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【发明公布】一种改良的均相重组酶聚合酶核酸扩增检测方法及试剂盒_周科隆_201910284681.1 

申请/专利权人:周科隆

申请日:2019-04-10

公开(公告)日:2020-10-23

公开(公告)号:CN111808929A

主分类号:C12Q1/6844(20180101)

分类号:C12Q1/6844(20180101)

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2021.12.17#实质审查的生效;2020.10.23#公开

摘要:一种改良的均相重组酶聚合酶核酸扩增检测方法及试剂盒,采用重组酶、单链结合蛋白、链置换DNA聚合酶、RNaseH及重组酶聚合酶反应系统所需的正向引物、反向引物、含有尿嘧啶核糖寡核苷酸的荧光探针、缓冲体系及底物如dNTPs、能量来源物如肌酸激酶‑磷酸肌酸‑ATP,及稳定剂或促进剂。该系统采用RNaseH和RNA荧光探针作为特异性杂交报告系统,具有灵敏度高、兼容性好的特点,无需TwistAmpexo或nfo系统那样需要设计46‑52个碱基的探针而难于挑选保守区、易发生错配而漏检。本发明包括以下步骤:合成修饰引物及rU荧光探针,长度均为28‑36bp,系统中加有RNaseH,与核酸模板在37‑40℃恒温反应5‑20分钟,多通道实时荧光采集,每10‑30秒读数一次,获得标本中的病毒核酸的定性或定量结果。

主权项:1.一种改良的均相重组酶聚合酶核酸扩增检测方法及试剂盒,其特征在于:所述重组酶聚合酶核酸扩增由重组酶、单链结合蛋白、链置换DNA聚合酶、RNaseH及该系统所需的缓冲液、引物探针、底物和能量来源物及稳定剂等组成。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 周科隆 一种改良的均相重组酶聚合酶核酸扩增检测方法及试剂盒

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