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西北农林科技大学袁黎获国家专利权

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龙图腾网获悉西北农林科技大学申请的专利一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119570840B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411775242.8,技术领域涉及:C12N15/82;该发明授权一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法是由袁黎;张琪辉;张杨雨祺;游兴海;彭影辉;许国奇;杨芳;钟钰;朱忠厚设计研发完成,并于2024-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。

一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法,属于植物基因工程技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法,通过CRISPRCas9基因编辑技术对西瓜ClMSL1进行基因编辑,使该基因功能缺失,从而产生隐性细胞核雄性不育的表型。通过本发明方法创制的西瓜雄性不育系与正常的材料相比,除了雄花育性发生改变外,其他组织如根、茎、叶、卷须、雌花、果实、种子、生长势等都无可见表型变化。如果将创制的雄性不育新种质用于杂交种子生产将大幅度降低人工成本,提高制种效率,具有重要的生产应用潜力。

本发明授权一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法在权利要求书中公布了:1.一种通过基因编辑ClMS1L1创制西瓜雄性不育种质的方法,其特征在于,具体步骤如下: (1)根据ClMS1L1的基因组DNA序列在ClMS1L1的第三个外显子上设计2个靶点,命名为Target1和Target2; 所述ClMS1L1基因组DNA序列如SEQIDNO.1所示; 所述靶点Target1、Target2序列如下: Target1序列:5’-GTTGAGCATGAAATGGAGG-3’; Target2序列:5’-TATTTATATCGGCGATACA-3’; (2)构建CRISPRCas9双靶点敲除载体; ①利用限制性内切酶BsaI-HF对CRISPRCas9载体pBSE402进行酶切,回收酶切后的载体pBSE402; ②以中间载体pCBC-DT1T2为模板,利用引物Target1-FTarget2-R进行PCR扩增,回收目的片段; ③将步骤①酶切后的载体pBSE402与步骤②回收的目的片段进行同源重组,转化DH5α感受态; ④将步骤③得到的菌落进行鉴定并把条带大小正确的菌落接菌、摇菌、抽提重组质粒进行测序,将测序正确的重组质粒转化至农杆菌EHA105感受态中; (3)西瓜遗传转化; 经过浸染、共培养、恢复培养、选择培养、芽伸长培养和生根培养阶段得到基因编辑植株并进行表型观察; 所述引物Target1-FTarget2-R序列如下: Target1-F: 5’-TCGAAGTAGTGATTGGTTGAGCATGAAATGGAGGGTTTTAGAGCTAGAAATAGC-3’; Target2-R: 5’-TTCTAGCTCTAAAACTGTATCGCCGATATAAATACAATCTCTTAGTCGA-3’。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人西北农林科技大学,其通讯地址为:712100 陕西省咸阳市杨凌示范区邰城路3号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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