申请/专利权人：济南大学

申请日：2020-04-09

公开（公告）日：2020-07-24

公开（公告）号：CN111440851A

主分类号：C12Q1/6844(20180101)

分类号：C12Q1/6844(20180101);C12Q1/44(20060101);G01N27/327(20060101);G01N27/48(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.02.28#授权;2020.08.18#实质审查的生效;2020.07.24#公开

摘要：本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及miRNA特异识别的S及其构象改变和滚环等温循环放大检测miRNA的生物传感器，为了解决以上现有技术中检测miRNA的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种检测miRNA的生物传感器，在电极上依次修饰有S1层、RCA产物层。制备方法：对电极进行预处理；将S1层修饰到电极表面；将RCA产物层修饰到电极表面。利用了miRNA的特异性识别实现了对目标物的高特异性检测；利用DNAzyme和滚环等温放大技术，实现了目标物信号的三步放大。

主权项：1.一种检测miRNA的电化学生物传感器，其特征在于，在电极上依次修饰S1、RCA产物层；所述的RCA产物层中包括S、环形模板、AgMBs、miRNA-21；所述的环形模板为：5’磷酸化挂锁式探针PadlockDNA与连接探针Ligationprobe通过分子内连接反应得到；所用碱基序列如下：miRNA-21碱基序列如SEQNo.1所示；具体为：5’-TAGCTTATCAGACTGATGTTGA-3’；S碱基序列如SEQNo.2所示；具体为：5’-AACATCAGGCCGrAAGGCCTGTCCTCGTCCGGCTCGTTGATAAGCTA-inverteddT-3’；PadlockDNA碱基序列如SEQNo.3所示；具体为：5’-P-AACAATTTGAACTTGTTAAACGCTTCGTCCGGCTCGGACTATTTGAATTCGGCCTGTT-3’；Ligationprobe碱基序列如SEQNo.4所示；具体为：5’-TCAAATTGTTAACAGGCCGA-3’；AgMBs碱基序列如SEQNo.5所示；具体为：5’-GTTCAAATTGTTAAACrACTAATTGAATTTGGCCCTAACTCCCC-inverteddT-3’；S1碱基序列如SEQNo.6所示；具体为：5’-AAAAACCAAATTCAAAAAAACCAAATTCAAAAAAACCAAATTCAAAAAAA-SHCH36-3’；所述的S链5’第12个碱基后面连接有rA，为核糖核酸RNA腺嘌呤；所述的AgMBs链5’第16个碱基后面连接有rA，为核糖核酸RNA腺嘌呤；所述的S链、AgMBs链的3’端连有inverteddT；所述的S1链的3’端连有SHCH36。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 济南大学 一种检测miRNA的电化学生物传感器及其制备方法与应用

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