申请/专利权人:浙江卫未生物医药科技有限公司
申请日:2021-01-04
公开(公告)日:2021-05-07
公开(公告)号:CN112753695A
主分类号:A01N1/02(20060101)
分类号:A01N1/02(20060101)
优先权:
专利状态码:失效-发明专利申请公布后的驳回
法律状态:2022.12.02#发明专利申请公布后的驳回;2021.06.08#实质审查的生效;2021.05.07#公开
摘要:本发明提供了一种免疫细胞冻存方法,包括如下步骤:S1.获取免疫细胞;S2.获取人自体血浆;S3.制备细胞冻存液;S4.进行细胞冻存。本发明提供的一种免疫细胞冻存方法,可以有效防止免疫细胞冷冻损伤,并提高免疫细胞的复苏成活率,细胞冻存液中加入的白藜芦醇,能够促进复苏后的免疫细胞的增殖能力,从而提高冻存免疫细胞复苏后的活性,羟乙基淀粉、丙二醇和聚乙二醇可以替代二甲基亚砜的保护作用,降低二甲基亚砜的使用量,保证细胞在接近冰点时,细胞内的水分不会结晶,对细胞的损伤小,细胞冻存液中加入的人自体血浆不会引入外源蛋白,降低了动物病源污染的可能性,避免了外源血清存在的安全隐患。
主权项:1.一种免疫细胞冻存方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.获取免疫细胞S2.获取人自体血浆S3.制备细胞冻存液细胞冻存液包括二甲基亚砜、细胞培养基、人血清白蛋白、糖类、白藜芦醇、羟乙基淀粉、丙二醇、聚乙二醇和人自体血浆,将细胞冻存液的各组成成分混匀后,在2-5℃条件下保温2h,得到细胞冻存液;S4.进行细胞冻存将步骤S3制备的细胞冻存液缓慢加入步骤S1获得的免疫细胞中,制成细胞冻存悬液,然后在5℃条件下保温30min,在-20℃保存2h,在-50℃保存3h后,降温至-80℃,保存5h,之后放入-20℃条件下保存2h,然后放入-80℃条件下保存5-8h,最后转移至液氮罐中保存。
全文数据:
权利要求:
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