申请/专利权人：益善生物技术股份有限公司

申请日：2019-10-25

公开（公告）日：2021-04-27

公开（公告）号：CN112708664A

主分类号：C12Q1/6858(20180101)

分类号：C12Q1/6858(20180101);C12N15/11(20060101);C40B50/06(20060101)

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2021.05.14#实质审查的生效;2021.04.27#公开

摘要：本发明提供了一种肺癌驱动基因的多基因突变测序文库构建方法与试剂盒。用于扩增肺癌驱动基因的引物，其扩增产物覆盖EGFR、ALK、ROS1、KRAS、BRAF、PIK3CA，HER2、RET、MET、NRAS、NTRK1‑3、MAP2K1等多个肺癌驱动基因的热点突变位点与基因融合类型，且针对NTRK1‑3基因融合，目前国内未有二代测序文库覆盖该融合类型。本发明试剂盒的引物可以有效捕获肺癌驱动基因的多基因序列，并使用多重PCR法，只需两步PCR扩增与纯化，即可构建得到肺癌驱动基因的多基因测序文库，首次实现了对NTRK1‑3基因融合的扩增及检测。

主权项：1.一种用于扩增肺癌驱动基因的引物，其特征在于，包括通用引物和特异性引物；所述通用引物的核苷酸序列为SEQIDNO.88和SEQIDNO.89；所述特异性引物包括如下至少一个基因的扩增引物：序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的、或如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的、或如SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示的、或如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示的、或如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示的针对EGFR基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.11和SEQIDNO.12所示的、或如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示的、或如SEQIDNO.13和SEQIDNO.14所示的、或如SEQIDNO.15和SEQIDNO.16所示的针对EGFR基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.17和SEQIDNO.18所示的针对BRAF基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.19和SEQIDNO.20所示的、或如SEQIDNO.21和SEQIDNO.22所示的针对PIK3CA基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.23和SEQIDNO.24所示的、或如SEQIDNO.25和SEQIDNO.26所示的、或如SEQIDNO.27和SEQIDNO.28所示的针对NARS基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.29和SEQIDNO.30所示的针对HER2基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.31-SEQIDNO.42任一所示的正向引物和序列如SEQIDNO.43所示的反向引物组成的针对ALK基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.44-SEQIDNO.53任一所示的正向引物和序列如SEQIDNO.54-SEQIDNO.57任一所示的反向引物组成的针对ROS1基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.58和SEQIDNO.59所示的、或如SEQIDNO.60和SEQIDNO.61所示的针对MET基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.62-SEQIDNO.67任一所示的正向引物和序列如SEQIDNO.68所示的反向引物组成的针对RET基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.69和SEQIDNO.70所示的针对MAP2K1基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.71-SEQIDNO.76任一所示的正向引物和序列如SEQIDNO.77-SEQIDNO.79任一所示的反向引物组成的针对NTRK1基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.80和SEQIDNO.81所示的、或如SEQIDNO.82和SEQIDNO.83所示的针对NTRK2基因的扩增引物；序列如SEQIDNO.84和SEQIDNO.85所示的、或如SEQIDNO.86和SEQIDNO.87所示的针对NTRK3基因的扩增引物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 益善生物技术股份有限公司 肺癌驱动基因的多基因突变测序文库构建方法与试剂盒

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