杭州瑞普晨创科技有限公司吴双双获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州瑞普晨创科技有限公司申请的专利一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117723471B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311709827.5,技术领域涉及:G01N15/14;该发明授权一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法是由吴双双;司雨欣;曹楠设计研发完成,并于2023-12-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法:待检测胰岛细胞球进行消化,制得单细胞悬液;PBS缓冲液中加入体积分数0.1~5%HSA,作为细胞保护液,单细胞悬液中加入细胞保护液,再加入PI染色液进行染色;染色后的样品进行流式检测,得到活细胞占比数据。本发明使用低浓度的PI染色液进行染色,提高染色效果,染色后的细胞用流式细胞术进行分选,采用HSA作为细胞保护液,对流式检测过程中的胰岛细胞进行保护,减少制样时间以及流式检测对胰岛细胞的损伤,维持细胞活性,可标准化规范化操作,避免人为判断误差,客观且准确的检测到了胰岛活率,重复性高,检测成本低有望应用于临床胰岛移植前活率判定。
本发明授权一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法在权利要求书中公布了:1.一种人多能干细胞来源胰岛细胞活性检测方法,其特征在于所述方法包括以下步骤: (1)待检测胰岛细胞球采用Accutase酶进行消化,制得单细胞悬液;所述待检测胰岛细胞球为人多能干细胞来源胰岛细胞球,是将人多能干细胞经过化学小分子诱导培养得到; (2)PBS缓冲液中加入体积分数0.1~5%HSA,作为细胞保护液,单细胞悬液中加入细胞保护液,再加入PI染色液进行染色;单细胞悬液、细胞保护液的体积比为200:80~120;PI染色液的浓度为0.02~0.04mgmL,单细胞悬液、PI染色液的体积比为200:20~40; (3)染色后的样品进行流式检测,得到活细胞占比数据。
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