申请/专利权人:北京中因科技有限公司
申请日:2021-05-31
公开(公告)日:2021-08-27
公开(公告)号:CN113308492A
主分类号:C12N15/85(20060101)
分类号:C12N15/85(20060101);C12N7/00(20060101);C12Q1/70(20060101);C12Q1/6851(20180101);C12R1/93(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.03.21#授权;2021.09.14#实质审查的生效;2021.08.27#公开
摘要:本发明提供了一种不依赖于辅助病毒的rcAAV的细胞学检测方法,所述方法不使用辅助病毒,对环境和检测人员安全友好,并且具有极高的检测灵敏度和准确度,具有广阔的应用前景。
主权项:1.一种不依赖于辅助病毒的rcAAV的细胞学检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤,A.细胞的转染和感染:第1轮感染使用pHelper质粒和pRC8质粒转染细胞,转染后感染待测重组AAV病毒,感染2-3天后收集培养基上清,将所述上清与培养基混合后加入第2轮待感染细胞;第2-N轮感染使用pHelper质粒和pRC8质粒转染细胞,转染后感染混合有培养基的上一轮细胞培养基上清,感染2-3天后再次收集培养基上清,将所述上清与培养基混合后加入下一轮待感染细胞;B.用DNaseI处理待测步骤A最终获得的细胞培养基上清;C.利用taqmanqPCR技术检测感染的细胞培养基上清中的rcAAV。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 北京中因科技有限公司 一种用于复制性AAV的检测方法
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