申请/专利权人:广州华银健康医疗集团股份有限公司
申请日:2021-06-09
公开(公告)日:2021-07-20
公开(公告)号:CN113136419A
主分类号:C12Q1/6858(20180101)
分类号:C12Q1/6858(20180101)
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2021.08.06#实质审查的生效;2021.07.20#公开
摘要:本发明公开了融合基因突变的荧光定量PCR检测方法,包括如下步骤:1融合基因位点查找;2融合突变序列兼并分析;3扩增引物的设计与合成;4反应体系的扩增与验证。本发明属于生物检测技术领域,本发明提供的融合基因突变的荧光定量PCR检测方法,可以针对不同融合基因设计相应的引物,并实现其融合基因突变的检测,提高检测效率和检测结果的准确性。
主权项:1.融合基因突变的荧光定量PCR检测方法,其特征在于:包括如下步骤:1融合基因位点查找:查找融合基因信息,查找其外显子断裂点,并根据外显子断裂点查找其断裂点到终止点的转录本序列;2融合突变序列兼并分析:将步骤1得到的两段转录本序列合并,作为完整的融合结果序列;3扩增引物的设计与合成:以步骤2得到的融合结果序列为序列模板,进行上下游扩增引物的序列设计,合成并纯化;4反应体系的扩增与验证:包括如下步骤:4.1准备阴性和阳性RNA样本,将阳性RNA样本按照倍数比例稀释为低突变频率阳性RNA样本,稀释过程使用阴性样本作为稀释剂;4.2RNA样本逆转录,使用试剂盒进行RNA逆转录成cDNA;4.3反应体系配制和PCR扩增:配制含所述上下游扩增引物的反应体系,进行PCR扩增,每个循环结束后收集荧光信号;4.4结果判断:根据扩增溶解曲线读取Tm值,进行检测结果的判断。
全文数据:
权利要求:
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