申请/专利权人:华中科技大学
申请日:2020-02-17
公开(公告)日:2020-05-19
公开(公告)号:CN111172252A
主分类号:C12Q1/6858(20180101)
分类号:C12Q1/6858(20180101);C12Q1/682(20180101);C12Q1/6827(20180101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.03.08#授权;2020.06.12#实质审查的生效;2020.05.19#公开
摘要:本发明属于DNA序列检测技术领域,公开了一种对核酸酶活性进行特异性调控的方法,对不同突变位点的基因序列,设计相应的Guiding链;合成制备所需的Guiding链;将Guiding链与探针检测体系混合,使Guiding链与底物链的比例为2:1;向上述混合体系加入EndoIV,使底物链转化为长度更长的DNA双链,并进行实时荧光测定。本发明涉及的调控内切酶IVAPE‑1lambda外切酶活性,降低了由于核酸酶副活性而产生的背景信号,同时最大程度的保留核酸酶切割目标序列的主活性,从而提高检测效能。
主权项:1.一种对核酸酶活性进行特异性调控的方法,其特征在于,所述对核酸酶活性进行特异性调控的方法包括:步骤一,对不同突变位点的基因序列,设计相应的Guiding链;步骤二,合成制备所需的Guiding链;步骤三,将Guiding链与探针检测体系混合,使Guiding链与底物链的比例为2:1;步骤四,向上述混合体系加入EndoIV,使底物链转化为长度更长的DNA双链,并进行实时荧光测定。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 华中科技大学 一种对核酸酶活性进行特异性调控的方法
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