申请/专利权人:上海芯超生物科技有限公司
申请日:2020-09-24
公开(公告)日:2021-01-01
公开(公告)号:CN111850154B
主分类号:C12Q1/689(20180101)
分类号:C12Q1/689(20180101);C12Q1/6858(20180101);C12Q1/04(20060101);C12N15/11(20060101);C12R1/01(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2021.01.01#授权;2020.11.17#实质审查的生效;2020.10.30#公开
摘要:本发明公开了一种多重荧光PCR熔解曲线法检测幽门螺杆菌耐药基因多态性的试剂盒,幽门螺杆菌耐药基因为以下3个基因:23SrRNA基因、16SrRNA基因、gyrA基因;试剂盒包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂;核酸提取试剂包括超顺磁性氧化硅纳米磁珠、裂解液、洗涤液、洗脱液;核酸扩增试剂包括:分别与幽门螺杆菌耐药基因23SrRNA基因、16SrRNA基因、gyrA基因、内标基因人类管家基因β‑globin对应的引物对和探针。本发明可在单管中同时检测三个耐药位点和1个内标基因,提高样本检测通量;同时改善检测体系中多对引物探针间的干扰,有效提高试剂检测的灵敏度和特异性。
主权项:1.一种多重荧光PCR熔解曲线法检测幽门螺杆菌耐药基因多态性的试剂盒,其特征在于,所述幽门螺杆菌耐药基因为以下三个耐药基因:23SrRNA基因、16SrRNA基因、gyrA基因;所述耐药基因突变位点为:克拉霉素2142AG、2142AC、2143AG,四环素926-928AGA,喹诺酮类Asn87-LysAsp91-GlyAsnTyr;所述试剂盒包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂;所述核酸提取试剂包括超顺磁性氧化硅纳米磁珠、裂解液、洗涤液、洗脱液;所述核酸扩增试剂包括:与幽门螺杆菌耐药基因23SrRNA基因对应的引物对和探针、与幽门螺杆菌耐药基因16SrRNA基因对应的引物对和探针、与幽门螺杆菌耐药基因gyrA基因对应的引物对和探针、以及与内标基因人类管家基因β-globin对应的引物对和探针;所述与幽门螺杆菌耐药基因23SrRNA基因对应的引物对和探针,其上游引物为如SEQIDNO.1所示序列,其下游引物为如SEQIDNO.2所示序列,其探针序列为如SEQIDNO.3所示序列;所述与幽门螺杆菌耐药基因16SrRNA基因对应的引物对和探针,其上游引物为如SEQIDNO.4所示序列,其下游引物为如SEQIDNO.5所示序列,其探针序列为如SEQIDNO.6所示序列;所述与幽门螺杆菌耐药基因gyrA基因对应的引物对和探针,其上游引物为如SEQIDNO.7所示序列,其下游引物为如SEQIDNO.8所示序列,其探针序列为如SEQIDNO.9所示序列。
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权利要求:
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