申请/专利权人：杭州原生生物科技有限公司

申请日：2020-03-11

公开（公告）日：2020-07-28

公开（公告）号：CN111454891A

主分类号：C12N5/0775(20100101)

分类号：C12N5/0775(20100101);A61K35/28(20150101);A61P11/00(20060101)

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的驳回

法律状态：2022.08.19#发明专利申请公布后的驳回;2020.08.21#实质审查的生效;2020.07.28#公开

摘要：本发明公开了一种人胚胎干细胞源性的间充质干细胞的制备及其应用，属于生物技术领域。解决了现有分化得到的hESC‑MSCs纯度不高等问题。一种人胚胎干细胞源性的间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：将胚胎干细胞用EDTA在培养箱中消化，再加入PBS中止消化，得到胚胎干细胞悬浮液，并将胚胎干细胞悬浮液中的胚胎干细胞分散成单个细胞，将分散后悬浮液离心；弃去步骤S01中离心后的液体的上清液，加入PBS重悬细胞，取PBS重悬细胞液离心；弃去步骤S02中离心后的液体的上清液，加入拟胚体培养液，再次重悬细胞，将重悬细胞液加入经过预处理的拟胚体培养孔板中，经离心后放入培养箱中培养，培养得到拟胚体；拟胚体在MSC分化培养基中贴壁培养10天后就可获得hESC‑MSC。本发明具有分化所需时间短，可快速获得hESC‑MSCs等优点。

主权项：1.一种人胚胎干细胞源性的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S01：将胚胎干细胞用EDTA在培养箱中消化，再加入PBS中止消化，得到胚胎干细胞悬浮液，并将胚胎干细胞悬浮液中的胚胎干细胞分散成单个细胞，将分散后悬浮液离心；S02：弃去步骤S01中离心后的液体的上清液，加入PBS重悬细胞，取PBS重悬细胞液离心；S03：弃去步骤S02中离心后的液体的上清液，加入拟胚体培养液，再次重悬细胞，将重悬细胞液加入经过预处理的拟胚体培养孔板中，经离心后放入培养箱中培养，培养得到拟胚体；S04：将拟胚体接种在细胞培养皿中，使用间充质干细胞分化培养液培养，分化得到人胚胎干细胞源性的间充质干细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 杭州原生生物科技有限公司 一种人胚胎干细胞源性的间充质干细胞的制备及其应用

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