申请/专利权人:中国动物卫生与流行病学中心
申请日:2021-01-27
公开(公告)日:2021-04-27
公开(公告)号:CN112708658A
主分类号:C12Q1/6837(20180101)
分类号:C12Q1/6837(20180101);C12Q1/689(20180101);C12N15/11(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.07.15#授权;2021.05.14#实质审查的生效;2021.04.27#公开
摘要:本发明涉及分子鉴定领域,特别是涉及一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用。本发明利用所述引物组进行多重PCR同时检测9种耐药基因时,9组引物对之间无交叉反应,特异性好、灵敏度高,具有高通量、高速度、低成本、灵敏度高、特异性好、重复性好和线性范围广的优点,在耐药基因的检测应用方面有较大的前景;且在PCR扩增后,不需要对PCR产物进行处理,可直接与微球杂交,节省了时间,简化了工艺。
主权项:1.一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组,其特征在于,所述引物组的上游引物的结构均为F1-F2-F3,其中F1的序列与用于液态芯片结果读取时的配伍微球所连接的序列反向互补,F3的序列与待检耐药基因的特异基因序列互补,F2包括间臂;所述间臂包括多聚dT、寡聚四聚乙二醇或CH2n,其中n≥3;所述引物组的下游引物中包括与待检耐药基因的特异基因序列互补的R序列,并在5′端标记生物素;所述多重耐药基因包括qnrS、aac6’-Ib-cr、gyrA、sul-1、sul-2、sul-3、aadA1、Aph3’-Ⅱ-a和tetB;检测耐药基因qnrS的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.1所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.2所示;检测耐药基因aac6’-Ib-cr的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.3所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.4所示;检测耐药基因gyrA的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.5所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.6所示;检测耐药基因sul-1的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.7所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.8所示;检测耐药基因sul-2的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.9所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.10所示;检测耐药基因sul-3的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.11所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.12所示;检测耐药基因aadA1的引物中上游引物中的F3序列如SEQIDNo.13所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.14所示;检测耐药基因Aph3’-Ⅱ-a的引物中上游引物中的F3序列如SEQIDNo.15所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.16所示;检测耐药基因tetB的引物中,上游引物中的F3序列如SEQIDNo.17所示,下游引物中R序列如SEQIDNo.18所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国动物卫生与流行病学中心 一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用
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