申请/专利权人：中国药科大学;万邦德制药集团有限公司

申请日：2020-12-28

公开（公告）日：2021-06-04

公开（公告）号：CN112903887A

主分类号：G01N30/88(20060101)

分类号：G01N30/88(20060101);G01N30/86(20060101);G01N30/14(20060101);G01N30/74(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.06.06#授权;2021.06.22#实质审查的生效;2021.06.04#公开

摘要：本发明涉及中药特征指纹图谱分析方法，具体涉及银杏叶滴丸HPLC‑VWD‑ELSD特征图谱的建立方法，及其所得到的特征图谱。本发明公开了一种银杏叶滴丸HPLC‑VWD‑ELSD特征图谱的建立方法，所述建立方法包括供试品溶液的制备、特征图谱测定条件的建立及测定，上述特征图谱通过对照品共指认了11个特征共有峰。本发明使用超滤管进行样品前处理，能够基本除去辅料聚乙二醇4000PEG4000，减少了其在ELSD色谱图中对内酯类成分响应的影响。

主权项：1.一种银杏叶滴丸HPLC-VWD-ELSD特征图谱的建立方法，包括如下步骤：1供试品溶液的制备：超滤膜的预处理：取400μL的50％甲醇于密理博超滤管中，15000r，离心20min，弃去滤出液，再将内管反置于外管中，1000r，离心1min，除净内管内液体；取银杏叶滴丸，研细，取粉末0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20mL，超声处理60min，取出，冷却至室温，摇匀，15000r，离心20min，取400μL的上清液置于预处理过的超滤管中，15000r，离心20min，取滤出液收集管中的溶液，即得；2对照品溶液的制备：取对照品白果内酯、银杏内酯J、银杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B、芦丁、槲皮素-3-O-葡萄糖基1→2鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、槲皮素-3-O-2"-6"-p-香豆酰基-葡萄糖基-鼠李糖苷及山奈酚-3-O-2"-6"-p-香豆酰基-葡萄糖基-鼠李糖苷适量，加50％甲醇制成适当浓度的母液，经适当稀释制成最终浓度介于10μgmL～100μgmL的混合对照品溶液；3高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用法测定：色谱柱：AgilentInfinityLabPoroshell120EC-C18；流动相：以0.05％甲酸水溶液为流动相A，以乙腈-甲醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱，流速：0.4mLmin，柱温：35℃，检测波长：360nm；蒸发光散射检测器：N2流速：1.2SLM，蒸发管温度：80℃；雾化器温度：80℃； 4特征图谱的建立：将20批银杏叶滴丸分别按照上述步骤1制成供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，按照上述步骤3的色谱条件进行检测，分别记录色谱图，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版”软件进行分析，得到银杏叶滴丸的VWD-ELSD标准指纹图谱R，确定了11个共有峰，内酯类以峰1为参照峰，黄酮苷类以峰4为参照峰。

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