申请/专利权人:深圳市海普洛斯生物科技有限公司
申请日:2020-06-01
公开(公告)日:2020-07-24
公开(公告)号:CN111440876A
主分类号:C12Q1/6886(20180101)
分类号:C12Q1/6886(20180101);C12Q1/6851(20180101)
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2020.08.18#实质审查的生效;2020.07.24#公开
摘要:本申请公开了一种用于定量检测人类MGMT基因甲基化程度的试剂盒和方法。本申请试剂盒包括MGMT基因检测试剂、内控β‑Actin基因检测试剂和标准品;MGMT基因检测试剂包括MGMT引物对和MGMT探针,分别为SEQIDNO.1至3所示序列;内控β‑Actin基因检测试剂包括β‑Actin引物对和β‑Actin探针,分别为SEQIDNO.4至6所示序列;两条探针采用不同荧光基团修饰;标准品由100%甲基化MGMT基因和0%甲基化MGMT基因按不同配比混合而成。本申请试剂盒,采用双重实时荧光定量PCR,利用标准品绘制标准曲线,实现MGMT基因甲基化程度相对定量,使用简单、方便,且成本低。
主权项:1.一种用于定量检测人类MGMT基因甲基化程度的试剂盒,其特征在于:包括MGMT基因检测试剂、内控β-Actin基因检测试剂和标准品;所述MGMT基因检测试剂包括MGMT引物对和MGMT探针,所述MGMT引物对的上下游引物分别为SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示序列,所述MGMT探针为SEQIDNO.3所示序列;所述内控β-Actin基因检测试剂包括β-Actin引物对和β-Actin探针,所述β-Actin引物对的上下游引物分别为SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示序列,所述β-Actin探针为SEQIDNO.6所示序列;SEQIDNO.1:5’-CGCGTTTCGGATATGTTGGG-3’SEQIDNO.2:5’-ATCAAAACGACCCCACACCC-3’SEQIDNO.3:5’-CGCGGTGCGTATCGTTTGCG-3’SEQIDNO.4:5’-AGTGAGTGGTGTGGGGTTAA-3’SEQIDNO.5:5’-CCAACCTTACACATACCAAAACCA-3’SEQIDNO.6:5’-TGGTTTGAGTGGTTGTGGTGGTGT-3’所述MGMT探针和β-Actin探针的5’端分别采用不同的荧光基团修饰;所述标准品由100%甲基化的MGMT基因和0%甲基化的MGMT基因按不同配比形成的一系列甲基化MGMT基因含量已知的混合核酸样品。
全文数据:
权利要求:
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