申请/专利权人：成都大学

申请日：2020-12-14

公开（公告）日：2021-02-12

公开（公告）号：CN112358535A

主分类号：C07K14/415(20060101)

分类号：C07K14/415(20060101);C07K1/36(20060101);C07K1/30(20060101);C07K1/34(20060101);C07K1/16(20060101);A61P31/10(20060101)

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2021.03.05#实质审查的生效;2021.02.12#公开

摘要：本发明提供一种从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，包括以下步骤：将藜麦种子干燥打粉；提取藜麦粗蛋白，加入固体硫酸铵，离心，收集沉淀；适当进行复溶，用生理盐水进行洗脱；收集第二个蛋白峰，直至基线平稳；第二个蛋白峰利用透析袋进行浓缩，浓缩后的蛋白进行浓度和抑制白色念珠菌的检测；培养白色念珠菌至对数生长期，取少量菌液进行离心，收集菌体；利用生理盐水稀释菌体至1麦氏单位；利用牛津杯法进行抑菌活性检测。本发明从藜麦中获得抑菌蛋白，促进藜麦的深加工，利于增加藜麦的经济效益和营养与药用价值。

主权项：1.从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将藜麦种子干燥打粉并用淀粉酶处理除去淀粉；S2.利用混合溶剂提取藜麦粗蛋白；S3.所述的粗蛋白加入固体硫酸铵，使其饱和度达到40％，离心，弃沉淀，保留上清液；上清液中加入固体硫酸铵，使其饱和度达到65％，离心，收集沉淀；S4.处理SephadexG-75填料，装层析柱，内径2cm，长60cm，装好后利用生理盐水进行平衡柱子，备用；将步骤S3收集的沉淀，适当进行复溶，之后适量上样，用生理盐水进行洗脱；弃去第一个出现的蛋白峰，收集第二个蛋白峰，直至基线平稳；S5.将步骤S4收集第二个蛋白峰利用透析袋进行浓缩，浓缩后的蛋白进行浓度和抑制白色念珠菌的检测；S6.利用沙保氏培养基培养白色念珠菌至对数生长期，取少量菌液进行离心，收集菌体；利用生理盐水稀释菌体至1麦氏单位后备用；S7.利用牛津杯法进行进行抑菌活性检测；加入检测蛋白溶液80ul；阳性对照为氟康唑，阴性对照为蛋白提取溶剂。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 成都大学 从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法

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