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种低温胁迫小鼠模型制备方法，所述低温胁迫小鼠模型通过基因编辑技术，将构建的表达NPAFP蛋白的质粒导入小鼠体内，得到稳定遗传并表达NPAFP蛋白的杂合子和纯合子个体；所述NPAFP蛋白选自NPAFP1、NPAFP2、NPAFP3或NPAFP4；所述NPAFP1、NPAFP2、NPAFP3和NPAFP4的DNA序列分别如SEQIDNO.1~4所示；所述制备方法包括如下步骤：1构建质粒：利用CAG启动子构建表达NPAFP的Donorvector质粒；2构建特异性引物：在H11插入位点的5’端和3’端，以及H11插入位点的上下游区域设计针对NPAFP基因的特异性引物；3显微注射：将（1）中样品显微注射到C57BL6JGpt背景的小鼠受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内，待其怀孕产仔；4基因型鉴定：受体鼠生出的F0代小仔在5-7天剪尾及剪脚趾编号，提取基因组DNA进行PCR和测序鉴定，对小鼠进行基因型鉴定；5NPAFP基因功能揭示：利用阳性F1代小鼠进行自交，获得同胞的3月龄杂合子和WT小鼠，进一步研究揭示NPAFP基因的功能；6获得具有NPAFP功能的模型即为低温胁迫小鼠模型。

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