申请/专利权人：中国农业大学

申请日：2020-12-11

公开（公告）日：2021-04-02

公开（公告）号：CN112592933A

主分类号：C12N15/84(20060101)

分类号：C12N15/84(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/82(20180101);A01G2/30(20180101);A01G22/05(20180101);A01G22/45(20180101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.11.23#授权;2021.04.23#实质审查的生效;2021.04.02#公开

摘要：本发明属于生物嫁接技术领域，涉及一种砧木改良方法及应用，包括：步骤1：合成传递基因；步骤2：将合成传递基因与功能基因构建到载体上；步骤3：以农杆菌侵染方式转基因的烟草为砧木，野生番茄为接穗，进行异源嫁接；步骤4：取嫁接口及不同位置茎段及花，提取植物总RNA，反转录成cDNA，RT‑PCR检测SlZFP2‑tRNAMet和SlZFP2‑3×CTCT等在异源嫁接体系中的运输情况；步骤5：调查转基因砧木上野生型番茄的分枝及开花情况。方法可应用在果树转基因砧木育种中，通过砧木转基因定点高效改良接穗性状，人为操控砧木基因，影响接穗性状，提高调控效率，缩短育种年限，减少人力物力成本，普遍应用于各类植物。

主权项：1.一种砧木改良方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：合成传递基因tRNAMet、3×CTCT、3×CTCTt；所述传递基因tRNAMet的基因序列如序列表序列1所示；所述传递基因3×CTCT的基因序列如序列表序列2所示；所述传递基因3×CTCTt的基因序列如序列表序列3所示；步骤2：克隆促进分枝及提早开花功能基因SlZFP2，将步骤1所述合成传递基因与功能基因共同构建到pCAMBIA1305载体上，用于后续融合表达；所述功能基因SlZFP2的基因序列如序列表序列4所示；步骤3：采用农杆菌侵染的方式在烟草中转基因过表达pCAMBIA1305-SlZFP2-tRNAMet、pCAMBIA1305-SlZFP2-3×CTCT、pCAMBIA1305-SlZFP2-3×CTCTt，以上述转基因烟草为砧木，野生型番茄为接穗，进行番茄烟草异源嫁接；步骤4：取嫁接口及嫁接口上下不同位置茎段及花，提取植物总RNA，反转录成cDNA，RT-PCR检测SlZFP2-tRNAMet、SlZFP2-3×CTCT、3×CTCTt在番茄烟草异源嫁接体系中的运输情况；步骤5：调查不同转基因砧木上野生型番茄的分枝及开花情况。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种砧木改良方法及应用

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