申请/专利权人:丹尼斯科美国公司
申请日:2014-12-08
公开(公告)日:2021-01-08
公开(公告)号:CN106068273B
主分类号:C07K14/32(20060101)
分类号:C07K14/32(20060101);C12N15/75(20060101)
优先权:["20131231 US 61/922,613"]
专利状态码:有效-授权
法律状态:2021.01.08#授权;2017.01.25#实质审查的生效;2016.11.02#公开
摘要:本发明一般涉及具有导致感兴趣的蛋白质的表达提高的基因改变的细菌细胞以及制备和使用该细胞的方法。本发明的方面包括革兰氏阳性微生物如芽孢杆菌菌种,其具有改变ykf操纵子编码的蛋白质的活性并导致感兴趣的蛋白质的表达增强的基因改变。
主权项:1.一种用于使来自芽孢杆菌属细菌细胞的感兴趣的蛋白质的表达提高的方法,所述方法包括:a获取能够产生感兴趣的蛋白质的改变的芽孢杆菌属细菌细胞,其中所述改变的细胞包含编码枯草芽孢杆菌的YkfA蛋白质的基因的基因改变,其中所述基因改变导致与SEQIDNO:2的第252位氨基酸对应的位置处的氨基酸由P变为L的取代或与SEQIDNO:2的第253位氨基酸对应的位置处的氨基酸由V变为L的取代;以及b在使得所述改变的芽孢杆菌属细菌细胞表达所述感兴趣的蛋白质的条件下培养所述改变的芽孢杆菌属细菌细胞,其中与在相同的培养条件下生长的相应未改变的芽孢杆菌属细菌细胞中所述感兴趣的蛋白质的表达相比,所述感兴趣的蛋白质在所述改变的芽孢杆菌属细菌细胞中的表达提高。
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