申请/专利权人：詹森生物科技公司

申请日：2015-02-25

公开（公告）日：2021-02-05

公开（公告）号：CN106456731B

主分类号：A61K39/00(20060101)

分类号：A61K39/00(20060101);A61K39/395(20060101)

优先权：["20140228 US 61/946008","20140529 US 62/004540"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.02.05#授权;2017.03.29#实质审查的生效;2017.02.22#公开

摘要：本公开涉及使用抗CD38抗体的组合疗法。具体地讲，本公开提供了使用抗CD38抗体治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的方法，其中所述抗CD38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞。

主权项：1.抗CD38抗体和长春新碱在制备治疗患有难治性或复发性急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的药物中的用途，其中所述抗CD38抗体包含i分别为SEQIDNO:6、7和8的重链互补决定区HCDR1HCDR1、2HCDR2和3HCDR3序列；和ii分别为SEQIDNO:9、10和11的轻链互补决定区LCDR1LCDR1、2LCDR2和3LCDR3序列；其中所述抗CD38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞；和其中所述受检者对采用BCR-ABL激酶抑制剂进行的治疗表现出抵抗性，或已获得对这种治疗的抵抗性。

全文数据：用于治疗急性成淋巴细胞性白血病的抗CD38抗体技术领域[0001]本发明涉及采用抗⑶38抗体治疗急性成淋巴细胞性白血病的方法。背景技术[0002]CD38是多功能蛋白，其功能表现为受体介导的粘附和信号传导，以及经由其胞外酶活性介导钙动员，催化环状ADP核糖cADPR和ADPR的形成。CD38介导淋巴细胞的细胞因子分泌和激活以及增殖Funaro等人，JImmunol145:2390-6，1990;Terhorst等人，Cell771-80，1981;Guse等人，Nature398:70-3，1999。CD38还经由其NAD糖水解酶活性来调节细胞外NAD+水平，这牵涉到调整调节性T细胞区室（Adriouch等人，14:1284-92,2012;Chiarugi等人，NatureReviews12:741-52,2012。除了经由Ca2+进行的信号传导之外，CD38信号传导还经由与T细胞和B细胞上的抗原-受体复合物或其它类型受体复合物（例如MHC分子）的交互应答而发生，从而CD38不仅参与若干细胞应答，而且参与IgGl的转换和分泌。[0003]CD38是造血细胞（诸如髓质胸腺细胞、活化T细胞和B细胞、静息NK细胞和单核细胞、淋巴结生发中心成淋巴细胞、血浆B细胞、滤泡内细胞和树突细胞上表达的II型跨膜糖蛋白。一部分正常骨髓细胞、特别是前体细胞以及脐带细胞是CD38阳性的。除了淋巴前体细胞之外，CD38还在红细胞和血小板上表达，并且表达还见于一些实体组织，诸如肠、脑、前列腺、骨骼和胰腺。成熟静息T细胞和B细胞表达有限的乃至不表达表面CD38。[0004]⑶38还在多种恶性血液病中表达，包括多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤，诸如B细胞慢性淋巴细胞白血病、T细胞和B细胞急性淋巴细胞白血病、华氏巨球蛋白血症、原发性系统性淀粉样变性、套细胞淋巴瘤、幼淋巴细胞髓细胞白血病、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、滤泡性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、大颗粒淋巴细胞LGL白血病、NK细胞白血病和浆细胞白血病。CD38在不同起源的上皮内皮细胞上的表达已有描述，包括前列腺中的腺上皮细胞、胰腺中的胰岛细胞、腺体包括腮腺）中的导管上皮细胞、支气管上皮细胞、睾丸和卵巢中的细胞，以及结直肠腺癌中的肿瘤上皮细胞。可涉及CD38表达的其它疾病包括例如肺部支气管上皮癌、乳腺癌（由乳腺导管和小叶中的上皮层恶性增殖演变而来）、由辟田胞演变而来的胰腺肿瘤胰岛瘤）、从肠上皮细胞演变而来的肿瘤例如，腺癌和鳞状细胞癌）、前列腺中的癌，以及睾丸中的精原细胞瘤和卵巢癌。在中枢神经系统中，成神经细胞瘤表达CD38。[0005]急性成淋巴细胞性白血病ALL以受损的早期淋巴发育为特征，被分类为B细胞或T细胞ALL。伯基特淋巴瘤（"成熟B细胞淋巴瘤"）也被分类为ALLJLL的发病数为每年新增约6000例，或大约50，000人中有1例。遗传和环境因素都可导致ALL，且已鉴定出若干染色体重排和亚显微遗传变化（Inaba等人，Lancet381:1943-55,2013。患有ALL的儿童对疗法的总体响应率为约80%，而患有ALL的成人则为约45%-60%。遗憾的是，复发性ALL预后不良。[0006]因此，仍然需要有效的ALL疗法。发明内容[0007]本发明的一个实施方案是治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的方法，该方法包括向对其有需要的患者施用抗⑶38抗体，该抗⑶38抗体与包含SEQIDN0:4的重链可变区（VH和SEQIDN0:5的轻链可变区（VL的抗体竞争结合⑶38,其中抗⑶38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞。附图说明[0008]图1示出了在疾病的ALL患者肿瘤模型（ALL7015模型）中达雷木单抗daratumumab的疗效。用平均值土SEM绘制图形;对于每个时间点，仅在研究中有80%或更多动物海个群组至少8只动物）时才绘制平均值±SEM最初每个群组有10只小鼠）轴示出了以人CD45+细胞除以活细胞的％所测得的肿瘤负荷百分比。[0009]图2示出了在疾病的ALL患者肿瘤模型ALL7043模型）中达雷木单抗的疗效。用平均值土SEM绘制图形;对于每个时间点，仅在研究中有80%或更多动物每个群组至少8只动物时才绘制平均值土SEM最初每个群组有10只小鼠）。[0010]图3示出了在ALL细胞系肿瘤异种移植模型NALM-6模型）中达雷木单抗及达雷木单抗与长春新碱的组合的疗效。将动物分成四个处理组，并施用l〇mgkg达雷木单抗、0.5mgkg长春新碱或者达雷木单抗与长春新碱的组合。相对于肿瘤接种后的天数绘制中位存活时间。具体实施方式[0011]"CD38"是指人CD38蛋白（别名:ADP核糖基环化酶1、cADPr水解酶1、环ADP核糖水解酶1。人⑶38具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。[0012]如本文所用，术语"抗体"含义广泛且包括:免疫球蛋白分子，包括多克隆抗体;单克隆抗体，包括鼠、人、人适应性、人源化和嵌合单克隆抗体;抗体片段;双特异性或多特异性抗体;二聚体、四聚体或多聚体抗体;以及单链抗体。[0013]免疫球蛋白可根据重链恒定结构域氨基酸序列被指定为五种主要种类，即IgA、IgD、IgE、IgG和IgIVLIgA和IgG进一步亚分类为同种型IgAi、IgA2、IgGi、IgG2、IgG3和IgG4。任何脊椎动物物种的抗体轻链可基于其恒定结构域的氨基酸序列被分配到两种完全不同的类型中的一种下，即κ㈨和λλ。[0014]术语"抗体片段"是指免疫球蛋白分子的一部分，其保留重链和或轻链抗原结合位点，诸如重链互补决定区HCDR1、2和3,轻链互补决定区（IXDR1、2和3,重链可变区（VH或轻链可变区VL。抗体片段包括:Fab片段，即由VL、VH、CL和CHI结构域组成的单价片段;Fab2片段，即包含在铰链区通过二硫键连接的两个Fab片段的双价片段；由VH和CHI结构域组成的Fd片段；由抗体单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段;结构域抗体dAb片段Ward等人，（1989Nature341:544-546，其由VH结构域组成。VH结构域和VL结构域可被改造并经由合成接头连接在一起以形成各种类型的单链抗体设计，其中在VH结构域和VL结构域由单独的单链抗体构建体表达的情况下，VHVL结构域在分子内或分子间配对，以形成单价抗原结合位点，诸如单链FvscFv或双价抗体；例如在PCT国际公布W019984400UW0198801649、W0199413804和W0199201047中所描述的。使用本领域的技术人员熟知的技术获得这些抗体片段，并筛选出效用方式与全长抗体相同的片段。[0015]短语"分离抗体"是指基本上不含具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体或抗体片段（例如，特异性结合CD38的分离抗体基本上不含特异性结合人CD38之外的抗原的抗体）。然而，特异性结合CD38的分离抗体可能对其它抗原具有交叉反应性，诸如人CD38的直系同源抗原，诸如食蟹猕猴MacacafascicularisCD38。此外，分离抗体可基本上不含其它细胞物质和或化学物质。[0016]抗体可变区由被三个"抗原结合位点"中断的"框架"区组成。使用不同术语来定义抗原结合位点，诸如：三个在VHHCDR1、HCDR2、HCDR3中且三个在VLLCDR1、LCDR2、LCDR3中的互补决定区（CDR，其基于序列变异性Wu和Kabat，JExpMed132:211-50,1970;Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版，PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，Md.,1991;或三个在VHH1、H2、H3中且三个在VLL1、L2、L3中的"超变区"、"HVR"或"HV"，是指抗体可变结构域中的在结构上超变的区，如Chothia和Lesk所定义Chothia和Lesk，MolBiol196:901-17,1987。其它术语包括"IMGT-CDR"（Lefranc等人，DevComparatImmunol27:55-77,2003和"特异性决定残基用途"（SDRUAlmagro,MolRecognitl7:132-43,2004。国际ImMunoGeneTicsaMGT数据库http:www_imgt_org提供了抗原结合位点的标准化编号和定义。CDR、HV与IMGT划分之间的对应性在Lefranc等人，DevComparatImmunol27:55-77，2003中有所描述。[0017]如本文所用，"Chothia残基"是抗体VL和VH残基，其根据Al-Lazikani来编号A1-Lazikani等人，JMolBiol273:927-48,1997。[0018]"框架"或"框架序列"是可变区的除了被定义为抗原结合位点的那些序列之外的其余序列。因为抗原结合位点可以由如上所述的各种术语定义，所以框架的精确氨基酸序列取决于如何定义抗原结合位点。[0019]"人源化抗体"是指其中抗原结合位点来源于非人物种且可变区框架来源于人免疫球蛋白序列的抗体。人源化抗体在框架区中可包含置换，使得该框架可能不是表达的人免疫球蛋白或种系基因序列的精确拷贝。[0020]"人适应性"抗体或"人框架适应性（HFA"抗体是指根据美国专利公布US20090118127中所描述的方法适应化的人源化抗体。通过如下方式将人适应性抗体人源化:基于CDR1和CDR2环及一部分轻链CDR3环的最大CDR与FR相似性、长度相容性和序列相似性，来选择受体人框架。[0021]"人抗体"是指具有重链可变区和轻链可变区的抗体，其中框架和抗原结合位点均来源于人起源的序列。如果所述抗体包含恒定区，则该恒定区也来源于人起源的序列。[0022]人抗体包含"来源于"人起源序列的重链可变区或轻链可变区，其中抗体的可变区来源于使用人种系免疫球蛋白或重排免疫球蛋白基因的系统。此类系统包括在噬菌体上展示的人免疫球蛋白基因文库，以及转基因非人动物，诸如携带如本文所述的人免疫球蛋白基因座的小鼠。在与人种系或重排免疫球蛋白序列进行比较时，"人抗体"可包含由于例如天然存在的体细胞突变或者在框架或抗原结合位点中特意引入置换所引起的氨基酸差异。通常，人抗体的氨基酸序列与由人种系或重排免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列具有至少约80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的同一性。在一些情况下，"人抗体"可包含由人框架序列分析得到的共有框架序列（例如Knappik等人，JMolBiol296:57-86,2000中所述）；或结合到展示在噬菌体上的人免疫球蛋白基因文库中的合成HCDR3例如Shi等人，JMolBiol397:385-96,2010和国际专利公布W02009085462中所述）。人抗体的定义中不包括其中抗原结合位点来源于非人物种的抗体。[0023]分离的人源化抗体可以是合成的。虽然人抗体来源于人免疫球蛋白序列，但可使用诸如噬菌体展示的系统结合合成的CDR和或合成的框架来生成该人抗体，或者可对其进行体外诱变以改善抗体特性，从而得到并非天然存在于体内整套人抗体种系内的抗体。[0024]如本文所用，术语"重组抗体"包括通过重组方法制备、表达、构建或分离的所有抗体，诸如:从动物例如，小鼠）分离的抗体，即人免疫球蛋白基因的转基因或转染色体，或从其制备的杂交瘤分离的抗体在下文中进一步描述）；从经转化以表达抗体的宿主细胞分离的抗体;从重组的、组合的抗体文库分离的抗体；以及通过涉及将人免疫球蛋白基因序列与其它DNA序列剪接在一起的任何其它方法制备、表达、构建或分离的抗体，或使用Fab臂交换体外生成的抗体，诸如双特异性抗体。[0025]如本文所用，术语"单克隆抗体"是指单分子组合物的抗体分子的制剂。单克隆抗体组合物显示出对于特定表位的单一结合特异性和亲和力，或就双特异性单克隆抗体而言，显示出对于两种不同表位的双重结合特异性。[0026]如本文所用，术语"表位"意指抗原的与抗体特异性结合的部分。表位通常由部分moiety诸如氨基酸或多糖侧链的化学活性诸如，极性、非极性或疏水性表面基团构成，并且可以具有特定三维结构特征以及特定电荷特征。表位可由形成构象空间单元的连续和或不连续氨基酸构成。对于不连续表位，来自抗原的线性序列的不同部分的氨基酸因蛋白质分子的折叠而在三维空间上靠近。[0027]如本文所用，"变体"是指因一处或多处修改例如置换、插入或缺失而不同于参考多肽或参考多核苷酸的多肽或多核苷酸。[0028]"协同"、"协同作用"或"协同的"意指超过组合的预期加性效应。[0029]如本文所用，术语"与……联用"意指两种或更多种治疗剂可以在混合物中一起、作为单一试剂同时地或作为单一试剂以任何顺序依次地施用于受检者。[0030]术语"治疗"或"处理"是指治疗处理和预防或防御措施，其中目标是防止或减缓减轻非期望的生理变化或障碍，诸如肿瘤或肿瘤细胞的发展或扩散。有益或期望的临床结果包括症状的减轻、疾病程度的减弱、疾病的稳定（即，未恶化状态、疾病进展的延迟或减慢、疾病状态的改善或缓和，以及缓解不论是部分缓解还是完全缓解），不论是可检测的还是不可检测的。"治疗"也可意指与受检者未接受治疗时的预期生存期相比延长生存期。需要治疗的个体包括已患有病症或障碍的个体以及易患病症或障碍的个体或者要预防病症或障碍的个体。[0031]"抑制生长"（例如，涉及细胞，诸如肿瘤细胞是指与本领域技术人员熟知的适当对照条件下生长的相同细胞的生长相比，在与治疗剂或者治疗剂或药物的组合接触时体外或体内细胞生长的可测量下降。体外或体内细胞生长的抑制可为至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、99%或100%。细胞生长的抑制可通过多种机制发生，例如通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡、坏死或通过细胞增殖的抑制。[0032]"治疗有效量"指在所需剂量和时间段有效实现期望的治疗结果的量。治疗有效量可根据一些因素而变化，诸如个体的疾病状态、年龄、性别和重量，以及治疗剂或治疗剂组合在个体中引发期望应答的能力。有效治疗剂或治疗剂组合的示例性指标包括，例如：患者健康状况的改善，肿瘤负荷的减少，肿瘤生长的遏止或减慢，和或癌细胞没有向身体其它部位转移的情况。[0033]本文所述的本发明的一个实施方案，以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，是治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的方法，该方法包括向对其有需要的患者施用抗CD38抗体，该抗CD38抗体与包含SEQIDN0:4的重链可变区VH和SEQIDN0:5的轻链可变区（VL的抗体竞争结合⑶38,其中抗⑶38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞。[0034]本文所述的本发明的另一个实施方案，以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，是治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的方法，该方法包括向对其有需要的患者施用抗⑶38抗体，该抗⑶38抗体结合于人⑶38SEQIDNO:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2和EKVQTLEAWVIHGG区（SEQID勵：3，其中抗038抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞。抗体的表位包括具有以SEQIDN0:2或SEQIDN0:3示出的序列的一些或所有残基。在本文所公开的一些实施方案中（包括在下列带有编号的实施方案中），抗体表位包含人CD38SEQIDN0:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2中的至少一个氨基酸以及EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDNO:3中的至少一个氨基酸。在本文所公开的一些实施方案中（包括在下列带有编号的实施方案中），抗体表位包含人CD38SEQIDN0:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2中的至少两个氨基酸以及EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDN0:3中的至少两个氨基酸。在本文所公开的一些实施方案中（包括在下列带有编号的实施方案中），抗体表位包含人CD38SEQIDNO:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2中的至少三个氨基酸以及EKVQTLEAWVIHGG区SEQIDN0:3中的至少三个氨基酸。在本文所公开的一些实施方案中（包括在下列带有编号的实施方案中），抗CD38抗体结合于表位，该表位包含人CD38SEQIDN0:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2中的至少KRN，并且包含EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDNO:3中的至少VQLTSEQIDNO:14。[0035]结合于人CD38SEQIDNO:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2和EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDNO:3或最小限度地结合于如上所示的残基KRN和VQLTSEQIDNO:14的示例性抗体是达雷木单抗参见国际专利公布W020060998647。达雷木单抗包含分别以SEQIDN0:4和5示出的VH和VL氨基酸序列，分别为SEQIDN0:6、7和8的重链⑶RHCDR1、HCDR2和HCDR3,以及分别为SEQIDN0:9、10和11的轻链CDRLCDRULCDR2和LCDR3，并且是IgGlκ亚型。达雷木单抗重链氨基酸序列以SEQIDN0:12示出，而轻链氨基酸序列以SEQIDN0:13示出。[0036]SEQIDN0：1[0037]MANCEFSPVS⑶KPCCRLSRRAQLCLGVSILVLILVWLAVWPRWRQQWSGPGTTKRFPETVLARCVKYTEIHPEMRHVDCQSVWDAFKGAFISKHPCNITEEDYQPLMKLGTQTVPCNKILLWSRIKDLAHQFTQVQRDMFTLE达雷木单抗对于结合⑶38的竞争。在示例性方法中，重组表达⑶38的CHO细胞可与未标记的达雷木单抗一起在4°C下温育15分钟，然后与过量的荧光标记的测试抗体一起在4°C下温育45分钟。在PBSBSA中洗涤后，可使用标准方法通过流式细胞术测量荧光。在另一示例性方法中，人⑶38的细胞外部分可包被在ELISA板的表面上。可在约15分钟内加入过量的未标记达雷木单抗，随后可加入生物素酰化测试抗体。在PBS吐温中洗涤后，可使用辣根过氧化物酶HRP缀合的链霉亲和素检测生物素酰化测试抗体的结合，并使用标准方法检测信号。显而易见的是，在竞争测定法中，达雷木单抗可带有标记，而测试抗体不带标记。测试抗体与达雷木单抗竞争，此时达雷木单抗抑制测试抗体的结合或测试抗体抑制达雷木单抗的结合达20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%或100%。可使用已知方法，通过例如肽作图或氢氘保护测定法，或通过晶体结构测定，来进一步限定测试抗体的表位。[0067]在CD38上结合的区与达雷木单抗相同的抗体可例如通过如下方式生成:使用标准方法并如本文所述的那样，利用具有以SEQIDN0:2和3示出的氨基酸序列的肽来免疫小鼠。可例如通过如下方式进一步评估抗体:使用熟知的体外方法并如上所述的那样，测定达雷木单抗与测试抗体两者对于结合CD38的竞争。[0068]抗体的Fc部分可介导抗体效应子功能，诸如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP或补体依赖性细胞毒性CDC。这种功能可通过如下方式介导:Fc效应子结构域结合于具有吞噬或裂解活性的免疫细胞上的Fc受体，或Fc效应子结构域结合于补体系统的成分。通常，Fc结合细胞或补体成分所介导的效应导致靶细胞例如，表达CD38的细胞）的抑制和或耗竭。人IgG同种型IgG1、IgG2、IgG3和IgG4表现出效应子功能的差异能力。ADCC可由IgGl和IgG3介导，ADCP可由IgGl、IgG2、IgG3和IgG4介导，并且⑶C可由IgGl和IgG3介导。[0069]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体为IgGl、IgG2、IgG3或IgG4同种型。[0070]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38通过ADCC来诱导体外杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0071]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38通过⑶C来诱导体外杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0072]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体通过ADCP来诱导体外杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0073]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体通过细胞凋亡来诱导体外杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0074]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体通过ADCC和⑶C来诱导体外杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0075]虽然不希望受有关作用机制的任何具体理论的束缚，但预计本发明的抗CD38抗体将通过ADCC、⑶C、ADCP、细胞凋亡或⑶38酶活性体内调节来诱导体内杀伤表达⑶38的ALL细胞。[0076]"抗体依赖性细胞毒性"、"抗体依赖性细胞介导的细胞毒性"或"ADCC"是诱导细胞死亡的机制，该机制依赖于抗体包被靶细胞与具有裂解活性的效应细胞诸如自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞经由效应细胞上表达的Fcγ受体FcγR发生的相互作用。例如，NK细胞表达FcγRIIla，而单核细胞表达FcγRI、FcγRII和FcvRIIla。效应细胞通过分泌膜孔形成蛋白和蛋白酶而具有的活性会导致抗体包被靶细胞诸如表达CD38的细胞发生死亡。为评估抗CD38抗体的ADCC活性，可将抗体与免疫效应细胞联合加入到表达CD38的细胞中，所述免疫效应细胞可被抗原抗体复合物激活，从而使靶细胞发生细胞溶解。通常根据从裂解的细胞中释放的标记物例如放射性底物、荧光染料或天然细胞内蛋白质）来检测细胞溶解。用于此类测定法的示例性效应细胞包括外周血单核细胞PBMC和NK细胞。示例性靶细胞包括表达⑶38的Daudi细胞ΑΤ€€^α-213ΤΜ或B细胞白血病或淋巴瘤肿瘤细胞。在示例性测定法中，用20yCi的51Cr标记靶细胞2小时，然后充分冲洗。可将靶细胞的细胞浓度调节到IX1〇6个细胞ml，并添加各种浓度的抗⑶38抗体。以40:1的效应子:靶细胞比率添加Daudi细胞，由此开始测定。在37°C下温育3小时后，通过离心终止测定，然后在闪烁计数器中测量从裂解的细胞中释放的51Cr。可按将3%高氯酸加入靶细胞中可诱导的最大裂解％来计算细胞毒性的百分比。用于本发明的方法中的抗CD38抗体可诱导ADCC达对照（通过3%高氯酸诱导的细胞裂解）的约20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%〇[0077]"抗体依赖性细胞吞噬作用"（"ADCP"）是指通过吞噬细胞诸如巨噬细胞或树突细胞的内化作用消除抗体包被靶细胞的机制。可通过如下方式评估ADCP:使用单核细胞来源的巨噬细胞作为效应细胞，并使用表达⑶38的Daudi细胞在TCC®CCL-213tm或者B细胞白血病或淋巴瘤肿瘤细胞作为靶细胞，所述靶细胞被改造成表达GFP或其它标记分子。效应子:靶细胞比率可为例如4:1。可在含或不含抗CD38抗体的情况下，将效应细胞与靶细胞一起温育4小时。在温育后，可使用accutase分离细胞。可使用偶联至荧光标记物的抗⑶lib抗体和抗⑶14抗体鉴定巨噬细胞，并且可使用标准方法根据⑶11+⑶14+巨噬细胞中的GFP荧光％确定吞噬百分比。用于本发明的方法中的抗CD38抗体可诱导ADCP达约20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%。[0078]"补体依赖性细胞毒性"或"CDC"是指诱导细胞死亡的机制，其中靶标结合抗体的Fc效应子结构域结合并活化补体成分Clq，继而激活补体级联，导致靶细胞死亡。补体的活化也可导致补体成分沉积在靶细胞表面上，这些补体成分通过结合白细胞上的补体受体例如，CR3来促进ADCC。可例如通过如下方式测量表达⑶38的细胞的⑶C:将Daudi细胞以1X1〇5个细胞孔（50μ1孔接种到RPMI-B补充有1%BSA的RPMI中，将50μ1抗CD38抗体以0-100μgml之间的最终浓度加入到孔中，将反应在室温下温育15分钟，将11μ1的混合人血清加入到孔中，然后将反应在37°C下温育45分钟。可使用标准方法在FACS测定法中检测碘化丙啶染色细胞％作为裂解细胞百分比（％。用于本发明的方法中的抗CD38抗体可诱导CDC达约20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%。[0079]单克隆抗体诱导ADCC的能力可通过改造其低聚糖成分来增强。人IgGl或IgG3在Asn297处被熟知的双分枝60、6^、61、61?、62或62?形式的大多数聚糖^糖基化。由未经改造的CH0细胞产生的抗体通常具有约至少85%的聚糖岩藻糖含量。从连接到Fc区的双分枝复合物型低聚糖去除核心岩藻糖，可经由改善的FcyRIIIa结合来增强抗体的ADCC，而不会改变抗原结合或CDC活性。此类mAb可使用据报道能引起具有双分枝复合物型Fc低聚糖的相对较高去岩藻糖基化抗体的成功表达的不同方法实现，诸如:控制培养物渗透压Konno等人，Cytotechnology64:249-65,2012，应用变体CHO细胞系Lecl3作为宿主细胞系Shields等人，JBiolChem277:26733-26740,2002，应用变体CH0细胞系EB66作为宿主细胞系（Olivier等人，MAbs;2⑷，2010;印刷前电子版;PMID:20562582，应用大鼠杂交瘤细胞系YB20作为宿主细胞系（Shinkawa等人，JBiolChem278:3466-3473,2003，引入特异性针对αΐ，6_岩藻糖基转移酶（FUT8基因的小干扰RNAMori等人，BiotechnolBioeng88:901-908，2004，或共表达β-1，4-N-乙酰基葡萄胺转移酶III和高尔基体α-甘露糖苷酶Π或强效α-甘露糖苷酶I抑制剂几夫碱（kifunensineFerrara等人，JBiolChem281:5032-5036，2006，Ferrara等人，Biotechno1Bioeng93:851-861，2006;Xhou等人，BiotechnolBioeng99:652-65,2008。由用于本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体所引发的ADCC，也可通过抗体Fc中的某些置换来增强。示例性置换为例如在氨基酸位置256、290、298、312、356、330、333、334、360、378或430根据EU索引对残基进行编号处的置换，如美国专利6，737，056中所述。[0080]在本文所述的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体包含抗体Fc中的置换。[0081]在本文所述的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体包含抗体Fc中的氨基酸位置256、290、298、312、356、330、333、334、360、378或430根据EU索引对残基进行编号处的置换。[0082]在本文所述的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体具有岩藻糖含量大约在0%至约15%之间（例如15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或0%的双分枝聚糖结构。[0083]在本文所述的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体具有岩藻糖含量为约50%、40%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或0%的双分枝聚糖结构。[0084]Fc中的置换和减少的岩藻糖含量可增强抗CD38抗体的ADCC活性。[0085]"岩藻糖含量"意指Asn297处糖链内的岩藻糖单糖的量。岩藻糖的相对量为含岩藻糖的结构相对于所有糖结构的百分比。这些结构可通过多种方法进行表征和定量，例如：1使用对经N-糖苷酶F处理的样品（例如，复合结构、混合结构及低聚甘露糖结构和高甘露糖结构）的MALDI-T0F，如国际专利公布W02008077546中所述;2酶促释放Asn297聚糖，随后衍生化并通过采用荧光检测的HPLCUPLC和或HPLC-MSUPLC-MS进行检测定量;3对天然或经还原的mAb进行完整蛋白分析，同时进行或不进行用EndoS或其它酶对Asn297聚糖的处理，所述酶在第一GlcNAc单糖和第二GlcNAc单糖之间引发裂解，留下连接至第一GlcNAc的岩藻糖;4通过酶消化例如，胰蛋白酶或内肽酶Lys-C将mAb消化为成分肽，随后通过HPLC-MSUPLC-MS进行分离、检测和定量;或5用PNGaseF在Asn297处进行特异性酶促去糖基化，从而将mAb低聚糖与mAb蛋白分离。可通过各种互补技术在所释放的低聚糖上标记荧光团，分离并鉴定所释放的低聚糖，这些技术允许：采用基质辅助激光解吸电离MALDI质谱法，通过比较实验质量与理论质量来对聚糖结构进行精细表征;通过离子交换HPLCGlyC〇SepC确定唾液酸化程度;通过正相HPLCGlyC〇SepN，根据亲水性标准分离和定量低聚糖形式；以及通过高效毛细管电泳激光诱导荧光HPCE-LIF分离和定量低聚糖。[0086]如本申请中所用，"低岩藻糖"或"低岩藻糖含量"是指抗体的岩藻糖含量为约0%-15%〇[0087]如本文所用，"正常岩藻糖"或"正常岩藻糖含量"是指抗体的岩藻糖含量大约高于50%，通常大约高于60%、70%、80%或高于85%。[0088]用于本文所述方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体，可通过细胞凋亡来诱导体外杀伤ALL细胞。用于评估细胞凋亡的方法是熟知的，并且包括例如使用标准方法的膜联蛋白IV染色。用于本发明的方法中的抗CD38抗体可在约20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%的细胞中诱导细胞凋亡。[0089]用于本文所述方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体，可通过CD38酶活性调节来诱导体外杀伤ALL细胞。CD38是多功能胞外酶，其具有ADP核糖基环化酶1活性，催化由NAD+形成环ADP核糖cADPR和ADPR的过程，并且还起到将NAD+和cADPR水解成ADPR的作用。CD38还催化酸性条件下NADP+的烟酰胺基团与烟酸的交换，产生NAADP+烟酸-腺嘌呤二核苷酸磷酸）。用于本发明方法中的抗⑶38抗体对人CD38的酶活性的调节，可在Graeff等人，J.Biol.Chem.269，30260-302671994所述的测定法中进行测量。例如，可将底物NGD+与CD38-起温育，并且可在添加各种浓度的抗体后的不同时间点，通过分光光度法，在340nM的激发波长和410nM的发射波长下监测环GDP核糖cGDPR生成的调节。可根据Munshi等人，J.Biol.Chem.275,21566-215712000所述的HPLC方法确定cADPR合成的抑制。用于本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗⑶38抗体可抑制⑶38酶活性达至少约20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%〇[0090]在本文所述的本发明的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体包含分别为SEQIDN0:6、7和8的重链互补决定区HCDR1HCDR1、2HCDR2和3HCDR3序列。[0091]在本文所述的本发明的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体包含分别为SEQIDN0:9、10和11的轻链互补决定区LCDR1LCDR1、2LCDR2和3LCDR3序列。[0092]在本文所述的本发明的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体包含SEQIDN0:4的重链可变区（VH和SEQIDN0:5的轻链可变区VL。[0093]在本文所述的本发明的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体包含SEQIDN0:12的重链和SEQIDN0:13的轻链。[0094]在本文所述的本发明的一些方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体包含氨基酸序列与SEQIDN0:12的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链以及氨基酸序列与SEQIDN0:13的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链。[0095]与包含SEQIDN0:12的重链和SEQIDN0:13的轻链的抗体基本上相同的抗体可用于本发明的方法中。如本文所用，术语"基本上相同"意指被比较的两个抗体重链氨基酸序列或轻链氨基酸序列是相同的或具有"非显著性差异"。非显著性差异是指抗体重链或轻链中有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个氨基酸被置换，这些置换不会对抗体的特性造成不利影响。百分比同一性可以例如通过使用VectorNTIv.9.0.0Invitrogen,Car1sbad，CA的A1ignX模块的默认设置的配对比对而确定。本发明的蛋白质序列可以用作查询序列以针对公共或专利数据库进行检索，以例如鉴定相关序列。用来进行此类检索的示例性程序是使用默认设置的XBLAST或BLASTP程序http_www_ncbi_nlmnih_gov或GenomeQuest™GenomeQuest，Westborough，MA软件包。可对用于本发明方法中的抗CD38抗体进行的示例性置换为例如用具有相似电荷、疏水性或立体化学特性的氨基酸进行的保守置换。还可作出保守置换以改善抗体特性，例如稳定性或亲和力，或改善抗体效应子功能。可例如对抗CD38抗体的重链或轻链作出1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个氨基酸置换。此外，重链或轻链中的任何天然残基还可以用丙氨酸来置换，如此前对于丙氨酸扫描诱变所述的（MacLennan等人，ActaPhysiolScandSuppl643:55_67，1998;Sasaki等人，AdvBiophys35:1-24,1998。所需的氨基酸置换可以由本领域技术人员在需要此类置换时确定。氨基酸置换可以例如通过PCR诱变来进行美国专利4,683,195。可使用熟知方法生成变体文库，例如使用随机NNK或非随机密码子例如DVK密码子，其编码11个氨基酸Ala、Cys、Asp、Glu、Gly、Lys、Asn、Arg、Ser、Tyr、Trp，并在文库中筛选具有所需特性的变体。可使用本文所述的方法检测所生成的变体对CD38的结合，及其体外诱导ADCC、ADCP或细胞凋亡的能力，或调节CD38酶活性的能力。[0096]在本文所述的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体能够以一系列亲和力KD结合人CD38。在根据本发明的一个实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体以高亲和力结合于CD38,例如，由表面等离子体共振或Kinexa方法确定，Kd等于或小于约10-7Μ，诸如但不限于1_9.9或其中的任何范围或值，诸如1、2、3、4、5、6、7、8或9\10_8、10_9、10_1、，^^、^^^^^或其中的任何范围或值洳本领域技术人员所实践广种示例性亲和力等于或小于1X1〇_8Μ。另一种示例性亲和力等于或小于1X10-9Μ。[0097]在一些实施例中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体为双特异性抗体。可将现有抗CD38抗体的VL和或VH区或者如上文所述从头鉴定的VL和VH区改造成双特异性全长抗体。可使用诸如以下专利中所述的那些技术，通过调节单特异性抗体重链之间的CH3相互作用以形成双特异性抗体，从而制备此类双特异性抗体：美国专利7,695,936;国际专利公布冊04111233;美国专利公布1^20100015133;美国专利公布US20070287170;国际专利公布W02008119353;美国专利公布US20090182127;美国专利公布US20100286374;美国专利公布US20110123532;国际专利公布W02011131746;国际专利公布W02011143545;或美国专利公布US20120149876。可在其中结合本发明的抗体的VL区和或VH区的另外的双特异性结构是例如双可变结构域免疫球蛋白（国际专利公布W02009134776，或包括多种二聚化结构域以连接具有不同特异性的两个抗体臂的结构，诸如亮氨酸拉链或胶原二聚化结构域（国际专利公布W02012022811、美国专利5,932,448、美国专利6,833,441。[0098]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体缀合至毒素。缀合方法和合适的毒素是熟知的。[0099]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL是B细胞谱系ALL。[0100]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL是T细胞谱系ALL。[0101]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL是成人ALL。[0102]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL是小儿ALL。[0103]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体作为缓解诱导或作为后诱导疗法来施用。[0104]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL是难治性或复发性ALL。[0105]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，受检者的白细胞计数为至少约1X1〇9个L。[0106]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，ALL细胞具有费城染色体。[0107]"费城染色体"或"Ph"是指熟知的9号与22号染色体之间的染色体易位，所得的致癌BCR-ABL融合基因具有组成型活性的酪氨酸激酶活性。该易位使得来自染色体22qll的BCR基因的一部分与来自染色体9q34的ABL基因的一部分融合，按照人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN被命名为t9;22q34;qll。取决于融合的精确位置，所得融合蛋白的分子量可在185kDa至210kDa范围内。"费城染色体"是指因（9;22q34;ql1易位而形成的所有BCR-ABL融合蛋白。[0108]Ph染色体存在于约20%患有ALL的成人中，以及一小部分患有ALL的儿童中，并且与不良预后相关联。在复发时，患有Ph+阳性ALL的患者可采取酪氨酸激酶抑制剂TKI治疗方案，并且可因此对TKI产生抵抗性。如此，可向已对选择性或部分选择性BCR-ABL抑制剂产生抵抗性的受检者施用抗CD38抗体。示例性BCR-ABL抑制剂是例如伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、博舒替尼、普纳替尼、巴非替尼、塞卡替尼、陶扎色替、达鲁舍替或依鲁替尼。[0109]在B谱系ALL患者中鉴定的其它染色体重排是tv;llq23MLL重排）、tl;19q23;pl3.3;TCF3-PBXlE2A-PBXl、t12;21pl3;q22;ETV6-RUNX1TEL-AML1以及t5；14q31；q32；IL3-IGH〇[0110]在一些实施方案中，受检者患有具有tv;llq23MLL重排）、tl;19q23;ρ13·3;TCF3-PBX1E2A-PBX1、t12;21pl3;q22;ETV6-RUNX1TEL-AML1或t5;14q31;q32;IL3_IGH染色体重排的ALL。[0111]染色体重排可使用熟知的方法例如荧光原位杂交、染色体核型分析、脉冲场凝胶电泳或测序进行鉴定。[0112]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，受检者对采用至少一种BCR-ABL激酶抑制剂进行的治疗表现出抵抗性，或已获得对这种治疗的抵抗性。[0113]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，所述至少一种BCR-ABL激酶抑制剂是伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、博舒替尼、普纳替尼、巴非替尼、塞卡替尼、陶扎色替、达鲁舍替或依鲁替尼。[0114]可使用各种定性和或定量方法确定受检者是否对采用至少一种BCR-ABL激酶抑制剂进行的治疗表现出抵抗性，或者已发展出对这种治疗的抵抗性，或易发展出对这种治疗的抵抗性。可能与抵抗性相关的症状包括例如：患者健康状况的下降或平稳，肿瘤尺寸的增加，癌细胞数量的增多，肿瘤或肿瘤细胞的生长下降受阻或减缓，和或身体中的癌细胞从一个部位扩散到其它器官、组织或细胞。与肿瘤相关的各种症状的复发或恶化也可指示受检者已发展出或易发展出对至少一种BCR-ABL激酶抑制剂的抵抗性。与癌相关的症状可根据癌的类型而有所变化。例如，与ALL相关的症状可包括:颈部、腹股沟或腋窝的淋巴结肿大，发烧，盗汗，咳嗽，胸痛，原因不明的消瘦，腹部肿胀或疼痛，或者饱腹感。确定受检者是否已发展出对至少一种BCR-ABL激酶抑制剂的抵抗性的其它方法包括分析患有ALL的患者的肿瘤负荷。[0115]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体与长春新碱联合施用。[0116]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，受检者已接受或将接受放射疗法。[0117]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，受检者已接受或将接受骨髓移植。[0118]在本文所述的一些实施方案中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，患有ALL的受检者对于CD16的位置158处的苯丙氨酸是纯合的（FcγRIIIa-158FF基因型），或对于CD16的位置158处的缬氨酸和苯丙氨酸是杂合的（FcγRIIIa-158FV基因型）。016也称为Fcγ受体IliaFcγRllla或低亲和力免疫球蛋白γFc区受体IIΙ-A同种型。已证实FeyRIIla蛋白残基位置158处的缬氨酸苯丙氨酸VF多态性会影响FcγRIIla对人IgG的亲和力。与FcγRIIIa-158VV相比，具有FcγRIIIa-158FF或FcγRIIIa-158FV多态性的受体展示出减弱的Fc接合及因此减轻的ADCC。人类N-连接的低聚糖上不含或含少量岩藻糖，提高了抗体诱导ADCC的能力，这是由于抗体对人FcγRIIlaCD16的结合得以改善（Shields等人，JBiolChem277:26733-40,2002。可使用常规方法分析患者的FcγRllla多态性。[0119]本发明还提供了用于治疗患有ALL的受检者的方法，该方法包括向对其有需要的患者施用与人CD38SEQIDN0:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2和EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDN0:3结合的抗CD38抗体，其中抗CD38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤表达CD38的细胞，其中受检者对于CD16的位置158处的苯丙氨酸是纯合的，或对于CD16的位置158处的缬氨酸和苯丙氨酸是杂合的。[0120]本发明还提供了用于治疗患有ALL的受检者的方法，该方法包括向对其有需要的患者施用抗CD38抗体，该抗CD38抗体与包含SEQIDN0:4的重链可变区（VH和SEQIDN0:5的轻链可变区（VL的抗体竞争结合CD38，其中抗CD38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP、补体依赖性细胞毒性（CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞，其中受检者对于CD16的位置158处的苯丙氨酸是纯合的，或对于CD16的位置158处的缬氨酸和苯丙氨酸是杂合的。[0121]施用药物组合物[0122]在本文所述的本发明的方法中，并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗⑶38抗体可在包含抗⑶38抗体和药学上可接受的载体的合适药物组合物中提供。载体可为抗CD38抗体与之一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或溶媒。此类溶媒可以是液体，诸如水和油，包括那些来源于石油、动物、植物的油或合成的油，诸如花生油、大豆油、矿物油和芝麻油等。例如，可使用0.4%盐水和0.3%甘氨酸。这些溶液是无菌的，并且通常不含颗粒物。它们可通过熟知的常规灭菌技术例如过滤进行灭菌。组合物可根据需要含有药学上可接受的辅助物质，以接近生理条件，诸如pH调节剂和缓冲剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂和着色剂等。此类药物制剂中的本发明分子或抗体的浓度可广泛改变，即从小于约0.5重量％，通常到至少约1重量％至多达15重量％或20重量％，并且将根据所选择的具体施用方式，主要基于所需剂量、流体体积、粘度等进行选择。包含其它人蛋白如人血清白蛋白在内的合适的溶媒和制剂在例如Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy，第21版，Troy，D.B.编辑，LipincottWilliamsandWilkins,Philadelphia,PA2006，第5部分，PharmaceuticalManufacturing，第691-1092页中有所描述，特别参见第958-989页。[0123]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中抗CD38抗体的施用方式可为任何合适的途径，诸如非肠道给药，例如，真皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内或皮下、肺、经粘膜（口腔、鼻内、阴道内、直肠或技术人员了解的其它方式，如本领域众所周知的。[0124]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体可通过任何合适的途径施用给患者，例如，通过静脉内（i.v.输注或推注进行肠胃外施用，肌肉内施用，或皮下施用，或腹膜内施用。可在例如15、30、60、90、120、180或240分钟内，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12小时内给予静脉内输注。[0125]向患有ALL的患者给予的剂量足以缓解或至少部分地遏止正在治疗的疾病（"治疗有效量"），并且有时可为〇·〇〇5mgkg至约100mgkg，例如约0·05mgkg至约30mgkg，或约5mgkg至约25mgkg，或约4mgkg，约8mgkg，约16mgkg或约24mgkg，或例如约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mgkg，但可甚至更高，例如约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、40、50、60、70、80、90S100mgkg。[0126]也可以给予固定的单位剂量，例如，50、100、200、500或100011^，或者可以根据患者的表面积确定剂量，例如，500、400、300、250、200或10011^1112。通常可施用介于1和8次之间的剂量例如，1、2、3、4、5、6、7或8次）以治疗厶1^，但是可以给予9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多次的剂量。[0127]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体可以在一天、两天、三天、四天、五天、六天、一周、两周、三周、一个月、五周、六周、七周、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月或更长时间之后重复施用。也可以重复治疗疗程，按照慢性施用一样。重复施用可为相同剂量或不同剂量。例如，本发明的方法中的抗CD38抗体可通过静脉内输注以8mgkg或以16mgkg按一周的时间间隔施用8周，接着以8mgkg或以16mgkg按每两周一次的方式再施用16周，然后以8mgkg或以16mgkg按每四周一次的方式施用。[0128]在本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中可通过维持疗法来施用抗CD38抗体，诸如一周一次，为期6个月或更长时间。[0129]例如，本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体可以在治疗开始后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40天中的至少一天，或者另选地，在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20周中的至少一周，或其任何组合，采用单次剂量或者每24、12、8、6、4或2小时一次的分次剂量或其任何组合，以约〇.l-l〇〇mgkg的量作为日剂量提供，诸如0.5、0.9、1.0、1.1、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40、45、50、60、70、80、90或10011^1^天。[0130]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体也可以预防性地施用，以降低发展癌症的风险，延迟癌进展中事件的发作，和或在癌缓解后降低复发的风险。这对于其中肿瘤难以定位而由于其它生物因素已知患有肿瘤的患者可尤其有用。[0131]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体可冻干储存，并在使用之前在合适的载体中复原。此项技术已被证实对常规的蛋白制剂有效，并且可采用熟知的冻干和复原技术。[0132]本文所述的本发明的方法中以及下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中的抗CD38抗体可与长春新碱联合施用。[0133]长春新碱可例如按约0.1至2mgkg单次剂量以腹膜内方式施用，例如按0.1至0.511^1^单次剂量以腹膜内方式施用，例如按0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2.Omgkg施用。可以静脉内输注方式给予长春新喊。[0134]在本文所述的本发明的方法中并且在下列带有编号的实施方案中的每一者中的一些实施方案中，抗CD38抗体与长春新碱的组合可在任何方便的时间段内施用。例如，抗CD38抗体和长春新碱可在同一天、甚至在同一静脉内输注中施用给患者。然而，抗CD38抗体和长春新碱也可以隔天或隔周或隔月等施用。在一些方法中，抗CD38抗体和长春新碱可在足够接近的时间施用，使得它们同时以可检测水平存在于正在治疗的患者体内（例如，血清中）。在一些方法中，在一定时间段内由多个剂量组成的抗CD38抗体的整个治疗过程之后或之前是由多个剂量组成的长春新碱治疗过程。可在施用抗CD38抗体和长春新碱之间使用1、2或若干天或若干周的恢复期。[0135]抗CD38抗体或者抗CD38抗体和长春新碱的组合可连同任何形式的放射疗法和或外科手术一起施用，所述放射疗法包括外照射、调强放射治疗aMRT和任何形式的放射外科手术，包括伽玛刀、射波刀、直线加速器和组织间放射例如，植入放射性粒子、GliaSite球囊。[0136]虽然已概括地描述了本发明，但是本发明的实施方案还将在以下的实施例中进一步公开，所述实施例不应理解为限制权利要求的范围。[0137]本发明的其它实施方案[0138]下文根据本文别处的公开内容陈述了本发明的某些其它实施方案。上文陈述为与本文所公开的发明相关的本发明的实施方案的特征还涉及这些其它带有编号的实施方案中的每一者。[0139]1.一种用于治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的抗CD38抗体。[0140]2.-种用于与长春新碱联合用于治疗患有ALL的受检者的抗CD38抗体。[0141]3.与抗-CD38抗体联合用于治疗患有ALL的受检者的长春新碱。[0142]4.3.用于治疗患有ALL的受检者的抗⑶38抗体与长春新碱的组合。[0143]5.根据实施方案1或2所述使用的抗CD38抗体、根据实施方案3所述使用的长春新碱、或根据实施方案4所述的组合，其中所述抗CD38抗体与包含SEQIDN0:4的重链可变区VH和SEQIDN0:5的轻链可变区VL的抗体竞争结合⑶38，。[0144]6.根据实施方案1、2或5所述使用的抗CD38抗体，根据实施方案3或5所述使用的长春新碱，或根据实施方案4或5所述的组合，其中所述抗CD38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡、或⑶38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞，优选地其中抗⑶38抗体通过ADCC或⑶C来诱导体外杀伤ALL细胞。[0145]7.根据实施方案1、2、5或6所述使用的抗CD38抗体，根据实施方案3、5或6所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-6所述的组合，其中所述抗CD38抗体结合于人CD38SEQIDN0:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2和EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDN0:3。[0146]8.根据实施方案1、2、5-7所述使用的抗⑶38抗体，根据实施方案3、5-7所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-7所述的组合，其中所述抗CD38抗体：[0147]a.是IgGl、IgG2、IgG3或IgG4同种型；[0148]b·具有岩藻糖含量为约50%、40%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或0%的双分枝聚糖结构;或[0149]c.当根据EU索引对残基进行编号时，在抗体Fc中的氨基酸位置256、290、298、312、356、330、333、334、360、378或430处包含置换。[0150]9.根据实施方案1、2、5-8所述使用的抗⑶38抗体，根据实施方案3、5-8所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-8所述的组合，其中所述抗CD38抗体包含[0151]a.分别为SEQIDN0:6、7和8的重链互补决定区（HCDR1HCDR1、2HCDR2和3HCDR3序列；[0152]b.分别为SEQIDN0:9、10和11的轻链互补决定区（LCDR1LCDR1、2LCDR2和3LCDR3序列；[0153]C.SEQIDN0:4的重链可变区（VH和SEQIDN0:5的轻链可变区（VL;[0154]d.氨基酸序列与SEQID^:12的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链，以及氨基酸序列与SEQID勵：13的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链;或[0155]e.SEQIDN0:12的重链和SEQIDN0:13的轻链。[0156]10.根据实施方案1、2、5-9所述使用的抗⑶38抗体，根据实施方案3、5-9所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-9所述的组合，其中ALL是B细胞谱系ALL、T细胞谱系ALL、成人ALL、小儿ALL、难治性ALL或复发性ALL。[0157]11.根据实施方案1、2、5-10所述使用的抗CD38抗体，根据实施方案3、5-10所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-10所述的组合，其中所述抗CD38抗体作为缓解诱导或作为后诱导疗法来施用。[0158]12.根据实施方案1、2、5-11所述使用的抗⑶38抗体，根据实施方案3、5-11所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-11所述的组合，其中所述受检者[0159]a.具有至少约1X109个L的白细胞计数;或[0160]b.具有含费城染色体的ALL细胞。[0161]13.根据实施方案1、2、5-12所述使用的抗⑶38抗体，根据实施方案3、5-12所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-12所述的组合，其中所述BCR-ABL激酶抑制剂是伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、博舒替尼、普纳替尼、巴非替尼、塞卡替尼、陶扎色替、达鲁舍替或依鲁替尼。[0162]14.根据实施方案1、2、5-13所述使用的抗CD38抗体，根据实施方案3、5-13所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-13所述的组合，其中所述抗CD38抗体和长春新碱同时地、依次地或单独地施用。[0163]15.根据实施方案1、2、5-14所述使用的抗CD38抗体，根据实施方案3、5-14所述使用的长春新碱，或根据实施方案4-14所述的组合，其中[0164]a.所述受检者被进一步用放射疗法进行治疗或已用放射疗法进行过治疗;或[0165]b.所述受检者已接受造血干细胞移植。[0166]实施例1.来源于患者的ALL模型中达雷木单抗的疗效[0167]越[0168]本研究中使用患者肿瘤模型ALL7015和ALL7473。[0169]ALL7015模型:从患有B细胞谱系ALL的17岁女性身上切除肿瘤。白细胞计数WBC为98X109个L，血红蛋白（HB为101gL，血小板计数pit为24X109个L。费城染色体在肿瘤细胞中清晰易见，且具有重排BCRABL-P210t9;22q34:ql1。肿瘤细胞对下列重排呈阴性:TELAML1、E2APBX1、MLL相关基因、SILTAL1、IgH。肾母细胞瘤1基因（WT1与ABL基因的表达比率WT1ABL为1.2%。含95%原淋巴细胞的1级增生在骨髓中清晰易见。92.8%的异常骨髓细胞表达⑶38。[0170]ALL7473模型：从患有T细胞谱系ALL的35岁男性身上切除肿瘤。WBC为7.4X109个L，HB为112gL，plt为73X109个L。肿瘤细胞对下列染色体重排呈阴性:BCRABL、SILTAL、MLL相关基因、TCRSJTIABL为2.0%。含86%原淋巴细胞的I-II级增生在骨髓中清晰易见。78%的异常细胞表达⑶38。[0171]为N0DSCID雌性，3-4周龄接种2X106个ALL-7015或ALL-7473冷冻细胞。每3-4天一次评价动物外周血中的肿瘤细胞存在情况。当血液中的肿瘤负荷达到指定水平ALL7015:约4.2%，ALL7473:约0.5%时开始治疗。每周一次通过流式细胞术测量肿瘤负荷TB，并测量为眼窝采血所得外周血中CD45+CD38+细胞的百分比。另外，每天监测动物的发病率和死亡率。基于每个子组内的动物数量，记录死亡和所观察到的临床征象。[0172]通过双因素方差分析对各治疗之间的潜在治疗效果进行统计分析。p值〈0.05的所有数据均被视为具有统计意义上的显著性。[0173]图1示出了ALL7015模型中达雷木单抗的疗效，而图2示出了ALL7473模型中达雷木单抗的疗效。表1示出了ALL7015模型中不同时间点的肿瘤负荷。与用同种型对照治疗的小鼠相比，用l〇mgkg达雷木单抗进行的治疗在第29天、第36天和第43天引起了显著的肿瘤生长抑制。[0176]表2示出了ALL7015模型中不同时间点的肿瘤负荷。与用对照抗体治疗的小鼠相比，用达雷木单抗对小鼠进行的治疗显示出显著的肿瘤生长抑制。[0179]实施例2.来源于细胞系的前B细胞ALL模型中达雷木单抗的疗效[0180]经由尾静脉为CB17SCID小鼠静脉内接种100yLPBS中的1X105个细胞系NALM-6肿瘤细胞，以使肿瘤发展。肿瘤细胞接种的日期表示为第〇天。将动物分为四个处理组，并且按表3中所述的剂量施用达雷木单抗、长春新碱或者达雷木单抗与长春新碱的组合。由ALL复发的10岁男性的外周血建立NALM-6细胞系ACC128，DZMZ。细胞系的核型为4643-47〈2nXY,t5;12q33.2；pl3.2〇[0181]盡匕[0183]a:n，动物数目；[0184]i.p.:腹膜内注射；[0185]i.v.:静脉内注射；[0186]QW:每周一次；[0187]终点：主要终点是动物存活。每天评估每只小鼠，并用⑶:^对情况恶化且呈濒死状态的小鼠（体质量显著下降的动物:体重减少20%以及无法获取充足食物或水的动物处以安乐死。接着评价所有动物的存活情况，并计算每组的中位存活时间MST。每周测量两次体重。最多在溶媒组中位存活期的两倍时长后处死存活的小鼠。另外，在结束时进行尸检，以确认肿瘤进展情况。[0188]结果:与用对照或长春新碱单独治疗的小鼠相比，用达雷木单抗单独地作为单一疗法或与标准治疗长春新碱联合地对小鼠进行的治疗显著延长了存活期（图3。

权利要求：1.一种治疗患有急性成淋巴细胞性白血病ALL的受检者的方法，所述方法包括向对其有需要的患者施用抗⑶38抗体，所述抗⑶38抗体与包含SEQIDNO:4的重链可变区（VH和SEQIDNO:5的轻链可变区（VL的抗体竞争结合⑶38,其中所述抗⑶38抗体通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、补体依赖性细胞毒性CDC、细胞凋亡或CD38酶活性体外调节来诱导体外杀伤ALL细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗⑶38抗体结合于人⑶38SEQIDNO:1的SKRNIQFSCKNIYR区（SEQIDN0:2和EKVQTLEAWVIHGG区（SEQIDN0:3。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述抗CD38抗体通过ADCC或CDC来诱导体外杀伤表达⑶38的所述ALL细胞。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗⑶38抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述抗CD38抗体具有岩藻糖含量为约50%、40%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或0%的双分枝聚糖结构。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述抗CD38抗体包含抗体Fc中的氨基酸位置256、290、298、312、356、330、333、334、360、378或430处的置换，其中根据EU索引对残基进行编号。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗⑶38抗体包含分别为SEQIDNO:6、7和8的重链互补决定区HCDR1HCDR1、2HCDR2和3HCDR3序列。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述抗⑶38抗体包含分别为SEQIDNO:9、10和11的轻链互补决定区（LCDR1LCDR1、2LCDR2和3LCDR3序列。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗⑶38抗体包含SEQIDNO:4的所述重链可变区（VH和SEQIDNO:5的所述轻链可变区（VL。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗CD38抗体包含氨基酸序列与SEQIDNO:12的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链，以及氨基酸序列与SEQIDN0:13的氨基酸序列具有95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗⑶38抗体包含SEQIDNO:12的所述重链和SEQIDNO:13的所述轻链。12.根据权利要求1所述的方法，其中所述ALL是B细胞谱系ALL、T细胞谱系ALL、成人ALL或小儿ALL。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述ALL是难治性或复发性ALL。14.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗CD38抗体作为缓解诱导疗法或作为后诱导疗法来施用。15.根据权利要求12所述的方法，其中所述受检者的白细胞计数为至少约IX109个L。16.根据权利要求12所述的方法，其中所述ALL细胞具有费城染色体。17.根据权利要求12所述的方法，其中所述受检者对采用BCR-ABL激酶抑制剂进行的治疗表现出抵抗性，或已获得对这种治疗的抵抗性。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述BCR-ABL激酶抑制剂是伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、博舒替尼、普纳替尼、巴非替尼、塞卡替尼、陶扎色替、达鲁舍替或依鲁替尼。19.根据权利要求1或12所述的方法，其中所述抗CD38抗体与长春新碱联合施用。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述抗CD38抗体和长春新碱同时地、依次地或单独地施用。21.根据权利要求1或12所述的方法，其中所述受检者被进一步用放射疗法进行治疗或已用放射疗法进行过治疗。22.根据权利要求1或12所述的方法，其中所述受检者已接受造血干细胞移植。

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