申请/专利权人:山东省医学科学院基础医学研究所
申请日:2020-07-03
公开(公告)日:2020-10-13
公开(公告)号:CN111763237A
主分类号:C07K1/107(20060101)
分类号:C07K1/107(20060101);G01N33/53(20060101);G01N33/68(20060101)
优先权:
专利状态码:失效-发明专利申请公布后的驳回
法律状态:2022.12.02#发明专利申请公布后的驳回;2020.10.30#实质审查的生效;2020.10.13#公开
摘要:本发明公开了一种蛋白单磷酸腺苷酸化修饰检测方法,将SelO蛋白及底物加入到反应体系,混匀后加入1μLBio‑17‑ATP,30‑40℃单磷酸腺苷酸化修饰反应1小时得到单磷酸腺苷酸化修饰的蛋白;将所述单磷酸腺苷酸化修饰的蛋白加入上样缓冲液后,使用12%的SDS‑PAGE凝胶电泳;利用蛋白质免疫印迹法进行检测。本发明用于定性鉴定可能发生单磷酸腺苷酸化修饰的蛋白,结合质谱可确定具体修饰位点,可用于靶向单磷酸腺苷酸化酶的抑制剂的筛选。
主权项:1.一种蛋白单磷酸腺苷酸化修饰检测方法,其特征在于,包括以下步骤:A将SelO蛋白及底物加入到反应体系后,混匀后加入Bio-17-ATP1μL,30-40℃单磷酸腺苷酸化修饰反应1小时得到单磷酸腺苷酸化修饰的底物蛋白;B将所述单磷酸腺苷酸化修饰的蛋白加入上样缓冲液后,使用12%的SDS-PAGE凝胶电泳,电泳结束后将样品进行转膜;C将所述转膜样品进行预染后,加入辣根过氧化物酶标记的亲和素与所述转膜样品结合,显影出的即为被单磷酸腺苷酸化修饰的蛋白。
全文数据:
权利要求:
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