申请/专利权人：新疆农业科学院植物保护研究所

申请日：2019-07-10

公开（公告）日：2019-09-27

公开（公告）号：CN110278827A

主分类号：A01G18/00(20180101)

分类号：A01G18/00(20180101);A01G18/40(20180101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.07.13#授权;2019.10.29#实质审查的生效;2019.09.27#公开

摘要：本发明公开了一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，通过采用白灵菇菌种活化制备固体菌种，将白灵菇固体菌种野外接种于阿魏植物根部，建立了白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物的技术，并实现了白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植和出菇，平均定植率达88.29%，平均子实体发生率达28.4%，在白灵菇种质野外就地保育技术上取得重要进展，为白灵菇种质资源的就地保育及其生态保护提供了重要技术指导，使白灵菇种质资源得以保护和发展，在白灵菇种质资源的保护方面具有广泛的适用性。

主权项：1.一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于22℃～26℃培养箱暗培养7～10d，获得活化后的白灵菇菌丝体；（2）白灵菇母种制备，从步骤（1）制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于22℃～26℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；（3）白灵菇原种制备，从步骤（2）制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度50%-65%，温度22℃～26℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；（4）白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤（3）制备的白灵菇原种中挑取麦粒种20-30粒接种至栽培种培养基中，于温度为22℃～26℃，湿度为50%～65%的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；（5）阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，第2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；（6）阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，不要破坏阿魏根基部的腐根；（7）白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤（4）制备的白灵菇栽培种80-120g，分成2-4块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；（8）阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。

全文数据：一种白灵菇野外就地保育出菇的方法技术领域本发明涉及食用菌种质资源就地保育技术领域，具体的，本发明涉及一种白灵菇野外就地保育出菇的方法技术领域。背景技术白灵菇，中文正名白灵侧耳Pleurotustuoliensis，是一种食、药用价值都很高的珍稀美味食用菌。2016年MengranZhao等人发表的“ThefamouscultivatedmushroomBailingguisaseparatespeciesofthePleurotuseryngiispeciescomplex”文章和2018年于《菌物学报》中戴玉成等人发表“中国五种重要食用菌学名新注”文章中，通过系统发育研究对阿魏侧耳和白灵侧耳的这两种真菌进行了区分，在系统发育上为2个独立的分枝，而且支持率很高，此外，2种的分布区域也不同，故白灵侧耳被提升为一个独立的种。在我国，野生白灵菇仅分布于新疆境内，主要分布于准噶尔盆地边缘戈壁阿魏滩上，并选择性的腐生或寄生在中药阿魏植物的根基部组织上，每年只在4月下旬至5月上旬出菇，分布量十分稀少。近年，由于人类活动增加，生态环境恶化，气候变化，以及对资源过度采挖等，野生白灵菇资源保有量急剧下降，一些区域的野生白灵菇几乎消失。因此，白灵菇资源的就地保育和保护技术亟待解决。目前，关于白灵菇种质资源野外保育技术的研究还未见报道，而建立白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物技术，实现白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植和出菇，对白灵菇野生资源的就地保育及其生态保护具有重要意义。本发明研究团队在2016年12月26日，披露申报的专利CN106613351A，一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，该发明中公开了阿魏菇液体菌种制备和阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，该方法制备的液体菌种在野外接种阿魏植物过程中，由于戈壁滩干旱少雨，白天温度较高，导致部分液体菌种失活，影响菌丝体的定植成功率和稳定性，因此本团队汲取经验教训，就白灵菇野外就地保育出菇技术方法进行创新。发明内容针对现有技术中仅采用阿魏菇液体菌种制备和阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法制备的液体菌种在野外接种阿魏植物过程中，液体菌种易失活，菌丝定植率不稳定的现象，未见关于白灵菇种质资源野外就地保育出菇的技术现状，本发明旨在提供一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，通过采用白灵菇菌种活化制备固体菌种，将白灵菇固体菌种野外接种于阿魏植物根部，建立了白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物的技术，并实现了白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植和出菇，在白灵菇种质野外就地保育技术上取得重要进展，为白灵菇种质资源的就地保育及其生态保护提供了重要技术指导，使白灵菇种质资源得以保护和发展，在白灵菇种质资源的保护方面具有广泛的适用性。为了达到上述目的，本发明是通过如下技术方案实现。本发明具体提供一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，包括以下步骤：1白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于22℃～26℃培养箱暗培养7～10d，获得活化后的白灵菇菌丝体；2白灵菇母种制备，从步骤1制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于22℃～26℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；3白灵菇原种制备，从步骤2制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度50％-65％，温度22℃～26℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；4白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤3制备的白灵菇原种中挑取麦粒种20-30粒接种至栽培种培养基中，于温度为22℃～26℃，湿度为50％～65％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；5阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，第2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；6阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径为8-12cm，露出阿魏根基部，不要破坏阿魏根基部的腐根；7白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤4制备的白灵菇栽培种80-120g，分成2-4块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；8阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。优选的，本发明中白灵菇菌种活化在24℃培养箱暗培养8d，获得活化后的白灵菇菌丝体。优选的，本发明中白灵菇母种制备，于24℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种。优选的，本发明中白灵菇原种制备，于湿度55％-60％，温度24℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种。优选的，本发明中白灵菇栽培种制备，从白灵菇原种中挑取麦粒种25粒接种至栽培种培养基中，于温度为24℃，湿度为55％～60％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种。优选的，本发明中白灵菇栽培种接种阿魏植物，取白灵菇栽培种100g，分成3块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触。通过采用上述提供的技术方案，本发明获得以下有益效果：1本发明提供的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，通过采用白灵菇菌种活化制备固体菌种，将白灵菇固体菌种野外接种于阿魏植物根部，建立了白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物的技术，并实现了白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植和出菇，平均定植率达88.29％，平均子实体发生率达28.4％，实现白灵菇的野外出菇；在白灵菇种质野外就地保育技术上取得重要进展，为白灵菇种质资源的就地保育及其生态保护提供了重要技术指导，使白灵菇种质资源得以保护和发展，在白灵菇种质资源的保护方面具有广泛的适用性。2本发明提供的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，通过制备白灵菇栽培种，获得白灵菇固体菌种，菌种上的菌丝体能够保持较长时间的活力，菌块上菌丝体较浓密，利于白灵菇野外定植和保育出菇。3本发明提供的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，在白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物过程中，阿魏植物根部刨开17-20cm的深度，易于白灵菇固体菌种保水，使菌丝体能够保持较长时间的活力，利于白灵菇野外定植和保育出菇。附图说明附图1所示为白灵菇活化的菌丝体图。附图2所示为白灵菇母种图。附图3所示为白灵菇原种图。附图4所示为白灵菇栽培种图。附图5所示为白灵菇栽培种接种阿魏植物图。附图6所示为白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植和出菇图；其中，实线箭头指的白色区域为定植于阿魏植物根茎部的白灵菇菌丝体，虚线箭头指的白色区域为白灵菇固体菌种及其菌丝体，空心箭头指的白色物体为白灵菇子实体。具体实施方式为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。下面结合实施例详细说明本发明的技术方案，但保护范围不被此限制。主要培养基：PDA培养基平板配置方法：将马铃薯200g切成薄片，于适量水中煮至轻压易碎程度，用2至4层纱布过滤，取汁液，然后加入葡萄糖20g，琼脂粉20g，再补水定容至1000mL，摇匀后分装，于115℃高压蒸汽灭菌30min，趁热将培养基倒至培养皿中，培养基凝固后使用。麦粒培养基制备方法：取完整度较好的麦粒1kg，去除杂质，放入盆中，加入2倍于麦粒体积的清水，于25℃～35℃培养箱中浸泡18～24h，取出麦粒，沥干水分，分装至聚乙烯或聚丙烯菌袋，每袋分装体积为菌袋的12至23，盖好盖子，然后于121℃高压蒸汽灭菌120min，待培养基凉后使用。栽培种培养基制备方法：称取干而无霉变的新鲜棉籽壳82.4kg，充分预湿，然后加入麸皮15kg，白砂糖1kg，石膏粉1kg，过磷酸钙0.3kg和尿素0.3kg，充分搅拌均匀，将含水量调至60％～65％，用石灰粉将培养料PH值调至8～9，充分混匀后分装至聚丙烯菌袋中，封口后于100℃灭菌24h，待菌袋凉后使用。实施例一：1白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于22℃～26℃培养箱暗培养7～10d，获得活化后的白灵菇菌丝体，参见附图1所示；2白灵菇母种制备，从步骤1制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于22℃～26℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种，参见附图2所示；3白灵菇原种制备，从步骤2制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度50％-65％，温度22℃～26℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种，参见附图3所示；4白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤3制备的白灵菇原种中挑取麦粒种20-30粒接种至栽培种培养基中，于温度为22℃～26℃，湿度为50％～65％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种，参见附图4所示；5阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；6阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，注意不要破坏阿魏根基部的腐根；7白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤4制备的白灵菇栽培种80-120g，分成2-4块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触，参见附图5所示；8阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。实施例二：1白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于22℃培养箱暗培养7d，获得活化后的白灵菇菌丝体；2白灵菇母种制备，从步骤1制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于22℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；3白灵菇原种制备，从步骤2制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度50％-55％，温度22℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；4白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤3制备的白灵菇原种中挑取麦粒种20粒接种至栽培种培养基中，于温度为22℃，湿度为50％～55％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；5阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；6阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，注意不要破坏阿魏根基部的腐根；7白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤4制备的白灵菇栽培种80g，分成2块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；8阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。实施例三：1白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于24℃培养箱暗培养8d，获得活化后的白灵菇菌丝体；2白灵菇母种制备，从步骤1制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于24℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；3白灵菇原种制备，从步骤2制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度55％-60％，温度24℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；4白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤3制备的白灵菇原种中挑取麦粒种25粒接种至栽培种培养基中，于温度为24℃，湿度为55％～60％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；5阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；6阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，注意不要破坏阿魏根基部的腐根；7白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤4制备的白灵菇栽培种100g，分成3块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；8阿魏植物根部后处理，最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。实施例四：1白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于26℃培养箱暗培养10d，获得活化后的白灵菇菌丝体；2白灵菇母种制备，从步骤1制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于26℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；3白灵菇原种制备，从步骤2制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度60％-65％，温度26℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；4白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤3制备的白灵菇原种中挑取麦粒种30粒接种至栽培种培养基中，于温度为26℃，湿度为60％～65％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；5阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；6阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，注意不要破坏阿魏根基部的腐根；7白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤4制备的白灵菇栽培种120g，分成4块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；8阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。实施例五：探究影响白灵菇定植率Y的四个因素：白灵菇培养温度A、白灵菇培养湿度B、白灵菇原种挑取麦粒个数C和白灵菇栽培种接种阿魏植物的量D，每组定植30颗阿魏植物，进行四因素三水平正交实验，正交试验因素与水平表见表1。表1：正交试验因素与水平表正交优化白灵菇定植率试验结果及分析见表2。表2：正交试验结果及分析从表2可以看出，在试验设计的范围内，白灵菇原种挑取麦粒个数对白灵菇定植率的影响最大。结合表1和表2得到最佳优化条件为A2B2C2D2，即白灵菇培养温度24℃、白灵菇培养湿度55-60％、白灵菇原种挑取麦粒个数25个、白灵菇栽培种接种阿魏植物的量100g，白灵菇定植率最高为88.2％。通过以上实验优化获得白灵菇野外保育出菇的方法：从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于24℃培养箱暗培养8d，获得活化后的白灵菇菌丝体，挑取化后的白灵菇黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于24℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种，从白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度55-60％，温度24℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种，用接种铲从白灵菇原种中挑取麦粒种25粒接种至栽培种培养基中，于温度为24℃，湿度为55-60％的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，选择未抽苔，2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，注意不要破坏阿魏根基部的腐根；取白灵菇栽培种100g，分成3块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。实施例六：本方案设计2组实验，A组按实施例一的方案进行白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物试验，B组按2016年12月26日披露申报的专利CN106613351A中的野外接种方法对白灵菇接种阿魏植物试验，选择在春季4月份至5月份和秋季9月份至10月份进行接种。每年春、秋季对前1年进行白灵菇固体菌种野外接种的阿魏植物进行调查，主要调查白灵菇菌丝体的定植和出菇情况，首先利用目测法观察试验阿魏植物根茎部是否有白灵菇子实体发生，如果没有子实体发生，然后进行白灵菇菌丝体在阿魏植物根基部组织的定植情况调查，定植情况调查方法为：用工具将阿魏根基部一侧的土壤刨开，清理干净露出阿魏根，注意不要伤及阿魏根基部组织，观察和记录阿魏根基部白灵菇菌丝的定植和生长情况。表3：白灵菇野外接种阿魏植物试验参见表3所示，菌丝体定植情况调查结果显示：A组在2017年白灵菇菌丝体成功定植率达83.33％，2018年成功定植率高达93.25％，平均定植率达88.29％，子实体发生情况调查结果显示：2017年阿白灵菇子实体发生49个，发生率达27.3％，2018年白灵菇子实体发生59个，发生率达29.5％，平均白灵菇子实体发生率达28.4％，白灵菇菌丝定植和出菇情况参见附图6所示。而B组2017年白灵菇菌丝体成功定植率达54.32％，2018年成功定植率高达60.95％，平均定植率达57.64％。本申请提供的方案在白灵菇野生接种阿魏植物的定植率明显高于B组的公知技术。试验结果表明利用白灵菇固体菌种野外接种阿魏植物方法可以有效提高白灵菇菌丝在野生阿魏植物根部的定植率，并能有效提高白灵菇子实体的发生率，实现白灵菇的野外出菇。如上所述，即可较好地实现本发明，上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种改变和改进，均应落入本发明确定的保护范围内。

权利要求：1.一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）白灵菇菌种活化，从4℃保藏箱中取出白灵菇菌种，无菌环境下，挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA培养基平板中央，于22℃～26℃培养箱暗培养7～10d，获得活化后的白灵菇菌丝体；（2）白灵菇母种制备，从步骤（1）制备的活化后的白灵菇菌丝体中挑取黄豆粒大小的菌饼接种至PDA斜面培养基中央，于22℃～26℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种；（3）白灵菇原种制备，从步骤（2）制备的白灵菇母种中挑取10块玉米粒大小的菌块接种至麦粒培养基中，于湿度50%-65%，温度22℃～26℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种；（4）白灵菇栽培种制备，用接种铲从步骤（3）制备的白灵菇原种中挑取麦粒种20-30粒接种至栽培种培养基中，于温度为22℃～26℃，湿度为50%～65%的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种，即用于野外接种阿魏植物的固体菌种；（5）阿魏植物选择，观察阿魏植物及其根茎部，选择未抽苔，第2-3年生，根部没有白灵菇菌丝定植的阿魏植物；（6）阿魏植物根部处理，将阿魏根基部土壤用工具小心刨开，深度17-20cm，半径8-12cm，露出阿魏根基部，不要破坏阿魏根基部的腐根；（7）白灵菇栽培种接种阿魏植物，取步骤（4）制备的白灵菇栽培种80-120g，分成2-4块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触；（8）阿魏植物根部后处理，将最初刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，将白灵菇栽培种全部覆盖于土壤下，将覆土轻轻压实，然后浇水80-120ml。2.根据权利要求1所述的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，白灵菇菌种活化在24℃培养箱暗培养8d，获得活化后的白灵菇菌丝体。3.根据权利要求1所述的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，白灵菇母种制备，于24℃生化培养箱暗培养，待菌丝长满斜面，获得白灵菇母种。4.根据权利要求1所述的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，白灵菇原种制备，于湿度55%-60%，温度24℃的人工气候箱暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇原种。5.根据权利要求1所述的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，白灵菇栽培种制备，从白灵菇原种中挑取麦粒种25粒接种至栽培种培养基中，于温度为24℃，湿度为55%～60%的培养室暗培养，待菌丝长满菌袋后，获得白灵菇栽培种。6.根据权利要求1所述的一种白灵菇野外就地保育出菇的方法，其特征在于，白灵菇栽培种接种阿魏植物，取白灵菇栽培种100g，分成3块，围绕阿魏根基部均匀摆放，白灵菇栽培种紧靠根基部组织，使菌种与根基部紧密接触。

百度查询： 新疆农业科学院植物保护研究所 一种白灵菇野外就地保育出菇的方法

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