申请/专利权人:安徽农业大学
申请日:2020-07-17
公开(公告)日:2020-09-15
公开(公告)号:CN111662965A
主分类号:C12Q1/6851(20180101)
分类号:C12Q1/6851(20180101);C12Q1/6888(20180101);C12N15/11(20060101)
优先权:
专利状态码:失效-发明专利申请公布后的驳回
法律状态:2022.07.08#发明专利申请公布后的驳回;2020.10.13#实质审查的生效;2020.09.15#公开
摘要:本发明涉及生物信息技术领域,公开了一种荧光定量PCR无创鉴别中华鳖伪雌鳖的方法。具体步骤是,设定一对中华鳖伪雌鳖性别鉴定引物组,包括以目的基因18SrRNA和Gapdh的DNA序列设计的引物对。荧光定量PCR数据处理采用2–ΔΔCt法,以Gapdh为内参基因,计算18SrRNA在基因组中的相对拷贝数。利用18SrRNA在中华鳖W染色体上的DNA序列拷贝数比Z染色体上的高,筛选出性腺为卵巢、基因型为ZZ型的中华鳖伪雌鳖。本发明的鉴别方法使荧光定量PCR技术用于中华鳖性别鉴定,只需微量血液即可检测,无创采集中华鳖尾部血液对中华鳖健康无影响,具有高效、灵敏度高、稳定性好、特异性强的特点,解决了中华鳖伪雌鳖鉴别上的空白,有利于全雄鳖苗种繁殖,提高养殖效益。
主权项:1.一种荧光定量PCR无创鉴别中华鳖伪雌鳖的方法,其特征在于,设定一组中华鳖伪雌鳖性别鉴定引物对,包括一对目的基因18SrRNA和内参基因Gapdh,采用荧光定量PCR反应,利用目的基因18SrRNA在W和Z染色体上DNA拷贝数的不同将伪雌鳖筛选出来,所述目的基因18SrRNA和内参基因Gapdh引物均包括F和R两条引物,所述目的基因18SrRNA和内参基因Gapdh的引物序列如下所示:
全文数据:
权利要求:
百度查询: 安徽农业大学 一种荧光定量PCR无创鉴别中华鳖伪雌鳖的方法
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