申请/专利权人：河南省农业科学院植物保护研究所

申请日：2019-10-16

公开（公告）日：2020-08-14

公开（公告）号：CN110669776B

主分类号：C12N15/66(20060101)

分类号：C12N15/66(20060101);C12N7/00(20060101);C12N15/82(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/00(20180101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2020.08.14#授权;2020.02.11#实质审查的生效;2020.01.10#公开

摘要：本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆及其构建方法。该方法以甘薯湖北曲叶病毒为材料对病毒基因组通过无缝克隆技术插入植物表达载体中，得到含有2倍甘薯湖北曲叶病毒全基因组重组载体；所述重组载体即为甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆；所述甘薯湖北曲叶病毒基因组DNA序列如SEQIDNO:8所示。本发明首次制备得到能通过农杆菌浸润法接种侵染本氏烟的甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆，对进一步研究甘薯湖北曲叶病毒致病机制、甘薯病毒基因功能、病毒与寄主互作、弱毒株系创制等研究奠定基础，研究结果具有重要意义和参考价值。

主权项：1.一种甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将甘薯湖北曲叶病毒基因组DNA片段通过无缝克隆方式连接至植物表达载体中，得到含有2倍甘薯湖北曲叶病毒基因组DNA的重组表达载体；所述重组表达载体即为甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆；所述甘薯湖北曲叶病毒基因组DNA序列如SEQIDNO:8所示；所述植物表达载体为pCB301，所述重组表达载体上含有两段甘薯湖北曲叶病毒全基因组DNA片段，分别为片段A和片段B；用于扩增片段A的无缝克隆用引物分别为In-301-V3F1X-B和In-301-V3R1X-B，如SEQIDNO:1～2所示，用于扩增片段B的无缝克隆用引物分别为In-301-V3F2B-S和In-301-V3R2B-S，如SEQIDNO:3～4所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南省农业科学院植物保护研究所 一种甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆及其构建方法

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