申请/专利权人：湘潭大学

申请日：2018-07-31

公开（公告）日：2020-07-24

公开（公告）号：CN109055258B

主分类号：C12N1/20(20060101)

分类号：C12N1/20(20060101);B09C1/10(20060101);C12R1/01(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2020.07.24#授权;2019.01.15#实质审查的生效;2018.12.21#公开

摘要：本发明公开了一种贪铜菌及贪铜菌制剂和贪铜菌制剂在重金属污染土壤修复中的应用。贪铜菌Cupriavidussp.能耐受重金属离子、吸附重金属离子、增加土壤水相微环境的pH和产生具有氮磷缓控释肥作用的鸟粪石，将其用于重金属污染土壤修复，特别是镉污染土壤修复，不但可以通过吸附和沉积固定土壤中镉离子，减少土壤镉的生物有效性，而且可以提高土壤肥力，解决土壤酸化等技术问题。

主权项：1.一种贪铜菌制剂的应用，其特征在于：作为镉污染土壤修复制剂应用；所述贪铜菌制剂包含保藏编号CCTCCNO:M2018127的贪铜菌。

全文数据：一种贪铜菌及贪铜菌制剂和贪铜菌制剂在重金属污染土壤修复中的应用技术领域本发明涉及一种贪铜菌，还涉及包含贪铜菌的制剂及其在镉污染土壤中的应用，贪铜菌具有高效耐重金属、自诱导pH增加而提高重金属离子的吸附、积累和沉淀，以及伴随产生具有氮磷缓控释肥作用的磷酸铵镁俗称鸟粪石，特别适合镉污染土壤的修复。属于重金属污染环境微生物治理技术领域。背景技术现有的农田重金属污染以镉Cd污染为主，特别是农田的酸化进一步提高了重金属污染耕地土壤中重金属的活度、迁移和扩散能力，导致重金属生物有效性的增强。这加剧了土壤的重金属污染，危害了安全农产品的生产和民众健康。我国人多地少，为了保证粮食充足且质量安全和如期实现《土壤污染防治行动计划》要求的在2020年前污染耕地的安全利用率达到90％以上和2030年前污染耕地的安全利用率达到95％以上的目标，亟需探索更加经济、高效、安全和绿色的耕地土壤重金属污染修复技术。当前，我国常用的农田污染修复技术主要集中在物理技术、化学技术、生物技术和农艺修复措施等4方面。物理和化学修复技术因成本高、易造成二次污染和改变土壤生态等原因，难见于重金属污染农田的修复。农艺修复虽然简单可行，但对田间管理和农民的种田技术要求较高，大规模的重金属污染农田修复也比较少见。生物修复，特别是微生物修复技术因具有原位修复、廉价和环境友好等优点，逐渐受到重视。如中国专利CN107815428A公开了一株镉Cd去除根瘤菌RhizobiumpusenseKG2、含有所述根瘤菌的菌剂及其在固定或去除土壤或水体中Cd2+的应用。其具体公开瘤菌KG2具有高效Cd固定能力和较强的固氮功能，其能够促进豆科作物长、增加豆科作物抗逆性、减少植株对土壤Cd的富集吸收量。发明内容针对现有生物技术修复重金属污染土壤存在的上述不足，本发明的第一个目的在于提供一种能耐受重金属离子、吸附重金属离子、增加土壤水相微环境的pH和产生具有氮磷缓控释肥作用的鸟粪石的贪铜菌Cd02Cupriavidussp.Cd02。本发明的第二个目的是在于提供一种包含上述贪铜菌Cd02的制剂。本发明的第三个目的是在于提供一种包含贪铜菌Cd02的制剂在重金属污染土壤修复中的应用，贪铜菌Cd02能耐受重金属离子，同时可以吸附重金属离子，并且释放碱性物质增加土壤水相微环境的pH来沉积和固定重金属离子，以及产生具有氮磷缓控释肥作用的鸟粪石；因此，贪铜菌Cd02不但可以吸附和固定农田土壤中的重金属离子，还可缓解土壤的酸化，提高土壤肥力。为了实现上述目的，本发明提供了一种贪铜菌Cd02Cupriavidussp.Cd02，其保藏编号为CCTCCNO:M2018127。本发明的贪铜菌于2018年3月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2018127，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一珞珈山。本发明还提供了一种贪铜菌制剂，其包含保藏编号CCTCCNO:M2018127的贪铜菌。优选的方案，贪铜菌制剂还包含营养液。优选的营养液包含以下组分：K2HPO4、NH4Cl、Na2SO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O和乳酸钠。进一步优选，每升营养液中包含0.4～0.55gK2HPO4、0.5～1.2gNH4Cl、0.6～1.3gNa2SO4、0.05～0.1gCaCl2·2H2O、1.5～2.5gMgSO4·7H2O及1.5～2.5g乳酸钠。培养液为贪铜菌提供生长所需营养成分，贪铜菌可以诱导磷酸铵镁的生成，磷酸铵镁是一种氮磷缓释肥料。优选的方案，贪铜菌制剂中贪铜菌的浓度为0.93～1.86gL。本发明还提供了贪铜菌制剂的应用，其作为重金属污染土壤修复制剂应用。优选的方案，所述贪铜菌制剂添加至重金属污染土壤中吸附重金属离子及生成碱性物质提高土壤环境pH沉积重金属离子，同时生成具有氮磷缓控释肥作用的磷酸铵镁。贪铜菌其本身可以吸附重金属离子，同时又可以提高土壤pH来固定沉积重金属离子，两者协同作用明显，大大提高对土壤中游离重金属离子的去除效率。优选的重金属离子为镉离子。相对现有技术，本发明的技术方案带来的有益效果：本发明的贪铜菌Cd02能高效耐受重金属离子，特别是对重金属镉离子耐受性好，如镉离子浓度85mgL是贪铜菌可以耐受的镉离子浓度。本发明的贪铜菌Cd02在土壤溶液培养体系中培养过程中，在一个星期内，可以将体系的pH从7.5升高到8.6。通过提高环境体系pH可以促进重金属离子在土壤水相中沉淀，有效降低了镉离子的生物有效性。土壤水相溶液体系的pH是影响重金属镉有效性所有参数中的最重要因子，土壤pH值越低，镉等重金属离子可迁移性越高、毒性也就越大，因此，提高土壤水相溶液体系的pH，可以降低土壤有效态镉含量，促进土壤镉的可利用态持续向难利用态或残渣态转化，这就阻断了镉向作物迁移的可能，从而降低了作物中的镉的含量，保证了农产品的安全生产。本发明的贪铜菌Cd02在土壤溶液培养体系中可以诱导生成具有氮磷缓控释肥作用的磷酸铵镁俗称鸟粪石生成。本发明的贪铜菌Cd02制剂特别适合用于重金属污染农田土壤的修复，在适当的培养液体系中，贪铜菌Cd02可以吸附土壤溶液体系中的重金属离子，实现重金属离子在菌体上的吸附和积累，同时可以增加土壤水相微环境pH值，环境pH值提高可以加速重金属离子的沉淀，从而土壤中游离重金属离子大幅度降低，有效防止重金属离子在农作物中的富集，而且环境pH值提高可以改善土壤酸性环境，解决土壤酸化的问题；特别是贪铜菌可以诱导土壤溶液体系中氮磷缓控释肥作用的磷酸铵镁俗称鸟粪石的产生，可以提高土壤肥力，提高农作物产量。附图说明【图1】为本发明的贪铜菌Cd02菌株在无镉的LB固体培养基30℃培养48h的菌体的革兰氏染色图。【图2】为本发明的贪铜菌Cd02菌株在含镉离子浓度为85mgL的营养液中30℃培养48h的图像图2A和革兰氏染色图图2B以及在含镉离子浓度为200mgL的营养液中30℃培养48h的图像图2C和革兰氏染色图图2D。【图3】为本发明的贪铜菌Cd02菌株30℃培养在含不同镉离子浓度0mgL、2mgL、4mgL和6mgL营养液中的600nm光密度变化图OD600。【图4】为本发明的贪铜菌Cd02菌株16SrDNA基因系统发育树图。【图5】为本发明的贪铜菌Cd02菌株30℃培养在含不同镉离子浓度0mgL、2mgL、4mgL和6mgL营养液中的pH变化图A和在培养第六天的产碱能力图B。【图6】为本发明的贪铜菌Cd02菌株对镉离子的吸附和积累实验结果图，A2mgL镉离子B4mgL镉离子C6mgL镉离子D8mgL镉离子。【图7】为本发明的贪铜菌Cd02菌株在培养期间生成磷酸铵镁俗称鸟粪石的XRD图。【图8】为本发明的贪铜菌菌株在培养期间生成沉淀的TEM图。【图9】为本发明的贪铜菌Cd02菌株在培养期间生成沉淀的XPS图谱A和沉淀酸溶出曲线图B。具体实施方式下面利用实施例及附图对本发明做进一步的详细描述，但本发明的权利要求保护范围不限于此。实施例1耐镉菌株贪铜菌Cd02的分离、筛选与耐镉能力验证该菌株是从镉污染土壤样品中分离、筛选和纯化后获得的。具体方法如下：取上述土壤样品1g，加入100mL无菌水，置转速150rpm的恒温摇床中振荡24h后，静置30min，取1mL上清液涂布于含有100mgL的含镉固体LB培养基中，待周围有菌体长出，挑取菌体在固体LB培养基中划线，放入恒温培养箱培养24h后观察菌落形态，并将长出的单个菌落划线至新鲜的LB固体平板上培养，得到纯菌株，命名为Cd02。最后将Cd02菌株划线于斜面试管，置恒温培养箱中30℃培养24h后，于4℃的冰箱中保存。本实施例1中的LB培养基配方为：蛋白胨1g，NaCl1g，酵母粉0.5g，琼脂粉2g，超纯水100mL，pH7.0，LB培养基于121℃、1个大气压下灭菌20分钟后，备用。Cd02菌的菌落形态体征如下:Cd02菌在LB固体培养基上培养24h后，形成直径1cm左右的小菌落，湿润，不透明，表面光滑。革兰氏染色后镜检呈红色图1，属革兰氏阴性菌。为了验证该菌株Cd02的耐镉能力，挑取无镉LB固体平板上的单个菌落至含镉浓度分别为20mgL、50mgL、100mgL、200mgL的LB液体培养基中，置转速150rpm，温度为30℃的恒温摇床中振荡48h后，Cd02菌都能生长，如图2A是含镉浓度为200mgL时的Cd02菌液，并取含200mgL镉离子浓度的LB液体培养基中的Cd02菌进行革兰氏染色并观察其形态，镜检后呈红色，菌体形态变长，但染色不明显图2B。挑取LB固体平板上的单个菌落至含镉离子浓度为85mgL的营养液每升培养溶液含有：0.5gK2HPO4、1gNH4Cl、1gNa2SO4、0.1gCaCl2·2H2O、2gMgSO4·7H2O、2g乳酸钠中，置转速150rpm，温度为30℃的恒温摇床中振荡48h后，Cd02菌能生长，如图2C是含镉浓度为85mgL的Cd02菌液，取其中菌体进行革兰氏染色并观察其形态，镜检后呈红色，与在无镉的LB固体培养的菌体的镜检结果相比，菌体形态变长图2D。接种2％菌体浓度0.93～1.86gL的生长对数期的Cd02菌悬液到营养液每升培养溶液含有：0.5gK2HPO4、1gNH4Cl、1gNa2SO4、0.1gCaCl2·2H2O、2gMgSO4·7H2O、2g乳酸钠中，营养液中镉离子浓度分别设置为0mgL、2mgL、4mgL、6mgL，置转速150rpm30℃下振荡培养，分别于24h、48h、72h、96h、120h、144h取样，用可见光分光光度计测定培养液的光密度值OD600。每组设3个重复。如图3所示，在有镉的条件下，Cd02菌的生长速度较无镉培养液中的生长缓慢。根据该实验数据，计算出Cd02菌在各不同镉浓度的营养液中48h和96h的半致死浓度分别是4.27mgL、6.32mgL。该菌株Cd02的16SrDNA基因序列特征：提取该菌株的细菌基因组DNA，以该菌株的基因组DNA为模板，以用通用引物27F和1492R扩增该菌株的16SrDNA基因。PCR扩增体系：2μL27F引物10μmolL，2μL1492R引物10μmolL，1μL该菌基因组DNA，25μLPCR扩增液，20μLddH2O，27F序列为5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，1492R序列为5’-AAGGTGATCCAGCCGCA-3’，引物由上海生物工程有限公司合成。PCR扩增后的16SrDNA产物送上海生物工程有限公司测序。测序结果显示该菌株的部分16SrDNA序列长度有1439bp，其序列特征如下：TTGCGGTTAGGCTAACTACTTCTGGCAAAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGACCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGTAGTCGAGTTGCAGACTACGATCCGGACTACGATGCGTTTTCTGGGATTAGCTCCCCCTCGCGGGTTGGCAACCCTCTGTACGCACCATTGTATGACGTGTGAAGCCCTACCCATAAGGGCCATGAGGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCTCTAGAGTGCCCTTTCGTAGCAACTAGAGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGTCCACTTTCCCTTTCGGGCACCTAATGCATCTCTGCTTCGTTAGTGGCATGTCAAGGGTAGGTAAGGTTTTTCGCGTTGCATCGAATTAATCCACATCATCCACCGCTTGTGCGGGTCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAATCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGTCAACTTCACGCGTTAGCTACGTTACTGAAGAAATGAATCCCCAACAACTAGTTGACATCGTTTAGGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGTGCATGAGCGTCAGTGACGTCCCAGGGGGCTGCCTTCGCCATCGGTATTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACTGCTACACGTGGAATTCTACCCCCCTCTGACATACTCTAGCCTTGCAGTCACAAGCGCCATTCCCAAGTTGAGCTCGGGGATTTCACGCCTGTCTTACAAAACCGCCTGCGCACGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAACGCTCGCACCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGGTGCTTATTCTTCCGGTACCGTCATCGACCCCAGGTATTAACCCGGGCCATTTCTTTCCGGACAAAAGTGCTTTACAACCCGAAGGCCTTCTTCACACACGCGGCATTGCTGGATCAGGGTTGCCCCCATTGTCCAAAATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCTGATCGTCCTCTCAGACCAGCTACTGATCGTCGCCTTGGTAGGCTTTTACCCCACCAACTAGCTAATCAGACATCGGCCGCTCCTGTAGCGCGAGGCCTTGCGGTCCCCCGCTTTCACCCTCAGGTCGTATGCGGTATTAGCTAATCTTTCGACTAGTTATCCCCCACTACAGGGCACGTTCCGATGTATTACTCACCCGTTCGCCACTCGCCACCAGGGTTG。将该菌株的16SrDNA部分序列提交到NCBIGenbank，获得登录号MG754454.1。将该菌株的16SrDNA部分序列在NCBIGenbank上的相关细菌的16SrDNA序列进行BLAST比对，并进行同源性分析，结果表明，该菌株与贪铜菌的同源性最高，相似度在99％以上，结合形态特征、培养特征以及16SrDNA序列分析，该菌株确定为贪铜菌。该菌株的16SrDNA部分序列与Genbank中的相应菌株序列利用ClusterX方法进行比对，使用MEGA7.0软件按邻接法构建系统发育树，基于1000次重复的抽样分析。构建得到的该菌的16SrDNA系统发育树如图4所示。实施例2贪铜菌Cd02培养过程中培养介质pH的变化以及其产碱能力。接种2％菌体浓度0.93～1.86gL的生长对数期的Cd02菌悬液到营养液每升培养溶液含有：0.5gK2HPO4、1gNH4Cl、1gNa2SO4、0.1gCaCl2·2H2O、2gMgSO4·7H2O、2g乳酸钠中，镉离子浓度分别设置为0mgL、2mgL、4mgL、6mgL，置转速150rpm30℃下振荡培养，分别于24h、48h、72h、96h、120h、144h取样，用pH计测定培养液的pH。每组设3个重复。实验结果如图5A所示，在无镉培养液中随时间的增加pH在上升，在培养后期达到8.6；在含镉培养液中随镉浓度的增大，培养液的pH也随培养时间的增加而增加，在培养后期pH可增加到8.6左右，说明该菌在培养期间产碱。在培养后期144h从每个浓度中取20mL进行双指示法滴定确定产碱量，用移液管分别移取20mL的0mgL、2mgL、4mgL、6mgL培养液置于250mL锥形瓶中，分别滴加酚酞3滴，用标准浓度的HCl0.1molL进行滴定，滴定至红色褪为无色，分别记录滴加HCl的体积V1、V2、V3、V4，再分别滴加甲基橙1滴后用标准浓度的HCl0.1molL滴定至黄色变成橙色，分别记录滴加HCl体积V5、V6、V7、V8最后以此确定产碱量。实验结果如图5B所示，镉离子0mgL、2mgL、4mgL、6mgL时，Cd02菌株的产碱量分别为0.143molL、0.106molL、0.145molL、0.11molL。实施例3贪铜菌Cd02对重金属镉离子的吸附和积累。接种2％0.93～1.86gL的生长对数期的Cd02菌悬液到含镉的培养液每升培养溶液含有：0.5gK2HPO4、1gNH4Cl、1gNa2SO4、0.1gCaCl2·2H2O、2gMgSO4·7H2O、2g乳酸钠中，镉离子浓度分别设置为2mgL、4mgL、6mgL、8mgL，置转速150rpm30℃下振荡培养，分别于24h、48h、72h、96h、120h、144h取样，用原子吸收分光光度计火焰光度法测溶液中镉离子含量以及菌体细胞壁和细胞内的镉离子含量。每组设3个重复。实验结果如图6所示，在培养期间，当pH值7.5升高8.6时，因H+浓度的减少，有利于镉离子接近并吸附在Cd02菌细胞表面，随培养时间的增加，细胞壁上的镉离子含量也随之增加；但当pH值大于7.8时，超过了重金属离子微沉淀上限时，镉离子就会形成沉淀，难以被Cd02菌吸附而去除，故细胞壁上的镉离子含量不再增加。实施例4贪铜菌Cd02在培养体系促进碳酸镉形成并产生鸟粪石磷酸铵镁。接种2％0.93～1.86gL的生长对数期菌体到含镉离子8mgL的培养液每升培养溶液含有：0.5gK2HPO4、1gNH4Cl、1gNa2SO4、0.1gCaCl2·2H2O、2gMgSO4·7H2O、2g乳酸钠中，96h后将培养物离心后，获得该镉浓度影响下的菌体。将菌体加入蛋白酶K和0.3％十二烷基磺酸钠在40℃水浴中过夜消解，将消解后的产物冷冻干燥。最后，将冷冻干燥后的含镉菌体的消解物经X射线衍射XRD、X射线光电子能谱分析XPS以及经透射电子显微镜TEM检测。图7和图8分别是X射线衍射XRD图谱和透射电子显微镜TEM图像，根据图7和图8可知，Cd02菌转化生成了一种名为鸟粪石的缓释肥磷酸氨镁，属于无定型沉淀。在水中、土壤水相中磷酸铵镁微溶于水，氮磷养分释放速率比其它可溶肥慢，故可作缓释肥。图9A为X射线光电子能谱分析XPS图谱，由图9A的分峰图可知，沉淀中含有CdCO3。考虑Cd02菌由于提高土壤水相pH而生成的CdCO3沉淀能否在酸性土壤中保持稳定，因此，设置模拟土壤水相的pH为3、5和6依据我国南方土壤的pH范围在4.5～6.5，分析上述沉淀在酸性环境中镉离子的溶出情况。由实验图9B可知当pH大于3时，菌体消解产物的镉离子酸浸出不超过1mgL，当pH为5时，镉离子酸浸出不超过0.73mgL；当pH为6时，镉离子酸浸出不超过0.47mgL。因此，Cd02菌形成的含镉沉淀可较为稳定地存在于土壤水相微环境中。序列表110湘潭大学120一种贪铜菌及贪铜菌制剂和贪铜菌制剂在重金属污染土壤修复中的应用1603170SIPOSequenceListing1.0210121120212DNA213未知Unknown4001agagtttgatcctggctcag20210221117212DNA213未知Unknown4002aaggtgatccagccgca1721032111363212DNA213贪铜菌Cupriavidussp.4003ttgcggttaggctaactacttctggcaaaacccactcccatggtgtgacgggcggtgtgt60acaagacccgggaacgtattcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccagc120ttcacgtagtcgagttgcagactacgatccggactacgatgcgttttctgggattagctc180cccctcgcgggttggcaaccctctgtacgcaccattgtatgacgtgtgaagccctaccca240taagggccatgaggacttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtctc300tctagagtgccctttcgtagcaactagagacaagggttgcgctcgttgcgggacttaacc360caacatctcacgacacgagctgacgacagccatgcagcacctgtgtccactttccctttc420gggcacctaatgcatctctgcttcgttagtggcatgtcaagggtaggtaaggtttttcgc480gttgcatcgaattaatccacatcatccaccgcttgtgcgggtccccgtcaattcctttga540gttttaatcttgcgaccgtactccccaggcggtcaacttcacgcgttagctacgttactg600aagaaatgaatccccaacaactagttgacatcgtttagggcgtggactaccagggtatct660aatcctgtttgctccccacgctttcgtgcatgagcgtcagtgacgtcccagggggctgcc720ttcgccatcggtattcctccacatctctacgcatttcactgctacacgtggaattctacc780cccctctgacatactctagccttgcagtcacaagcgccattcccaagttgagctcgggga840tttcacgcctgtcttacaaaaccgcctgcgcacgctttacgcccagtaattccgattaac900gctcgcaccctacgtattaccgcggctgctggcacgtagttagccggtgcttattcttcc960ggtaccgtcatcgaccccaggtattaacccgggccatttctttccggacaaaagtgcttt1020acaacccgaaggccttcttcacacacgcggcattgctggatcagggttgcccccattgtc1080caaaattccccactgctgcctcccgtaggagtctgggccgtgtctcagtcccagtgtggc1140tgatcgtcctctcagaccagctactgatcgtcgccttggtaggcttttaccccaccaact1200agctaatcagacatcggccgctcctgtagcgcgaggccttgcggtcccccgctttcaccc1260tcaggtcgtatgcggtattagctaatctttcgactagttatcccccactacagggcacgt1320tccgatgtattactcacccgttcgccactcgccaccagggttg1363

权利要求：1.一种贪铜菌Cupriavidussp.，其特征在于:保藏编号CCTCCNO:M2018127。2.一种贪铜菌制剂，其特征在于：包含保藏编号CCTCCNO:M2018127的贪铜菌。3.根据权利要求2所述的一种贪铜菌制剂，其特征在于：还包含营养液。4.根据权利要求3所述的一种贪铜菌制剂，其特征在于：所述营养液包含以下组分：K2HPO4、NH4Cl、Na2SO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O和乳酸钠。5.根据权利要求4所述的一种贪铜菌制剂，其特征在于：每升营养液中包含0.4～0.55gK2HPO4、0.5～1.2gNH4Cl、0.6～1.3gNa2SO4、0.05～0.1gCaCl2·2H2O、1.5～2.5gMgSO4·7H2O及1.5～2.5g乳酸钠。6.根据权利要求2～5所述的一种贪铜菌制剂，其特征在于：所述贪铜菌制剂中贪铜菌的浓度0.93～1.86gL。7.权利要求2～6任一项所述的贪铜菌制剂的应用，其特征在于：作为重金属污染土壤修复制剂应用。8.根据权利要求7所述的贪铜菌制剂的应用，其特征在于：所述贪铜菌制剂添加至重金属污染土壤中吸附重金属离子及生成碱性物质提高土壤环境pH沉积重金属离子，同时生成具有氮磷缓控释肥作用的磷酸铵镁。9.根据权利要求7所述的贪铜菌制剂的应用，其特征在于：所述重金属离子为镉离子。

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