申请/专利权人:浙江工业大学
申请日:2020-01-19
公开(公告)日:2020-05-12
公开(公告)号:CN111141856A
主分类号:G01N30/06(20060101)
分类号:G01N30/06(20060101);G01N30/02(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.07.19#授权;2020.06.05#实质审查的生效;2020.05.12#公开
摘要:本发明涉及一种同时检测发酵液中L‑高丝氨酸和游离氨基酸的HPLC方法。所述方法是先对发酵液样品进行预处理,接着采用DEEMM衍生化试剂对发酵液样品进行衍生化处理之后,再通过高效液相色谱和通用型C18色谱柱对发酵液中的L‑高丝氨酸和其他游离氨基酸进行分离和测定。本发明的方法使用的配置是高效液相色谱系统的标准液相配置,除了适用于氨基酸分析之外,还可用于其他物质的分析工作,普适性更强,具有检测灵敏度高、样品处理简单、分析时间短、分析结果稳定、重复性好等优点,适用于常规实验室。
主权项:1.一种同时检测发酵液中L-高丝氨酸和游离氨基酸的HPLC方法,其特征在于先对发酵液样品进行预处理,接着采用DEEMM衍生化试剂对发酵液样品进行衍生化处理之后,再通过高效液相色谱和通用型C18色谱柱对发酵液中的L-高丝氨酸和其他游离氨基酸进行分离和测定;所述预处理方法为:取发酵液样品于离心管中,10000~12000rmin离心2~3min,收集上清液,用于下一步衍生化;所述衍生化处理方法为:将上清液稀释5~10倍取稀释液,加入硼酸盐缓冲液和0.5%的DEEMM甲醇溶液,温度60~70℃下衍生化1~2h后,用0.22μm有机滤膜过滤,所得滤液进行下一步分离和测定;每200μL稀释液加入350μL的硼酸盐缓冲液和150μL的0.5%DEEMM甲醇溶液。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江工业大学 同时检测发酵液中L-高丝氨酸和游离氨基酸的HPLC方法
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