申请/专利权人：江苏圣极基因科技有限公司

申请日：2020-02-06

公开（公告）日：2020-05-15

公开（公告）号：CN111154841A

主分类号：C12Q1/6851(20180101)

分类号：C12Q1/6851(20180101);C12Q1/6888(20180101)

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2020.06.09#实质审查的生效;2020.05.15#公开

摘要：本申请提供了基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法，包括从孕妇外周血浆中获得总DNA，选择包含母胎甲基化差异基因位点序列和内参基因序列设计引物和探针；进行甲基化敏感限制性内切酶消化处理；在数字PCR装置中对包含母胎甲基化差异的基因位点序列和内参基因序列进行PCR扩增，检测荧光信号，得到母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数，并排除酶切不完全导致的母源性游离DNA假阳性干扰。本申请通过甲基化敏感性限制性内切酶‑PCR法和数字PCR平台结合，利用母胎甲基化差异基因作为标志物检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数，有利于准确、快速地对妊娠妇女进行早期无创产前筛查或产前诊断。

主权项：1.一种基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法，其特征在于，至少包括如下步骤：1从孕妇外周血浆中获得总DNA，作为待测基因组DNA；2选择包含母胎甲基化差异的基因位点序列，设计扩增引物和探针引物；3选择包含非母胎甲基化差异的内参基因位点序列，设计扩增引物和探针引物，所述内参基因包含步骤2中的母胎甲基化差异基因的相同酶切位点；4对步骤1所述的待测基因组DNA进行甲基化敏感限制性内切酶消化处理；5在数字PCR装置中，以酶切后的基因组DNA为模板，采用步骤2中所述的扩增引物和探针引物，对含母胎甲基化差异的基因位点序列进行PCR扩增，检测荧光信号，得到母胎甲基化差异基因的拷贝数，即为母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数；6在数字PCR装置中，以酶切后的基因组DNA为模板，采用步骤3中所述的扩增引物和探针引物，对所述包含非母胎甲基化差异的内参基因位点序列进行PCR扩增，检测荧光信号，排除酶切不完全导致的母源性游离DNA的假阳性干扰。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏圣极基因科技有限公司 基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法及试剂盒

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