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【发明授权】测序免疫组库的方法_血统生物科学公司_201480016198.0 

申请/专利权人:血统生物科学公司

申请日:2014-03-14

公开(公告)日:2021-06-08

公开(公告)号:CN105189748B

主分类号:C12N15/10(20060101)

分类号:C12N15/10(20060101);C12Q1/6874(20180101);C12Q1/6881(20180101)

优先权:["20130315 US 61/801,785","20130328 US 61/806,143"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.06.08#授权;2018.05.11#著录事项变更;2016.04.06#实质审查的生效;2015.12.23#公开

摘要:本发明提供一种用于在含有多个不同的细胞群的生物样品中免疫组库的检测和定量的非侵入性技术。方法使用测序技术来执行以检测和列举异种生物样品中的免疫组库。

主权项:1.一种确定在受试者中的免疫组库的多样性的方法,其包括:a.通过使用免疫球蛋白链或TCR链特异性引物以及逆转录酶,对从受试者的包含多种细胞类型的生物样品获得的mRNA进行逆转录以产生包含3'端同聚尾巴的免疫球蛋白链或TCR链cDNA;b.通过使用逆转录酶以及包含与所述同聚尾巴互补的3’端序列和包含通用序列以及无规分子标签的5’旁侧序列的寡聚核苷酸来添加无规分子标签和通用序列到所述免疫球蛋白链或TCR链cDNA的3'端以形成延伸的cDNA,其中所述无规分子标签是至少9聚体的低聚物;c.通过使用一种或多种免疫球蛋白链或TCR链特异性引物和包含测序平台特定的旁侧序列的通用序列特异性引物来扩增所述延伸的cDNA,以产生多个分子标记的免疫球蛋白链或TCR链核酸;d.测序所述分子标记的免疫球蛋白链或TCR链核酸,以产生多个测序阅读;e.分组具有相同分子标记的测序阅读并聚簇在相同组内的序列;f.针对每个簇构建共有序列以产生共有序列的集合,其中所述共有序列的集合用于确定所述免疫组库的多样性。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 血统生物科学公司 测序免疫组库的方法

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