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【发明授权】用于序列操纵的系统、方法和优化的指导组合物的工程化_布罗德研究所有限公司;麻省理工学院;哈佛大学校长及研究员协会_201380070567.X 

申请/专利权人:布罗德研究所有限公司;麻省理工学院;哈佛大学校长及研究员协会

申请日:2013-12-12

公开(公告)日:2021-05-07

公开(公告)号:CN105121648B

主分类号:C12N15/63(20060101)

分类号:C12N15/63(20060101)

优先权:["20121212 US 61/736527","20130102 US 61/748427","20130130 US 61/758468","20130225 US 61/769046","20130315 US 61/791409","20130315 US 61/802174","20130328 US 61/806375","20130420 US 61/814263","20130506 US 61/819803","20130528 US 61/828130","20130617 US 61/835931","20130617 US 61/836127"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.05.07#授权;2016.01.13#实质审查的生效;2015.12.02#公开

摘要:本发明提供了用于操纵序列和或靶序列的活性的系统、方法、和组合物。提供了多种载体和载体系统、以及用于设计和使用此类载体的方法,其中一些载体和载体系统编码CRISPR复合物的一个或多个组分。还提供了指导CRISPR复合物在真核细胞中形成的方法以及用于通过利用CRISPR‑Cas系统引入精确突变来筛选特异性细胞的方法。

主权项:1.一种非天然存在的或工程化的组合物,该组合物包含:A一种成簇的规律间隔短回文重复序列CRISPR-CRISPR相关CasCRISPR-Cas系统嵌合RNAchiRNA,其中该chiRNA包含a一种长度为10-30个核苷酸的指导序列,该指导序列能够杂交到真核细胞中的靶序列上,其中在所述靶序列与所述指导序列的后12个核苷酸之间没有错配,b一种tracr配对序列,和c一种tracrRNA序列其中a、b和c以5’到3’方向排列,和B包含两个或更多个核定位序列的II型Cas9蛋白,或者编码所述Cas9蛋白的多核苷酸,其中该tracr配对序列杂交到该tracrRNA序列上,并且该指导序列引导CRISPR复合物与该靶序列的序列特异性结合,其中该CRISPR复合物包含与1杂交到该靶序列上的指导序列、和2杂交到该tracrRNA序列上的tracr配对序列复合的所述II型Cas9蛋白质,其中所述tracrRNA序列长度为50或更多个核苷酸。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 布罗德研究所有限公司;麻省理工学院;哈佛大学校长及研究员协会 用于序列操纵的系统、方法和优化的指导组合物的工程化

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