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龙图腾网恭喜重庆安赛搏新材料技术有限公司申请的专利一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和规模化悬浮培养方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN109517782B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：201811630522.4，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和规模化悬浮培养方法是由王鹏;刘水燕;张萌;何俊雄;张卫;谭光伟设计研发完成，并于2018-12-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和规模化悬浮培养方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和反应器悬浮培养方法。本发明主要针对现有技术的技术缺陷，提供一种可稳定获得高山火绒草高产黄酮的愈伤组织并进行反应器规模化培养的方法，解决当前尚无高黄酮含量的高山火绒草细胞系的问题。本发明通过对培养基中基础元素和激素进行大量筛选比较和其它实验条件摸索，建立了一种高山火绒草愈伤诱导方法，以无菌苗的茎、叶片等诱导愈伤组织，并建立了可培养高产黄酮类化合物的高山火绒草细胞系的组织培养方案，并能使用一次性生物反应器逐级放大，量产高产黄酮的高山火绒草细胞。

本发明授权一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和规模化悬浮培养方法在权利要求书中公布了：1.一种高产黄酮的高山火绒草愈伤组织诱导和反应器悬浮培养方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）高山火绒草种子消毒：将高山火绒草种子用自来水洗去尘土后，75%乙醇消毒30-60s，4%次氯酸钠溶液消毒8-10min，无菌水洗涤4次，置于基础培养基BM上，20-25℃培养，光照强度500-1000lux；7-21天即可萌发；所述的基础培养基BM指的是：12MS+30gL蔗糖，琼脂0.7-1.0%，pH5.8-6.0；（2）高山火绒草愈伤组织诱导：取无菌苗的叶片或茎分割为边长0.5-1cm方片或茎段，置于愈伤诱导培养基CIM，20-25℃培养，光照强度＜1000lux，14-21d即在切口边缘形成黄色疏松的愈伤组织，将愈伤组织分成约0.5cm小块，置于愈伤继代培养基CM1，20-25℃培养，光照强度＜1000lux，每10-15d继代一次；所述的愈伤诱导培养基CIM指的是：B5+2-4mgL2,4-D+0.1-0.5mgL6-BA+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，琼脂0.7-1.0%，pH5.8-6.0；所述的愈伤继代培养基CM1指的是：B5+1-2.5mgL2,4-D+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，琼脂0.7-1.0%，pH5.8-6.0；（3）高山火绒草愈伤组织悬浮培养：选取质地疏松、颜色浅黄色至黄色、生长速度快的高山火绒草愈伤组织，按1g10mL比例接入悬浮培养基CM2，置于摇床100-115rpm培养，温度保持20-25℃，按5-15g100mL湿重比例每7d继代一次；生长速度2-3倍7d；所述的悬浮培养基CM2指的是B5+1-2mgL2,4-D+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，pH5.8-6.0；（4）高山火绒草愈伤组织的一次性生物反应器培养：选取状态一致的已培养7d的悬浮培养材料，向5L一次性生物反应器中接入1500-2500mL培养物和除菌处理的2500-3500mL悬浮培养基CM2使终体积为5000mL，振频为9.5次min，通空气为0.1m³h，培养7d，继代时，将培养物接入新的一次性生物反应器，加入2-4倍体积的悬浮培养基CM2，振荡并通气培养；其中，所述步骤（2）诱导得到的、所述步骤（3）、（4）培养得到的高山火绒草愈伤组织的黄酮含量≥9%。

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