申请/专利权人:上海中医药大学
申请日:2020-09-30
公开(公告)日:2020-12-25
公开(公告)号:CN112126661A
主分类号:C12N15/87(20060101)
分类号:C12N15/87(20060101);C12N15/113(20100101);C12N9/22(20060101);C12N15/12(20060101);C12N5/10(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.07.22#授权;2021.01.12#实质审查的生效;2020.12.25#公开
摘要:本发明公开了一种高效敲除NK细胞中TIGIT基因的方法,所述方法是利用CRISPRCas9基因编辑系统,以电穿孔转染方式将sgRNA与Cas9蛋白的复合物导入经扩增的NK细胞中,其中:sgRNA的序列选自SEQIDNO.1~4所示序列中的任意一种。采用本发明所述方法可实现对NK细胞中TIGIT基因的敲除效率接近80%,不仅敲除效率高,而且所获得的不表达TIGIT的NK细胞可解除CD155+肿瘤细胞对NK细胞的免疫抑制作用,相对于野生型NK细胞,在体内、体外实验中均展现出更强的抗肿瘤活性,明显提高了NK细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤活性,可望开发成安全有效的抗肿瘤生物制剂。
主权项:1.一种高效敲除NK细胞中TIGIT基因的方法,其特征在于:所述方法是利用CRISPRCas9基因编辑系统,以电穿孔转染方式将sgRNA与Cas9蛋白的复合物导入经扩增的NK细胞中,其中:sgRNA的序列选自SEQIDNO.1~4所示序列中的任意一种。
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权利要求:
百度查询: 上海中医药大学 一种高效敲除NK细胞中TIGIT基因的方法
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