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恭喜江苏省中国科学院植物研究所王鹏获国家专利权

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龙图腾网恭喜江苏省中国科学院植物研究所申请的专利一种高效的紫薇遗传转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115976101B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211431154.7,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权一种高效的紫薇遗传转化方法是由王鹏;姜聖姬;吕芬妮;高露璐;顾姣姣;李亚;杨如同;汪庆设计研发完成,并于2022-11-16向国家知识产权局提交的专利申请。

一种高效的紫薇遗传转化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种高效的紫薇遗传转化方法。本方法以紫薇无菌组培苗的幼嫩叶片为外植体,进行农杆菌介导的侵染,侵染结束后将外植体表面的菌液吸干,共培养后转移至愈伤诱导培养基中,18‑20天后转移至再生培养基中培育30‑40天,基于叶绿素荧光筛选技术获得转基因阳性植株,阳性率高达86.67%‑90.00%。本发明周期短、操作简便、遗传转化效率高,为紫薇分子育种、转基因生产及基因功能验证提供了重要的技术支撑,加快了紫薇新品种的培育进程。

本发明授权一种高效的紫薇遗传转化方法在权利要求书中公布了:1.一种高效的紫薇遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤: 1携带目的基因的农杆菌的制备: 将含有目的基因的植物表达载体通过冻融法导入农杆菌菌株EHA105感受态中,挑取单克隆,目的基因PCR检测确定阳性单克隆后,过夜摇菌,收集菌体,由重悬液重悬;所述重悬液是H2O+10mmolL2-N-吗啡啉乙磺酸+10mmolLMgCl2+200μmolL乙酰丁香酮,pH=6.0,农杆菌重悬液浓度为OD600=0.8-1.0; 2紫薇叶片的侵染:将新鲜叶片置于重悬的农杆菌菌液中,完全浸没叶片,100rpm震荡15分钟,吸水纸吸干叶片表面的农杆菌菌液后,将叶片接入共培养基中,25℃-28℃,暗培养48小时;所述共培养基是WPM+6-BA1.0mgL+NAA0.1mgL+蔗糖30gL+凝胶3gL; 3紫薇叶片的愈伤诱导和再生:共培养后的叶片转移至愈伤诱导培养基中进行愈伤诱导,18-20天后转移至再生培养基中进行再生,30-40天后获得再生植株,再生植株株高1.5-3.0厘米后,剪切后置于生根培养基中;所述愈伤诱导培养基是WPM+6-BA0.8mgL+NAA0.5mgL+Timentin200mgL+蔗糖30gL+凝胶3gL;所述再生培养基是WPM+6-BA1.0mgL+NAA0.1mgL+Timentin200mgL+蔗糖30gL+凝胶3gL; 4阳性植株检测:对步骤3中再生植株幼苗的叶片,提取DNA,进行报告基因的PCR检测,取再生植株的叶片进行荧光检测; 5阳性植株炼苗及移栽:挑选根系健壮的转基因阳性苗,拧松组培瓶瓶盖,5-7天后,清洗根系上的培养基,剪去老叶,留顶部4-6片叶子,移栽,移入生长室,一周后移出。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江苏省中国科学院植物研究所,其通讯地址为:210014 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园江苏省中科院植物研究所基地;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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