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【发明公布】一种简单高效的薄壳山核桃农杆菌转化体系的构建及优化_浙江农林大学_202110596339.2 

申请/专利权人:浙江农林大学

申请日:2021-05-30

公开(公告)日:2021-07-23

公开(公告)号:CN113141965A

主分类号:A01G17/00(20060101)

分类号:A01G17/00(20060101);A01G7/06(20060101)

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2022.07.29#授权;2021.08.10#实质审查的生效;2021.07.23#公开

摘要:本发明公开一种简单高效的薄壳山核桃农杆菌转化体系的构建及优化。将发根农杆菌在TY固体培养基上划线培养,获得单菌落,挑取单菌落于TY液体培养基进行培养,得到活化后的发根农杆菌溶液;发根农杆菌侵染薄壳山核桃幼苗接近种子部分的胚轴或者茎部;其中薄壳山核桃幼苗接近种子部分的胚轴或者茎部位置为距幼苗根部的胚轴或茎1~5cm处;共培养、生根培养,待胚轴或茎部侵染处生长出薄壳山核桃的转基因毛状根。以幼苗作为繁殖材料进行侵染,无需无菌环境培育无菌苗进行继代操作等一系列组培技术。

主权项:1.一种发根农杆菌介导幼苗获得转基因根系的构建方法,其特征在于包括以下步骤:步骤1、准备薄壳山核桃幼苗;步骤2、制备携带35S::GFP的发根农杆菌;步骤3、发根农杆菌活化:将发根农杆菌在TY固体培养基上划线培养,获得单菌落,挑取单菌落于TY液体培养基进行培养,得到活化后的发根农杆菌溶液;步骤4、发根农杆菌侵染薄壳山核桃幼苗接近种子部分的胚轴或者茎部;其中薄壳山核桃幼苗接近种子部分的胚轴或者茎部位置为距幼苗根部的胚轴或茎1~5cm处;步骤5、共培养;步骤6、生根培养,待胚轴或茎部侵染处生长出薄壳山核桃的转基因毛状根。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江农林大学 一种简单高效的薄壳山核桃农杆菌转化体系的构建及优化

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