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龙图腾网恭喜安德烈斯·黑兰-维韦斯;简·贝内尔-里维罗斯申请的专利使用耳垢测定皮质醇和葡萄糖平均浓度的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113748341B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：201880087936.9，技术领域涉及：G01N33/483；该发明授权使用耳垢测定皮质醇和葡萄糖平均浓度的方法是由安德烈斯·黑兰-维韦斯;简·贝内尔-里维罗斯设计研发完成，并于2018-12-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本使用耳垢测定皮质醇和葡萄糖平均浓度的方法在说明书摘要公布了：一种在耳垢中测量葡萄糖和皮质醇水平的方法，其中，将测得的皮质醇和葡萄糖水平解释为平均皮质醇和葡萄糖水平；以及一种安全、实用、可靠、卫生的耳垢自提取医疗设备。

本发明授权使用耳垢测定皮质醇和葡萄糖平均浓度的方法在权利要求书中公布了：1.一种测量耳垢中葡萄糖和皮质醇水平的方法，包括以下步骤： 通过任何合适的方法从耳朵中提取耳垢样本； 按照测量方法准备耳垢样本以测量皮质醇和葡萄糖水平； 使用任何已知的手段或方法测量皮质醇和葡萄糖，其中将皮质醇和葡萄糖的水平解释为长期平均皮质醇和葡萄糖水平， 其中： 耳垢的提取通过包括以下部分的提取装置进行： 具有第一和第二端的手柄，所述第二端具有联接装置： 可拆卸的海绵头尖端，其包括基座和直接从基座上部悬垂、纵向延伸的细长构件，其中，基座的下部有联接手柄的部分，并且其中，细长构件具有星形横截面； 细长的海绵，其有位于中央的纵向壳体，用于容纳基座的细长部件； 其中，通过将带有海绵的尖端插入耳朵并在耳道内旋转海绵来获得耳垢， 其中： 样本的制备通过以下方式进行： a干燥耳垢样本，直到所有水分从样本中蒸发为止，该步骤使用冻干来完成； b称量干燥耳垢样本的重量，以通过干重来标准化皮质醇的量，归一化是指将测得的重量调整到标准比例，以便能够比较数据； c用1ml磷酸盐缓冲盐溶液PBS使干燥后的样本均质化，获得耳垢的PBS溶液，磷酸盐缓冲盐水PBS溶液的体积是耳垢10重量的10倍，此外，能够使用任何亲水性溶剂； d将步骤c中获得的溶液分为第一溶液部分和第二溶液部分，并将每个溶液部分分别添加到试管中； e在PBS和第一溶液部分之间以1∶1的比例向第一溶液部分中添加溶剂，以获得耳垢在PBS与溶剂中的混合溶液； f在至少一分钟内搅拌装有步骤e获得的溶液的试管，以使其充分混合，并在重悬后加入0.5mg的二乙醚，与PBS的比例为1:1； g在至少两个小时内，将步骤g中获得的混合溶液在-18至-21℃的温度下冷却，以确保液体部分被冷冻并且不污染有机部分，该步骤提取那些明确溶解在二乙醚中的化合物，采取该步骤是因为尽管二乙醚部分在-20℃下保持液态，但磷酸盐部分却被冻结了； h从冷却的溶液中提取明确溶于二乙醚的化合物； i干燥剩余的液体溶液； j将步骤i中得到的干燥部分储存在-80℃下以备进一步使用； k向第二溶液部分中加入300pg皮质醇，以得到耳垢与皮质醇混合后在PBS中的溶液； I向步骤k获得的溶液中加入0.5ml溶剂，以定量纯化的皮质醇的量； m在至少一分钟内搅拌装有步骤I所得溶液的试管，获得的溶液在重悬后向其加入0.5mg乙醚，与PBS的比例为1:1； n在至少两个小时内，将步骤m获得的混合溶液在-18至-21℃的温度下冷却，确保液体部分被冷冻，并且不会污染有机部分； o从冷却的溶液中萃取明确溶于二乙醚的化合物； p干燥剩余的液体溶液； q将步骤i中获得的干燥部分储存在-20至-90℃之间的温度下以供进一步使用； r将0.5ml300pgml的纯化皮质醇溶液在pH介于6.8和7.2之间的PBS中溶解，进行此步骤为了提升皮质醇耳垢提取方案的效率， s对第二溶液部分进行与第一溶液部分相同的程序以从中提取皮质醇， 皮质醇的测量通过以下方法进行： a使用制造商提供的缓冲液分析法对提取的样本进行重构，该方法使用比色竞争ELISA技术，通过向提取的样本中添加缓冲液以获得溶液，通过将其静置并搅拌来对皮质醇进行定量； b使用测量皮质醇的标准曲线-酶标仪NovoStar来测量样本中皮质醇的总量； c使用荧光技术将耳垢的干重归一化，其中荧光计在530-570nm范围内激发，在590-600nm发射范围内读数，由于年龄，性别，不同的医疗状况和压力水平等多个变量会影响耳垢中皮质醇的水平，而胆固醇水平不受上述变量的影响，因此使用胆固醇水平以避免这些协变量使皮质醇的结果混淆，并且遵循制造商的说明，使用试剂盒对溶解的耳垢溶液中的葡萄糖含量进行测量，其中葡萄糖吸收量在505nm处一式三份进行定量，使用其吸收平均值获得葡萄糖浓度mgdl，根据标准化过程后样本的初始重量，计算溶液中的葡萄糖总量。

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