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温州医科大学附属眼视光医院谢彬涛获国家专利权

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龙图腾网获悉温州医科大学附属眼视光医院申请的专利一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119688889B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510193983.3,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法及应用是由谢彬涛;陈绮;李玲琍;周仲楼;项略;翟英;谢斌设计研发完成,并于2025-02-21向国家知识产权局提交的专利申请。

一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法及应用在说明书摘要公布了:一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法及应用,用于视网膜色素上皮脉络膜复合体的高深度、高灵敏度蛋白质组学分析,且同样适用于其他微量样本的蛋白质组学深度测试,具有广泛的适用性和灵活性,本发明通过系统性优化LC‑FAIMS‑MSMS参数,攻克痕量组织蛋白质组覆盖度低、定量稳定性差的技术瓶颈,为疾病机制研究及生物标志物发现提供高灵敏解决方案,本方法将蛋白质鉴定数提升28%,动态范围扩展至6个数量级,且定量重复性提高,缺失值比例降低至6%;可检出AMD相关低丰度蛋白及10种细胞类型标记物,助力疾病机制研究。

本发明授权一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种针对微量样本进行深度蛋白质组学分析方法,其特征在于,采用高场非对称波形离子迁移谱FAIMS优化的液相色谱-串联质谱LC-MSMS方法对微量样本进行深度蛋白质组学分析,包括以下步骤: S1、样本处理:将微量组织样本经胰蛋白酶赖氨酸蛋白质酶LYS-C混合物消化后,取肽段进行上样,所述的微量样本为包括视网膜色素上皮脉络膜复合体的生物组织或细胞样本; S2、液相色谱分离:将处理后的样本通过优化的液相色谱系统进行分离,液相色谱系统中分析柱为75µm×25cm,流动相A为体积百分比0.1%的甲酸水,流动相B为含体积百分比0.1%的甲酸的体积百分比80%的乙腈溶液,色谱梯度时间为180分钟,柱温为40℃,流速为300nlmin,峰容量为152;乙腈体积终浓度为55%,并增加疏水性肽段的洗脱,使洗脱总肽段的比例提高至97%以上; S3、FAIMS分离:利用优化的FAIMS参数对分离后的离子进行进一步分离和富集,FAIMS分离中为采用3个补偿电压CV组合-40V、-55V、-75V或-45V、-60V、-80V达到最佳的多电荷肽段分离和蛋白质鉴定效果,载气流量为4.6Lmin,内外电极温度为100℃; S4、质谱检测:通过质谱仪进行高分辨率质谱分析,结合离子阱作为二级质谱MS2分析器,获取高覆盖率和高动态范围的蛋白质组数据,质谱检测具体为全扫描模式下轨道阱Orbitrap分辨率60000,质荷比mz扫描范围为350-1500;数据依赖型二级碎片扫描DDA-MS²模式下,采用30%能量高能碰撞解离HCD碎裂,离子阱检测,自动增益控制目标值AGCtarget为1E4,最大注入时间25毫秒,动态排除时间50秒,循环时间为1.2秒。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人温州医科大学附属眼视光医院,其通讯地址为:325000 浙江省温州市学院西路270号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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