申请/专利权人：云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

申请日：2020-04-24

公开（公告）日：2020-07-17

公开（公告）号：CN111424118A

主分类号：C12Q1/70(20060101)

分类号：C12Q1/70(20060101);C12Q1/686(20180101);C12R1/94(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-著录事项变更

法律状态：2022.11.22#著录事项变更;2022.10.25#授权;2020.08.11#实质审查的生效;2020.07.17#公开

摘要：本发明公开了一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法，包括以下步骤：提取样本总RNA；设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物；在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链；利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物；将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。本发明应用黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒特异引物可以同时在单PCR管中检测4种西番莲主要病毒，特异性、简便性、灵敏度和准确性较单一病毒或两种病毒检测有较大的优势。

主权项：1.一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法，其特征在于所述的西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法包括以下步骤：A、提取样本总RNA；B、设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物；C、在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链；D、利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物；E、将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法

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