海南乾景越实业集团有限公司张英获国家专利权
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龙图腾网获悉海南乾景越实业集团有限公司申请的专利一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119678852B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510220733.4,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法是由张英;张师嘉;张师源;毛宏伟设计研发完成,并于2025-02-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法在说明书摘要公布了:本发明属农业生物技术领域,涉及一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法,采集海南五指山雨林区域野生金钗石斛种子作为外植体,经过原球茎诱导、增殖,分化出小苗后进行生根培养获得完整再生植株。本发明以海南五指山雨林区域野生金钗石斛种子为外植体进行组织培养,能够提高分化率,提高扩繁速度,并且模拟海南五指山雨林区域的环境因子作为培养条件,使种苗能够在类野外环境下培育,所得金钗石斛种苗遗传性状稳定、变异小,缩短了种苗大田移栽驯化时间,提高移栽的成活率,加快移栽后的生长速度和生长量,而且,产品有效成分的含量均高于其它产区同类产品,为推动海南地区金钗石斛产业的可持续发展奠定了材料和技术基础。
本发明授权一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法在权利要求书中公布了:1.一种热带雨林金钗石斛优良种苗的繁育方法,其特征在于,其步骤如下: 步骤S1,采集海南五指山雨林区域野生金钗石斛种子,选择成熟度适中、饱满且无病虫害的种子进行表面消毒处理后作为外植体; 步骤S2,将金钗石斛种子接种至诱导培养基中,种子萌发形成原球茎,培养条件如下:光照强度为2800~3300lx,每天光照周期为12小时光照12小时黑暗,光照时温度为25~27℃,黑暗时温度18~20℃,湿度为75~85%,环境中维持空气中负氧离子浓度在每立方厘米3000个以上;所述诱导培养基为改良MS培养基+蛋白胨200~250mgL+FeSO4·7H2O10~20mgL+K2SO4150~250mgL+Na2-EDTA10~20mgL+氨基乙酸3~5mgL+泛酸钙3~6mgL+6-BA4~6mgL+2,4-D2~4mgL+NAA0.1~0.3mgL+蔗糖300~350mgL+5.0gL琼脂,pH为5.8; 步骤S3,将原球茎接种至增殖培养基中进行增殖培养,原球茎不断增殖并形成类原球茎丛,培养条件如下:光照强度为2800~3300lx,每天光照周期为12小时光照12小时黑暗,光照时温度为25~27℃,黑暗时温度18~20℃,湿度为75~85%,环境中维持空气中负氧离子浓度在每立方厘米3000个以上;所述增殖培养基为改良MS培养基+蛋白胨200~250mgL+FeSO4·7H2O10~20mgL+K2SO4150~250mgL+氨基乙酸3~5mgL+泛酸钙3~6mgL+6-BA1~2mgL+2,4-D1~2mgL+NAA0.1~0.3mgL+蔗糖300~350mgL+5.0gL琼脂,pH为5.8; 步骤S4,从增殖的类原球茎丛中选取生长良好、翠绿色、结构较为致密的类原球茎转入分化培养基中进行分化培养,得到丛生芽;培养条件如下:光照强度为2800~3300lx,每天光照周期为12小时光照12小时黑暗,光照时温度为25~27℃,黑暗时温度18~20℃,湿度为75~85%,环境中维持空气中负氧离子浓度在每立方厘米3000个以上;所述分化培养基为改良MS培养基+蛋白胨200~250mgL+FeSO4·7H2O10~20mgL+K2SO4150~250mgL+Na2-EDTA10~20mgL+氨基乙酸3~5mgL+泛酸钙3~6mgL+谷氨酰胺100~150mgL+2ip0.2~0.5mgL+6-BA3~5mgL+NAA0.2~0.5mgL+蔗糖300~350mgL+5.0gL琼脂,pH为5.8; 步骤S5,将分化出的丛生芽切割成单个芽,接种在生根壮苗培养基上培养,获得完整再生植株,培养条件如下:光照强度为2800~3300lx,每天光照周期为12小时光照12小时黑暗,光照时温度为25~27℃,黑暗时温度18~20℃,湿度为75~85%,环境中维持空气中负氧离子浓度在每立方厘米3000个以上;所述生根壮苗培养基为改良MS培养基+蛋白胨200~250mgL+氨基乙酸3~5mgL+生物素3~6mgL+6-BA3~5mgL+NAA0.2~0.5mgL+IBA0.5~0.8mgL+蔗糖300~350mgL+5.0gL琼脂,pH为5.8; 所述改良MS培养基是在MS培养基的基础上,调整大量元素为原含量的34,调整微量元素的含量为原含量的2倍,其它成分不变。
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