申请/专利权人：广东先康达生物科技有限公司

申请日：2020-11-18

公开（公告）日：2021-02-23

公开（公告）号：CN112391344A

主分类号：C12N5/0783(20100101)

分类号：C12N5/0783(20100101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.02.11#授权;2021.03.12#实质审查的生效;2021.02.23#公开

摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，具体涉及一种无包被NK细胞体外扩增和培养方法。一种无包被NK细胞体外扩增和培养方法，包括以下步骤：1分离血清和全血细胞；2灭活血清；3获取单个核细胞；4重悬单个核细胞；5诱导NK细胞；6扩增NK细胞。本发明不需要包被，操作简单，经过激活培养基培养和增殖培养基使得NK细胞能够优势生长，NK的流式含量和扩增倍数较高，能够适用于NK细胞临床实验研究及大规模制备。

主权项：1.一种无包被NK细胞体外扩增和培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1分离血清和全血细胞：取50mL血液置于离心管中离心，获得血清和全血细胞；2灭活血清；3获取单个核细胞；4重悬单个核细胞：第0d收集的单个核细胞，分出0.6-10×107数量的细胞，用40mL含有10％血清的激活培养基重悬后，转入培养瓶，置于37℃、5％CO2的培养箱中培养；5诱导NK细胞：第3d补加50mL含有10％血清的激活培养基；第5d补加100mL含有10％血清的激活培养基；6扩增NK细胞：第7d后，每2d补加扩增培养基，并控制细胞浓度在1.0×106mL；培养至第13-20d后将细胞培养液转入离心管，离心50-100g，10-20min，用生理盐水洗涤2-3次，即获得高纯度，高活性的NK细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广东先康达生物科技有限公司 一种无包被NK细胞体外扩增和培养方法

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