申请/专利权人：沃特世科技公司

申请日：2013-05-15

公开（公告）日：2021-09-21

公开（公告）号：CN107754776B

主分类号：B01J20/30(20060101)

分类号：B01J20/30(20060101);B01D15/20(20060101);B01D15/26(20060101);B01D15/40(20060101)

优先权：["20120515 US 61/647303"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.09.21#授权;2018.03.30#实质审查的生效;2018.03.06#公开

摘要：本发明涉及色谱材料。在一个方面中，本发明提供的用于多种不同色谱模式的色谱固定相材料由式1表示：[X]（W）a（Q）b（T）c（式1）。X可以是具有包含二氧化硅芯材料、金属氧化物芯材料、无机‑有机杂化材料或一组其嵌段共聚物的表面的高纯度色谱芯组合物。W可以在X表面上不存在和或可以包含氢和或可以包含羟基。Q可以是功能基团，其在色谱的条件下使用低的水浓度随时间最小化保留变化（漂移）。T可以包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团，其与分析物色谱地相互作用。此外，b和c可以是正数，具有0.05≤（bc）≤100的比例，并且a≥0。

主权项：1.制备色谱固定相材料的方法，所述色谱固定相材料只有二醇基团存在，所述方法包括：使芯表面与具有侧链反应基团的硅烷偶联剂反应；使包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应；并且中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，由此产生只有二醇基团存在的色谱固定相材料。

全文数据：色谱材料[0001]相关申请的交叉引用本申请是国际申请号为PCTUS2013041221、国际申请日为2013年5月15日、发明名称为“色谱材料”的发明专利申请的分案申请，原申请进入中国国家阶段获得的国家申请号为201380037761.8。本申请要求享有于2012年5月15日提交的美国临时申请号61647,303的优先权，其内容以其整体通过引用并入本文。发明领域[0002]本发明通常地涉及色谱材料。本发明更特别地，在多个实施方案中，涉及用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、亲水相互作用液相色谱、亚临界流体色谱、高压液相色谱和溶剂化气相色谱的色谱材料，所述材料减轻或避免保留漂移或改变同时展示有用的总体保留，以及相应的仪器、试剂盒、生产方法和使用方法。[0003]发明背景用于流体或液相色谱的填充材料可以通常地分为两类:有机材料（例如，聚二乙烯基苯和无机材料例如，二氧化硅）。很多有机材料对强碱流动相和强酸流动相是化学稳定的，允许对流动相组成和PH灵活选择。然而，有机色谱材料可以导致柱的低效率，特别地对低分子量的分析物。很多有机色谱材料不但缺少典型的色谱二氧化硅的机械强度，而且当流动相组成改变时还会收缩和膨胀。[0004]二氧化硅广泛地用于高效液相色谱（HPLO、超高效液相色谱UHPLC和超临界流体色谱SFC。一些应用使用具有例如十八烷基C18、辛烷基C8、苯基、氨基、氰基等的有机官能团的表面衍生的二氧化硅。如用于HPLC的固定相，这些填充材料可以导致具有高效率并且不会显示收缩或膨胀迹象的柱。[0005]杂化材料可以提供对基于二氧化硅的填充材料经历的某些色谱问题的解决方案。杂化材料可以提供包含改善的高和低pH稳定性、机械稳定性、在pH7使用时的峰形、效率、保持力和期望的色谱选择性的改善。[0006]然而，对于在其它应用中常规杂化材料和二氧化硅材料可存在潜在的问题。一个问题是当在低PH使用时，对于碱的弱峰形，这在低pH使用时对载荷能力和峰容量有负面影响。另一个问题是在柱暴露于反复改变的流动相pH例如从pHIO到pH3反复转换后，酸性和碱性分析物的保留时间的改变称为“漂移”）。[0007]另一个问题是例如在具有少量水例如，小于5%、小于1%的色谱模式中的保留漂移或改变。例如，在标准SFC条件下观察到对键合和不键合的基于二氧化硅和基于有机-无机杂化（例如，可获自WatersTechnologiesCorporation，MilfordMA的BEHTechnologyTM材料）的色谱相的保留漂移或改变。其它SFC固定相也可以展现出相似的保留漂移或变化。[0008]发明概述在多个方面和实施方案中，本发明提供了用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、亲水相互作用液相色谱、亚临界流体色谱、高压液相色谱和溶剂化气相色谱的色谱材料，其减轻或避免保留漂移或改变同时展示有用的总体保留，以及相应的仪器、试剂盒、生产方法和使用方法。[0009]本发明有利地减轻或避免保留漂移或改变同时展示有用的总体保留。例如，在SFC中，保留漂移或改变可以（在多种其它理论中）归因于在用于SFC的标准C02Me0H流动相和或通过其它醇共溶剂）下，在颗粒上溶剂可及的硅醇的烷氧基化。这是一个问题，因为当柱老化时使用者观察到在其SFC系统上获得的色谱的改变例如，保留时间），并且当新的非烷氧基化的柱安装于所述系统上时，再次观察到所述色谱的改变。[0010]在多个方面和实施方案中，本发明通过选择和或修饰色谱材料，提供对这些保留漂移或改变和相关问题例如，保留、峰形等）的多个解决方法。例如，本发明包括专门的色谱芯表面的官能化例如，用特定的官能团和其组合物），其主要防止分析物和色谱芯表面的色谱相互作用，这维持了期望的分析物和色谱材料之间的相互作用。[0011]在其它多个方面和实施方案中，本发明涉及利用赋予二氧化硅的、聚合的或杂化的材料包括但不限于颗粒的、整体料的monoliths、球面的、非球面的、粒状的、完全多孔的和表面多孔的）的表面高密度反应性表面修饰基团的化学过程。在与选择性诱导配体偶联并水解未反应的表面修饰基团后，实现多组分表面。本发明的产物显著减少了与基础颗粒表面的二次相互作用例如，不期望的相互作用，非特异性的吸附作用）。分析物与材料表面的二次相互作用可以因为硅醇、疏水侧基和聚合物或杂化主链发生。最初的包覆可以使用其本身作为色谱相，通过中和反应部分例如，水解作用或没有进一步的修饰（即，胺或羧酸酯相），或表面可以通过一个或更多个选择性诱导配体共价结合进一步修饰。[0012]在多个方面和实施方案中，本发明提供了众多优点。例如，本发明可以提供能够以优秀的保留、峰容量和峰形解析所有类型的分析物（例如，酸性、碱性和中性）的单一固定相。在多个实例中，本发明可以有效地对目的分析物掩蔽硅醇，产生可预期的并且稳定的色谱分离。在多个实例中，本发明可以有效地消除由于不期望的支持表面与分析物的相互作用导致的保留漂移或改变。本发明可以特别有效地在二氧化硅或二氧化硅杂化材料上掩蔽硅醇。在多个实例中，本发明可以改善所有类型分析物但尤其对碱的峰容量和拖尾。在多个实例中，本发明可以避免孔堵塞，不论是否与低聚的硅氧烷键合例如，与多孔二氧化硅材料的常规的聚合的涂覆相比，所述涂覆可以导致孔的堵塞，显著减少材料可用的表面积并且导致不均一的表面一一尽管在本发明促进了硅烷低聚化，但没有孔堵塞或表面积减少的证据）。[0013]本发明包含多个额外的优点，包括但不限于，通过选择设计化学修饰的选择设计选择性的能力。[0014]在一个方面中，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱的色谱固定相材料，由式I:[X]WaQbTc式1表示。X可以是具有包含二氧化硅芯材料、金属氧化物芯材料、无机-有机杂化材料或一组其嵌段共聚物的高纯度色谱芯组合物。W可以在X表面上不存在和或可以包含氢和或可以包含羟基。Q可以是在使用低的水浓度的色谱条件下，最小化随时间的保留变化漂移的官能团。T可以包括与分析物进行色谱地相互作用的一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团。此外，b和C可以是正数，具有’的比例，并且。[0015]在另一个方面中，本发明提供了由式I:DGWaQbTc式1表示的色谱固相材料。X可以是包括基于二氧化硅、基于金属氧化物或基于无机-有机杂化物的芯表面的色谱芯材料。W可以在X表面上不存在和或可以包括氢和或可以包括羟基。Q可以包括主要防止分析物与X和W之间发生色谱相互作用的一个或更多个官能团，使得Q的第一部分结合至X并且Q的第二部分是聚合的。T可以包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团，与分析物进行色谱地相互作用，使得T的第三部分结合至Q，T的第四部分结合至X，并且T的第五部分是聚合的。此外，b和c可以是正数，具有I的比例，并且[0016]在一个或更多个实施方案中，Q由以下表示：。在一个或更多个实施方案中，η1是0-30的整数并且η2是0-30的整数。R1，R2，R3和R4的每次出现可以独立地表示氢、氟、甲基、乙基、正丁基、叔丁基、异丙基、低碳烷基、保护的或脱保护的醇、两性离子或Z基团。在一些实施方案中，Z基团包括具有式B1xR5yRi5zSi-的表面连接基团，其中X是1-3的整数，y是0-2的整数，z是0-2的整数，并且x+y+z=3。妒和R6的每次出现可以独立地表示甲基、乙基、正丁基、异丁基、叔丁基、异丙基、叔己基、取代或未取代的芳基、环烷基、支链烷基、低碳烷基、保护的或脱保护的醇或两性离子基团，并且B1可以表示硅氧烷键。在一些实施方案中，Z基团包括通过直接的碳-碳键形成或通过杂环原子、酯、醚、硫醚、胺、酰胺、酰亚胺、脲、碳酸酯、氨基甲酸酯（carbamate、杂环、三卩坐或聚氨酯urethane连接与表面有机官能杂化基团的连接。在一些实施方案中，基团Z包含吸附的表面基团，所述基团不共价结合于材料表面。Y可以是嵌入的极性官能团。在一些实施方案中，A表示亲水的末端基团。在一些实施方案中，A表示氢、氟、甲基、乙基、正丁基、叔丁基、异丙基、低碳烷基或基团Z。在一些实施方案中，A表示可官能化的基团。[0017]在一个或更多个实施方案中，T由以下中的一个表示：，或其组合。在一些实施方案中，m是0-30的整数，m’是0-20的整数，m”是0-3的整数。在一些实施方案中，Z表示具有式（B1xR5yR6zSi-的表面连接基团，其中X是1-3的整数，y是0-2的整数，z是0-2的整数，并且x+y+z=3。妒和R6的每次出现可以独立地表示甲基、乙基、正丁基、异丁基、叔丁基、异丙基、叔己基、取代的或未取代的芳基、环烷基、支链烷基、低碳烷基、保护的或脱保护的醇或两性离子基团。B1可以表示硅氧烷键;其中R7’R7’和R7’’各自表示氢、甲基、乙基、正丁基、异丁基、叔丁基、异丙基、叔己基、苯基、支链的烧基或低碳烧基。在一些实施方案中，Z表示通过直接的碳-碳键形成或通过杂环原子、酯、醚、硫醚、胺、酰胺、酰亚胺、脲、碳酸酯、氨基甲酸酯、杂环、三唑或聚氨酯连接与表面有机官能杂化基团连接。在一些实施方案中，Z表示吸附的表面基团，其不共价连接到材料表面。[0018]在一些实施方案中，b和c是正数，具有的比例，并且0。在一些实施方案中，Q和T是不同的，而在其它实施方案中，Q和T是相同的。Q可以包括两个或更多个不同的部分，并且T可以包括两个或更多个不同的部分。在一些实施方案中，第一、第二、第三、第四和第五部分各自独立地为约0-100、1-99、5-95、10-90、20-80、30-70、40-60、0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、或95%。在一个或更多个的实施方案中，Q是非极性的。在一些实施方案中，Q包含硼酸或硝基官能团。在一些实施方案中，Q由以下中的一个表示：，其中Z可以包括具有式B1xR5yR6zSi-的表面连接基团，其中X是1-3的整数，y是0-2的整数，z是0-2的整数，并且x+y+z=3。妒和R6每次出现可以独立地表示甲基、乙基、正丁基、异丁基、叔丁基、异丙基、叔己基、取代的或未取代的芳基、环烷基、支链烷基、低碳烷基、保护的或脱保护的醇或两性离子基团，并且B1可以表示硅氧烷键。[0019]在另一个实施方案中，Z是通过直接的碳-碳键形成或通过杂环原子、酯、醚、硫醚、胺、酰胺、酰亚胺、脲、碳酸酯、氨基甲酸酯、杂环、三唑或聚氨酯连接对表面有机官能杂化基团连接。在还另一个实施方案中，Z是吸附的表面基团，其不共价连接到材料表面。[0020]在一些实施方案中，T由以下中的一个表不：[0021]在一些实施方案中，Z包含具有式B1xR5yR6zSi-的表面连接基团，其中X是1-3的整数，y是0-2的整数，z是0-2的整数，并且x+y+z=3。妒和R6每次出现可以独立地表示甲基、乙基、正丁基、异丁基、叔丁基、异丙基、叔己基、取代的或未取代的芳基、环烷基、支链烧基、低碳烧基、保护的或脱保护的醇或两性尚子基团，并且B1可以表不娃氧烧键。在一些实施方案中，Z是通过直接的碳-碳键形成或通过杂环原子、酯、醚、硫醚、胺、酰胺、酰亚胺、脲、碳酸酯、氨基甲酸酯、杂环、三唑或聚氨酯连接对表面有机官能杂化基团的连接。在一些实施方案中，Z是吸附的表面基团，其不共价连接到材料表面。[0022]在任何上述方面的一个或更多个实施方案中，X是具有通过在色谱条件下的色谱流动相进行烷氧基化的芯表面的高纯度的色谱材料。X可以是具有通过在色谱条件下的色谱流动相进行烷氧基化的芯表面的色谱材料。在一些实施方案中，包含官能团的Q是二醇。包含官能团的T可以是胺、醚、硫醚或其组合。T可以包括适合于手性分离的手性官能团，Q可以包括适合于手性分离的手性官能团，或T和Q两者均可以包括适合于手性分离的手性官能团。[0023]在上述方面的一个或更多个实施方案中，bc的比例是约0.05-75、0.05-50、0.1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80或90。在一些实施方案中，X的表面不包含二氧化硅，并且b=〇或c=〇。在一些实施方案中，组合的表面覆盖范围大于约0·8、0·9、1·0、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2·0、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3·0、3·1、3·2、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、5、6、7、或8pmolm2〇[0024]在上述方面的一些实施方案中，色谱固相显示的保留漂移或改变5%超过30天、4%超过30天、3%超过30天、2%超过30天、1%超过30天、5%超过10天、4%超过10天、3%超过10天、2%超过10天、1%超过10天、5%超过3天、4%超过3天、3%超过3天、2%超过3天、1%超过3天、5%超过30次运行、4%超过30次运行、3%超过30次运行、2%超过30次运行、1%超过30次运行、5%超过10次运行、4%超过10次运行、3%超过10次运行、2%超过10次运行、：1%超过10次运行、5%超过3次运行、4%超过3次运行、3%超过3次运行、2%超过3次运行或1%超过3次运行。[0025]在一些实施方案中，芯材料主要由二氧化硅材料组成。任选地，芯材料主要由有机-无机杂化材料或表面多孔材料组成。在一个或更多个实施方案中，芯材料主要由具有杂化表层的无机材料、具有无机表层的杂化材料、包围的杂化层或具有不同杂化表层的杂化材料组成。固定相材料可以任选地以多颗粒、整体料或表面多孔材料的形式。在一些实施方案中，固定相材料没有色谱增强作用的孔几何结构，而在另一些实施方案中，固定相材料具有色谱增强作用的孔几何结构。固定相材料可以以球面材料、非球面材料的形式例如，包含环形线圈、多面体）。在某些实施方案中，固定相材料具有高度球面的芯形态、杆状的芯形态、弯棒形的芯形态、环形的芯形态或哑铃型的芯形态。在某些实施方案中，固定相材料具有高度球面的、杆状的、弯棒形的、环形的或哑铃型的形态的混合。[0026]在一些实施方案中，固定相材料具有约25至1100m2g、约150至750m2g或约300至500m2g的表面积。在一些实施方案中，固定相材料具有约0.2至2.0cm3g，或约0.7至1.5cm3g的孔容积。在一些实施方案中，固定相材料具有小于约105m2g，小于约80m2g或小于约50m2g的微孔表面积。固定相材料可以具有约20至1500A，约50至1000A，约60至750A，或约65至200A的平均孔径。在一些实施方案中，多个颗粒具有约0.2至100微米之间的，约0.5至10微米之间的，或约1.5至5微米之间的尺寸。[0027]在一个或更多个实施方案中，X包含二氧化硅芯，c=0,并且Q具有多2.52.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.5、4.0、4.5、或511111〇11112的组合的表面覆盖范围；或乂包含非二氧化硅芯或二氧化硅-有机杂化芯，c=0，并且Q具有0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1·0、1·1、1·2、1·3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5口111〇11112的组合的表面覆盖范围；或b0，c0,并且Q具有0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1·0、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1.8、1.9、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5口111〇11112的组合的表面覆盖范围。[0028]色谱固定相可以适用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱。[0029]在还另一方面中，本发明提供的色谱固定相材料由式1表示：[0030]X可以是在正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱条件下的经历保留漂移或改变的色谱芯材料。W可以在X表面上不存在和或可以包括氢和或可以包括羟基。Q可以包括主要防止分析物和X和W色谱地相互作用的官能团。T可以包括与分析物色谱地相互作用的官能团，并且通过Q与X连接。b和c可以是正数，例如0.05彡（bc彡100,并且a0〇[0031]在一些实施方案中，色谱固定相材料适用于正相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱或其组合。[0032]在一些实施方案中，色谱固定相包括径向调整的孔、非径向调整的孔、有序的孔、无序的孔、单分散的孔、非单分散的孔、光滑表面、粗糙表面或其组合。在一个或更多个实施方案中，T具有一个可电离基团，T具有多于一个可电离基团，T具有两个或更多个具有相同PKa的可电离基团，或T具有两个或更多个具有不同pKa的可电离基团。[0033]在还另一个方面中，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱的柱、毛细管柱、微流体装置或仪器。所述柱、毛细管柱、微流体装置或仪器包括界定具有入口和出口的室的具有至少一个壁的壳体，和其中配置的包含任何本公开的色谱材料的固定相。所述壳体和固定相可以适用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。[0034]在还另一个方面中，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱的试剂盒。试剂盒可以包括具有至少一个壁的壳体，界定具有入口和出口的室，和根据本公开中任何配置的色谱材料的固定相。所述壳体和固定相可以适用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。所述试剂盒可以进一步包含说明书，用于用壳体和固定相实施正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。[0035]在还另一方面，本公开提供用于制备包括本公开中任何材料的固定相的方法。所述方法包括芯表面与具有侧链反应基团的硅烷偶联剂反应。所述方法进一步包括使包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应。所述方法进一步包括中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，由此产生根据本公开的固定相。[0036]在还另一个方面，本公开提供制备根据本公开的任何材料的固定相的方法。所述方法包括使具有侧链反应基团的硅烷偶联剂低聚化。所述方法进一步包括使芯表面与低聚化的硅烷试剂反应。所述方法进一步包括使包含一个或更多个亲水的、极性的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应。所述方法进一步包含中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，由此产生根据本公开的固定相。[0037]在一个或更多个实施方案中，Q衍生自具有一个或以下结构的试剂：[0038]在一些实施方案中，T衍生自一个或以下结构的试剂：ί[0039]在还另一方面中，本发明提供用于在正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱中减轻或防止保留漂移或改变的方法。本发明包括使用包含根据本公开的色谱固定相的色谱装置色谱地分离样本，由此减轻或防止保留漂移或改变。[0040]在一个或更多个实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变包括保留漂移或改变5%超过30天、4%超过30天、3%超过30天、2%超过30天、1%超过30天、5%超过10天、4%超过10天、3%超过10天、2%超过10天、1%超过10天、5%超过3天、4%超过3天、3%超过3天、2%超过3天、1%超过3天、5%超过30次运行、4%超过30次运行、3%超过30次运行、2%超过30次运行、1%超过30次运行、5%超过10次运行、4%超过10次运行、3%超过10次运行、2%超过10次运行、1%超过10次运行、5%超过3次运行、：4%超过3次运行、3%超过3次运行、2%超过3次运行或1%超过3次运行。在一些实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变包括基本上消除色谱材料的烷氧基化和或脱烷氧基化对保留的影响。[0041]在一些实施方案中，T包含以下结构中的一个：[0042]在一些实施方案中，Y包含以下结构中的一个：[0043]T可以衍生自以下表示的试剂：，或其组合，其中m是0-30的整数，m’是0-30的整数，m”是0-3的整数。Z可以表示化学反应基团，包括：、胺、烷基胺、二烷基胺、异氰酸酯、酰基氯、三氟甲磺酸酯、异氰酸酯、硫氰酸酯、咪唑碳酸酯、NHS酯、羧酸、酯、环氧化物、炔烃、烯烃、叠氮、-Br、-ClS-IJ可以是嵌入的极性官能团。R1的每次出现可以独立地表示在硅上的化学反应基团，包括但不限于-H、-OH、-OR6、二烷基胺、三氟甲磺酸酯、Br、Cl、I、乙烯基、烯烃或-CH2m，Q;Q的每次出现可以是-〇H、-〇R6、胺、烷基胺、二烷基胺、异氰酸酯、酰基氯、三氟甲磺酸酯、异氰酸酯、硫氰酸酯、咪唑碳酸酯、NHS酯、羧酸、酯、环氧化物、炔烃、烯烃、叠氮化物、-Br、-ClS-Kp可以是1-3的整数。R1’的每次出现可以独立地表示FX1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、C3-C18环烷基X1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、C5-C18芳氧基、或C1-C18杂芳基、氟代烷基或氟代芳基。R2和R3的每次出现可以独立地表示氢、C1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、C3-C18环烷基X1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、C5-C18芳氧基SC1-C18杂芳基、-Z或具有式-SiR’）bR”a或-：0?’儿矿3的基团。变量和13可以各自表示0至3的整数，条件是a+b=〗。!?’可以表示_C6的直链的、环链的或支链的烷基基团。R”可以是选自烷基、烯基、炔基、芳基、氰基、氨基、二醇、硝基、酯、阳离子或阴离子交换基团、包含嵌入极性官能团和手性部分的烷基或芳基的官能化的基团。R4可以表示氢，C1-C18、C2-C18烯基、C2-Cis炔基、C3-C18环烷基X1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、取代的芳基X5-C18的芳氧基或C1-Cis杂芳基。R5可以表示氢、C1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、C3-C18环烷基、C1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、取代的芳基、C5-C18的芳氧基或C1-C18杂芳基。R6的每次出现可以独立地表不Cl-C18烧基、C2_C18稀基、C2_C18块基、C3_C18环烧基、Cl-C18杂环烧基、C5-C18芳基、C5-C18的芳氧基或Ci-C18杂芳基。Het可以表示至少一个氮原子的单环的或双环的杂环或杂芳基系统。B可以表示酸性的可电离的改性剂。[0044]本发明通过附图和下文实例进一步详细描述，其仅用于说明目的并且是非限制性的。[0045]附图简述在随后的附图和详细说明的背景下可以更容易地理解本发明。本领域普通技术人员会理解以下的附图不是必须按比例绘制，而是将重点放置在说明本发明的创造性概念。[0046]图1显示环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷GPTMS和2-氨甲基吡啶的结构。[0047]图2显示未修饰的色谱表面与GPTMS之间的反应的图解。[0048]图3显示修饰的色谱表面与2-氨甲基吡啶之间的反应的图解。[0049]图4显示色谱表面与修饰试剂GPTMS和2-氨甲基吡啶的交联的图解。[0050]图5显示制备本公开的色谱固定相的两个潜在合成途径的图解。[0051]图6显示使用未修饰的BEH颗粒作为固定相，和使用依据说明书的修饰的BEH颗粒作为固定相洗脱的分析物的保留百分比的图形。[0052]发明详述在多个方面和实施方案中，本发明提供用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、亲水相互作用液相色谱、亚临界流体液相色谱、高压液相色谱和溶剂化气相色谱的色谱材料，其减轻或避免保留漂移或改变同时展示有用的总体保留，和相应的装置、试剂盒、生产方法和使用方法。[0053]本发明有利地减轻或避免保留漂移或改变同时展示有用的总体保留。例如，在SFC中，保留漂移或改变可以（在多种其它理论中）归因于在用于SFC的标准C02Me0H流动相和或通过其它醇共溶剂）下，在颗粒上溶剂可及的硅醇的烷氧基化。这是一个问题，因为当柱老化时使用者观察到在其SFC系统上获得的色谱的改变例如，保留时间），并且当新的、非烷氧基化的柱安装于所述系统上时，再次观察到所述色谱的改变。[0054]在多个方面和实施方案中，本发明通过选择性的修饰色谱材料提供多个对这样的保留漂移或改变和相关问题的解决方案例如，保留、峰形等）。[0055]定义在多个方面和实施方案中，本发明提供用于减轻或防止保留漂移或改变。“保留漂移”或“保留改变”可以包括在色谱运行或实验期间的洗脱时间中不期望的差异例如，在运行1中，峰X在时间y洗脱，但是在运行1+n中，峰X在时间z洗脱）。因此，保留漂移或改变可以导致不期望的效果，包括实验噪音、不可再现性或失败。因此，在广义上，减轻或防止保留漂移或改变包括解决或抵消在色谱运行间的洗脱时间中的不期望的差异，以达到色谱实验提供的程度和色谱可接受的结果。[0056]在一些实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变不是恒定的绝对值或常数值。例如，可以发生同时但仍实现色谱可接受的结果的保留漂移或改变的量可以取决于给定实验中可接受的误差或偏差，样本的复杂性例如，峰的数量和或分离而变化。可以发生同时但仍实现色谱可接受的结果的保留漂移或改变的量可以取决于给定实验的持续时间或所需的重现性例如，如果对于较大数量的运行要求再现性，运行之间可允许的保留漂移或改变可以更小）因此，应当清楚减轻或防止漂移或改变不必须意味着保留漂移或改变的绝对消除。[0057]在一些实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变可以被量化。例如，保留漂移或保护可以对于单峰测量或对一组峰进行平均。保留漂移或改变可以对给出的一段时间或若干次运行进行测量。保留漂移或改变可以相对标准值、起始值或在两个或更多次给定运行之间进行测量。[0058]此外，保留漂移或改变可以通过标准化测试量化。在下文讨论的实例中，使用以下标准化测试:平均%保留改变通过取在第3、10或30天的色谱测试测量的平均绝对峰保留与在第1天的色谱测试测量的平均绝对峰保留的百分比差异计算。对于每天的测试，色谱柱在Mixl测试条件下平衡20分钟，随后三次注射Mixl并且随后在Mix2测试条件下平衡10分钟，随后三次注射Mix2。[0059]标准化测试的参数为：共溶剂Mixl=5%甲醇；样本Mixl=3-苯甲酰吡啶0.1mgmL;共溶剂Mix2=10%甲醇;样本Mix2=咖啡因，胸腺嘧啶，罂粟碱，泼尼松龙，磺胺（各〇.2mgmL;柱尺寸=2.1X150mm;流速=1.0mL分钟；柱温度=50°C;反压=1800psi;检测器=WatersTechnologiesCorporationACQUITYPDA™和SFC流通池；检测器设定=254nm40spec秒;弱洗针液=异丙醇;并且注射=1.0nL2.OyL环以PLUNO注射模式）。[0060]依据标准化的测试，减轻或防止保留漂移或改变可以包括保留漂移或改变0，。0并且0具有彡0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5口111〇11112的组合的表面覆盖范围。[0129]色谱固定相可以适用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱。[0130]在还另一方面中，本发明提供色谱固定相材料，其由式1表示：[X]WaQbTc式IhX可以是在正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱条件下经历保留漂移或变化的色谱芯材料。W可以是X表面上不存在的和或可以包含氢和或可以包含羟基。Q可以包括主要防止分析物和X、和W色谱地相互作用的官能团。T可以包括与分析物色谱地相互作用的官能团，并且通过Q与X连接。“b”和“c”可以是正数，例如0.05彡（bc彡100,并且a彡0。[0131]在一些实施方案中，色谱固定相材料适用于正相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱或其组合。[0132]在一些实施方案中，色谱固定相包含径向调整的孔、非径向调整的孔、有序的孔、无序的孔、单分散的孔、非单分散的孔、光滑表面、粗糙表面或其组合。在一个或更多个实施方案中，T具有一个可电离基团，T具有多于一个可电离基团，T具有两个或更多个具有相同PKa的可电离基团，或T具有两个或更多个具有不同pKa的可电离基团。[0133]在还另一方面中，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱的柱、毛细管柱、微流体装置或仪器。所述柱、毛细管柱、微流体装置或仪器包括界定具有入口和出口的室的具有至少一个壁的壳体，和其中配置的包含任何本公开的色谱材料的固定相。所述壳体和固定相可以适用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。[0134]在还另一个方面，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱的试剂盒。试剂盒可以包括界定具有入口和出口的室的具有至少一个壁的壳体，和其中配置的包含任何本发明的色谱材料的固定相。所述壳体和固定相可以适用于正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。所述试剂盒可以进一步包含说明书，用于用壳体和固定相实施正相色谱、超临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱或疏水相互作用液相色谱。[0135]在还另一方面中，本公开提供用于制备包含本公开中任何材料的固定相的方法。所述方法包括使芯表面与具有侧链反应基团的硅烷偶联剂反应。所述方法进一步包括，使包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应。所述方法进一步包括中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，从而产生根据本公开的固定相。[0136]在还另一个方面中，本公开提供用于根据本公开的任何材料制备固定相的方法。所述方法包括低聚化具有侧链反应基团的硅烷偶联剂。所述方法进一步包括使芯表面与低聚化的硅烷偶联试剂反应。所述方法进一步包括，使包含一个或更多个亲水的、极性的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应。所述方法进一步包括中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，从而产生根据本公开的固定相。[0137]在一个或更多个实施方案中，Q是衍生自具有一个或以下结构的试剂：[0138]在一些实施方案中，T是衍生自具有一个或以下结构的试剂：[0139]在还另一方面中，本发明提供用于在正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱中减轻或防止保留漂移或改变的方法。本发明包括使用包含根据本公开的色谱固定相的色谱装置色谱地分离样本，从而减轻或防止保留漂移或改变。[0140]在一个或更多个实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变包含保留漂移或改变行或1%超过3次运行。在一些实施方案中，减轻或防止保留漂移或改变包括基本上消除色谱材料烷氧基化和或脱烷氧基化对保留的影响。[0141]在一些实施方案中，T包含以下结构中的一个：[0142]在一些实施方案中，Y包含以下结构中的一个：[0143]T可以衍生自于以下表示的试剂：，或其组合，其中m是0-30的整数;m’是0-30的整数;m”是0-3的整数。Z可以表示化学反应基团，其包含：、胺、烷基胺、二烷基胺、异氰酸酯、酰基氯、三氟甲磺酸酯、异氰酸酯、硫氰酸酯、咪唑碳酸酯、NHS酯、羧酸、酯、环氧化物、炔烃、烯烃、叠氮、-Br、-ClS-IJ可以是嵌入的极性官能团。R1的每次出现可以独立地表示在硅上的化学反应基团，包括但不限于-H、-OH、-OR6、二烷基胺、三氟甲磺酸酯、Br、Cl、I、乙烯、烯烃或-CH2m，Q;Q的每次出现可以是-0H、-OR6、胺、烷基胺、二烷基胺、异氰酸酯、酰基氯、三氟甲磺酸酯、异氰酸酯、硫氰酸酯、咪唑碳酸酯、NHS酯、羧酸、酯、环氧化物、炔烃、烯烃、叠氮化物、-Br、-Cl或-I0P可以是1-3的整数。R1’的每次出现可以独立地表示FX1-C18烷基、C2-C18烯基、：2-8炔基、C3-C18环烷基、Ci-C18杂环烷基、C5-C18芳基、C5-C18芳氧基、或C1-C18杂芳基、氟代烷基、或氟代芳基。R2和R3的每次出现可以独立地表示氢、C1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、C3-C18环烷基X1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、C5-C18芳氧基或-8杂芳基、-Z或具有式-3丨〇?’儿1^或-：〇?’儿1^的基团。变量和13可以各自表示0至3的整数，条件是+匕=3。R’可以表示_C6的直链的、环链的或支链的烷基基团。R”可以是官能化的基团、其选自烷基、烯基、炔基、芳基、氰基、氨基、二醇、硝基、酯、阳离子或阴离子交换基团、包含嵌入极性功能和手性部分的烷基或芳基。R4可以表示氢，C1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、C3-C18环烷基、C1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、取代的芳基、C5-C18的芳氧基或-：18杂芳基。R5可以表不氛、Cl-Cl8烧基、C2_Cl8稀基、C2_Cl8块基、C3_Cl8环烧基、Cl-Cl8杂环烧基、C5_Cl8芳基、取代的芳基、C5-C18的芳氧基或C1-C1^芳基。R6的每次出现可以独立地表示C1-C18烷基、C2-C18烯基、C2-C18炔基、：3-8环烷基、C1-C18杂环烷基、C5-C18芳基、C5-C18的芳氧基或C1-C18杂芳基。Het可以表示包含至少一个氮原子的单环的或双环的杂环或杂芳基系统。B可以表示酸性的可电离的改性剂。[0144]以上方法可以用于制作如本文所描述的任何材料例如，色谱固定相材料）。例如，本发明的方法可以包括使色谱固定相例如，二氧化硅颗粒与化学试剂例如，如本文所描述的任何上述试剂反应，以化学修饰固定相的表面，来减轻保留漂移或改变效应的方法。[0145]仪器本发明包括包含在此描述的色谱材料的多种仪器例如，色谱柱、毛细管和微流体装置和其使用的系统）。尽管下文讨论了几个说明性的实例，但是普通技术人员会理解本发明可以预期多个不同实施方案，包括但不限于色谱柱、仪器、使用方法或试剂盒。[0146]在一些实施方案中，本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合的柱或仪器。柱或仪器包括界定具有入口和出口的室的具有至少一个壁的壳体，和其中配置的根据本发明的任何实施方案的固定相。装置可以具有预成型的熔块，通过连同的材料产生的熔块，或装置不具有熔块。壳体和固定相可以适用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合。[0147]因此，本发明仪器可以含有例如，填充本发明材料例如，色谱固定相，例如适用于降低或减轻保留漂移或改变的化学修饰的固定相）。此外，本发明的仪器可以用于实施本文描述的本发明方法。[0148]在一个实施方案中，本发明以填充柱的形式。该柱可以使用如本文描述的固定相例如，色谱材料填充。这样的柱可以用于实施不同类型的色谱例如，正相色谱、超临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、疏水相互作用液相色谱、亲水相互作用液相色谱、亚临界液相色谱、高压液相色谱和溶剂化气相色谱）同时减轻或避免保留漂移或改变。[0149]柱可以与已有的色谱平台例如可商购获得的色谱系统，包括WatersAlliance®HPLC系统、WatersAcquity®系统或WatersUPC2®系统组合使用。本发明的柱可以用于多种不同质量的产量例如，分析规模的色谱、制备规模的色谱）同时减轻保留漂移或改变效应。同样地，本发明可以在毛细管和微流体装置和系统例如，可商购获得的和本领域普通技术人员熟知的）的使用中体现。柱、毛细管和微流体装置和相关系统的选择会是本领域普通技术人员容易理解的。[0150]使用方法在一个或更多个实施方案中，本发明提供了使用方法。例如，技术人员会理解本发明考虑使用在本公开描述中的色谱固定相在实施色谱分离时减轻保留漂移或改变效应的方法。本发明可以包括用于不同类型色谱分离的所述的固定相的使用方法，例如毛细管规模的分离、分析分离、制备规模的分离或工业加工规模的分离。本发明可以包括在多种色谱模式下例如，HPLC、UHPLC或SFO，以减轻保留漂移或改变的本发明的使用方法。[0151]在一个或更多个实施方案中，本发明提供用于在正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合中减轻或防止保留漂移或改变的方法。方法包含根据本发明中任何实施方案使用包括色谱固定相的色谱装置色谱地分离样本，从而减轻或防止保留漂移或改变。[0152]该方法可以使用如本文描述的本发明的试剂盒实施。此外，该方法可以用在文中描述的本发明的仪器、柱或材料例如，色谱固定相实施。此外，本发明的方法可以用于分析例如，检测存在、数量、浓度等本发明的分析物。[0153]本发明可以用于分离和或分析多个样本，包括但不限于有机小分子、蛋白质、核酸、脂类、脂肪酸、碳水化合物、聚合物等。相似地，本发明可以用于下列的分离:小分子、极性小分子、用于制药的分析物、生物分子、抗体、聚合物和低聚物、糖、聚糖分析、石油化工分析、脂质分析、肽、磷酸肽、寡核苷酸、DNA、RNA、极性酸、聚芳烃、食品分析、化学分析、生物分析、药物滥用、法医、杀虫剂、农业化学品、生物仿制药、制剂。[0154]在多个实施方案中，根据本发明的材料可以在微内径柱中具有应用，用于SFC、HPLC和或UHPLC系统上。[0155]在多个实施方案中，根据本发明的材料可以在快速平衡柱、长寿命柱和具有水稳定柱的SFC中具有应用。[0156]试剂盒本发明提供用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合的试剂盒。试剂盒可以包括界定具有入口和出口的室的具有至少一个壁的壳体，和其中配置的根据本发明任何实施方案的固定相。装置可以具有预成型的熔块，通过互相连接的材料产生的熔块，或装置不具有熔块。壳体和固定相可以适用于正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合。此外，可以包括用于实施正相色谱、高压液相色谱、溶剂化气相色谱、超临界液相色谱、亚临界液相色谱、基于二氧化碳的色谱、亲水相互作用液相色谱或疏水相互作用液相色谱或其组合的说明书与壳体和固定相。[0157]因此，本发明试剂盒可以用于实施在本文中描述的本发明的方法。此外，本发明的试剂盒可以用于分析多种不同样本和样本类型，包含下文所述的那些。[0158]在一个或更多个实施方案中，本发明可以预期含有本公开的方面的试剂盒降低或减轻保留漂移或改变效应。例如，试剂盒可以含有填充本公开的固定相介质的色谱柱。在一些实施方案中填充的柱可以直接在标准色谱系统中使用（例如，可商购获得的色谱系统例如WatersAcquity®色谱系统）。试剂盒可以进一步包含使用说明书。此外，试剂盒可以进一步包含纯净分析物的库存样本，用于校准装置和或确认保留漂移或改变实质上的缺少。试剂盒可以包含减轻保留漂移或改变效应的任何或全部上述组分例如，固定相、填充的柱或色谱仪器）。[QW9]分析物本发明中适合于色谱分离的分析物可以包含基本上任何目的分子，包括，例如，有机小分子、脂质、肽、核酸、合成聚合物。目标分析物可以是针对，例如，临床化学、医学、兽医学、法医化学、药理学、食品工业、工作安全、环境污染中的一个或更多个。[0160]临床化学目标分析物可以包括生物中存在的任何分子例如，人体、动物体、真菌、细菌、病毒等）。例如，临床化学的目标分析物包括，但不限于，蛋白质、代谢物、生物标记物和药物。[0161]人类医学和兽医学目标分析物可以包含可以用于在对象中诊断、预防或治疗疾病或状况的任何分子。例如，人类医学和兽医学的目标分析物包括，但不限于，疾病标记物、预防药剂、治疗药剂。[0162]法医化学目标分析物可以包括存在于从犯罪现场获得的样本中的任何分子，例如来自受害者身体的样本例如，组织或体液样本、毛发、血液、精液、尿液等）。例如，临床化学目标分析物包括，但不限于，毒剂、药物和或其代谢物、生物标记物和鉴定化合物。[0163]药理学目标分析物包含药物或其代谢物或可以用于设计、合成和监测药物的任何分子。例如，药理学目标分析物包括，但不限于，预防和或治疗药剂、它们的前体药物、中间体和代谢物。药理学分析可以包括生物等效性测试，例如，与仿制药的批准、生产和监测相关联。[0164]食品工业和农业目标分析物可以包括与食品、饮料和或其它食品工业农业产品的安全的监测有关的任何分子。来自食品工业领域的目标分析物的实例包括，但不限于，病原体标记、过敏原例如，谷蛋白和螺母蛋白）和真菌毒素。[0165]目标分析物可以包括多肽例如，天然和或非天然存在的氨基酸的聚合物，例如Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Trp、Cys、Met、Ser、Thr、Tyr、His、Lys、Arg、Asp、Glu、Asn、Gln、硒代半胱氨酸、鸟氨酸，瓜氨酸，羟脯氨酸，甲基赖氨酸，羧基谷氨酸）、肽、蛋白质、糖蛋白、脂蛋白；肽核酸;激素如肽激素，例如，TRH和抗利尿激素），和合成的和工业的多肽。[0166]样本通常，样本是包含至少一个目标分析物例如，上文公开的分类或种类的分析物，与基质一起的组合物。样本可以包括固体、液体、气体、混合物、材料例如，中间一致性的材料，例如提取物、细胞、组织、生物或其组合。在多个实施方案中，样本是身体样本、环境样本、食品样本、合成样本、提取物例如，通过分离技术获得的或其组合。[0167]身体样本可以包括衍生自个体身体的任何样本。在此情况下，个体可以是动物，例如哺乳动物，例如人类。其它个体的实例包含小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猫、狗、山羊、绵羊、猪、牛或马。个体可以是患者，例如，患有疾病或疑似患有疾病的个体。身体样本可以是体液或组织，例如为科学或医学检测目的提取的，例如为了研究或诊断疾病例如，通过检测和或鉴定病原体或生物标记物的存在）。身体样本也可以包含细胞，例如，个体身体样本中的病原体或细胞例如，肿瘤细胞）。这样的身体样本可以通过已知的方法包含组织活检例如，钻取组织活体检查和通过取血、支气管抽吸物、唾液、尿、粪便或其它体液来获得。典型的身体样本包括肿瘤、全血、血浆、血清、脐带血特别地，通过经皮脐带血液采样PUBS获得的血液，脑脊髓液CSF，唾液，羊水，乳汁，分泌物，脓水，尿，粪便，胎便，皮肤，指甲，毛发，脐，胃内容物，胎盘，骨髓，外周血淋巴细胞PBL，和固体器官组织提取物）。[0168]环境样本可以包括任何衍生自环境的样本，例如自然环境例如，海洋、土壤、空气和植物或人工环境例如，运河、隧道、建筑物）。典型的环境样本包括水例如，饮用水、河水、地表水、地下水、饮料水、污水、出水、废水或渗漏水）、土壤、空气、沉积物、生物区系（例如，土壤生物区系）、植物、动物例如，鱼类和土体例如，挖掘材料）。[0169]食品样本可以包括衍生自食品（包括饮料的任何样本。这样的食品样本可以用于多个目的，包括，例如，（1检查食品是否安全；（2检查食品在被食用时保留的样本是否含有有害污染物或是否不含有有害污染物；（3检查食品是否只含有允许的添加剂例如，法规依从性）；（4检查食品是否含有正确水平的强制性成分例如，食品上标记的声明是否正确）；或5分析食品中含有的营养成分的量。示例性的食品样本包括动物、植物或合成的来源例如，奶、面包、蛋或肉）、膳食、饮料和其部分，例如保留样本的可食用的产品。食品样本也可以包括水果、蔬菜、豆类、坚果、油籽、油脂水果、谷物、茶、咖啡、药草浸剂、可可、啤酒花、药草、香料、糖料植物、肉类、脂肪、肾、肝、内脏、乳、鸡蛋、蜂蜜、鱼和饮料。[0170]合成的样本可以包括衍生自工业过程的任何样本。工业过程可以是生物的工业过程例如，使用含有遗传信息的生物材料和能够自我复制或在生物系统中复制的过程，例如使用转染细胞的发酵过程或非生物的工业过程例如，化合物的化学合成或降解，例如药物）。合成样本可以用于检查或监测工业过程的进程，以确定期望产品的产量，和或测量副产品和或起始材料的量。实施例[0171]材料除非另有说明，全部试剂按收到的原样使用。那些本领域技术人员会认识到存在以下供应品和供应商的等同物并且，因此，下文所列的供应商不解释为限定性的。[0172]表征那些本领域技术人员会认识到存在以下装置和供应商的等同物并且，因此，下文所列的供应商不解释为限定性的。[0173]%0值通过燃烧分析（CE-440ElementalAnalyzer;ExeterAnalyticalInc·，NorthChelmsford，MA或通过CoulometricCarbonAnalyzer模组CM5300，CM5014，UICInc.，Joliet，IL进行测量。溴和氯容量通过烧瓶燃烧随后通过离子色谱（AtlanticMicrolab，Norcross，GA进行确定。这些材料的比表面积SSA、比孔容积SPV和平均孔径APD使用多点N2吸附法（MicromeriticsASAP2400;MicromeriticsInstrumentsInc.，Norcross，GA进行测量。SSA使用BET方法计算，SPV是对PP0.98确定的单点数值并且Aro是由使用BJH方法的去吸附支路的等温线进行计算。微孔表面积MSA由比表面积SSA减去孔〈34A的累计吸附孔径数据确定。中值中孔径（MMPD和中孔孔容积MPV通过Mercury孔度计（MicromeriticsAutoPoreII9220orAutoPoreIV，Micromeritics，Norcross，GA测量D骨架密度使用MicromeriticsAccuPyc1330Helium比重计（V2.04N，Norcross，GA测量。粒径使用BeckmanCoulterMultisizer3analyzer30ymaperture，70,000counts;Miami，FL测量D颗粒直径（dpso测量为基于容积的粒径分布的累积直径的50°〜分布的宽度测量为90%累积容积直径除以10%累积容积直径表示为9010比例）。这些材料的粘度使用Brookfield数字粘度计ModelDV-IIMiddleboro，MA进行判SDpH的测量是使用OaktonρΗΙΟΟSeriesmeterCole-Palmer，VernonHills，Illinois进行并且使用OrionThermoElectron，Beverly，MApH缓冲的标准品在使用前在环境温度下立即进行校准滴定使用Metrohm716DMSTitrinoautotitratorMetrohm，Hersau，Switzerland实施，并且报告为每克毫当量mequivgD环氧化物的覆盖范围水平通过滴定在加入硫代硫酸钠后释放的OiT进行确定。多核（13C，29SiCP-MASNMR谱使用BrukerInstrumentsAvance-300谱仪（7mm双宽频探针）获得。典型的旋转速度是5.0-6.5kHz，循环延迟为5秒，并且交叉极化接触时间为6毫秒。报告的13C和29SiCP-MSNMR谱漂移相对四甲基硅烷，使用外部标准金刚烷13CCP-MASWR，δ38.55和六甲基环三硅氧烷29SiCP-MS匪R，S-9.62进行记录。不同硅环境的群体通过谱反糟积进行评估，使用DMFit软件a[Massiot，D·;Fayon，F·;Capron，M·;King，I·;LeCalve?S.;Alonso?B.;Durand，J·-0·;Bujoli?B.;Gan?Z.;Hoatson，G.Magn.Che?].2002,40,70-76]〇[0174]表I-使用的特定基础颗粒1如US7919177，US7223473，US6686035和W02011084506中所述。[0175]表2-使用的特定亲核试剂列表[0176]使用的特定硅烷的实施方案[0177]1在典型的反应中，，杂化多孔颗粒分散于已在70°C下预混合60分钟的在20mM醋酸盐缓冲液中（pH5.5,使用醋酸和醋酸钠制备，J.T.Baker.5mLg稀释液的环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷甲醇0·25mLgGLYM0，Aldrich，MiIwaukee，WI，）溶液中。混合物在70°C维持20小时。反应随后冷却并且产物相继用水和甲醛J.T.Baker过滤和洗涤。产物随后在80°C在减压下干燥16小时。反应数据列于表3中。该常规程序的特定的改变包括:1材料IE使用6小时反应时间制备，2材料IF使用100mM醋酸盐缓冲液制备，3材料IG使用50°C下维持20小时制备，4材料IH使用50°C预混合并维持在50°C制备。[0178]3.90-5.10μπιοΐm2的总表面覆盖范围通过元素分析测量的颗粒％：在表面修饰之前和之后的差异确定。通过13CCP-MSNMR色谱学对这些材料的分析，指示环氧和二醇基团的混合物存在于这些材料中。[0179]表31这指的是来自键合的GPTMS硅烷的组合的覆盖范围一一来自不水解的环氧化物的覆盖范围+来自水解的环氧化物如二醇）的覆盖范围。2如通过滴定确定。[0180]实施例2在典型的反应中，杂化多孔颗粒分散于已在70°C预混合60分钟的在20mM醋酸缓冲液中（pH5.5,使用醋酸和醋酸钠制备，J.T.Baker.5mLg稀释）的环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷甲醇的溶液中（0.25mLgGLYMO，Aldrich，Milwaukee，WI。混合物在70°C维持20小时。反应随后冷却并且产物相继使用水和甲醇J.T.Baker过滤和洗涤。材料随后在0.1M的醋酸溶液5mLg稀释，J.T.Baker中在70°C回流20小时。反应随后冷却并且产物相继使用水和甲醇J.T.Baker过滤和洗涤。产物随后在80°C在减压下干燥16小时。反应数据列于表4。0.93-3.37以111〇11112的表面覆盖范围通过元素分析测量的颗粒％：在表面改性之前和之后的差异确定。通过13CCP-MSNMR色谱学分析这些材料，指示没有可测量的量的环氧化物基团剩余，只有二醇基团存在于这些材料中。[0181]表4[0182]实施例3在标准实验中，按实施例1中制备的10g材料分布于这样的溶液中，诸如，但不限于水、异丙醇或二噁烷。将超过对来自实施例1的材料确定的环氧化物覆盖范围的量的亲核试剂加入并且混合加热至70°C持续16小时。硫化亲核试剂使用合适的碱的1摩尔等价物偶联。反应后，颗粒相继被水和0.5M醋酸洗涤，并且材料随后在0.IM醋酸溶液5mLg稀释，J.T.Baker中在70°C回流20小时。反应随后冷却并且产物相继被水和甲醇过滤和洗涤J.T.Baker。产物随后在80°C下减压干燥16小时。反应数据列于表5。实例3H、3I和3J使用电荷低于确定的环氧化物覆盖范围的亲核试剂来实现减少的亲核试剂表面浓度。0.2-2.1μmolm2的亲核试剂表面浓度通过元素测量分析颗粒中％C、％N或％S表面修饰之前和之后的差异来确定。通过13CCP-MASNMR谱学分析这些材料，指示没有可测量的量的环氧化物基团剩余。[0183]表5[0184]实施例4在典型的反应中，杂化材料（IOg在甲苯中（190mL使用Dean-Stark分离器回流1小时。在冷却后，期望的硅烷和甲苯90mL加入烧瓶中。混合物在室温搅拌1小时，并随后加热回流16小时。反应随后冷却，并且产物相继被甲苯、丙酮、1:1vv丙酮水和丙酮所用溶剂来自FisherScientific过滤和洗涤。颗粒随后在丙酮0.1MNH4HCO36040，vv，200mL溶液中匀浆化并且在50°C搅拌20小时。在冷却至室温后，颗粒通过过滤收集，并相继在1:1vv丙酮水和丙酮中洗涤。颗粒在80°C真空干燥过夜。特定的实例显示于表6。1.62-2.60ymolm2的总表面覆盖范围通过元素测量分析的颗粒中％：和或°歲表面改性之前和之后的差异来确定。[0185]表6[0186]实施例5详述于实施例1、2和3的用于颗粒的键合官能化的一般步骤应用于修饰不同多孔材料的表面硅醇基团。其包括二氧化硅、杂化无机有机材料的整体料的、球面的、粒状的、表面多孔的和不规则材料、在杂化无机有机的、二氧化硅、二氧化钛、氧化铝、氧化锆、聚合的或碳材料上的杂化无机有机表层和杂化无机有机的、二氧化硅、二氧化钛、氧化铝、氧化锆或聚合的或碳材料上的二氧化硅表层。还包括以球面材料、非球面材料例如，包含环形线圈、多面体形式的固定相材料;具有高度球面芯形态的、棒状芯形态的、弯曲杆形芯形态的、环形芯形态或哑铃型芯形态的固定相材料;和具有高度球面化、棒状、弯曲杆状、环形线圈状或哑铃状形态的混合固定相材料。杂化材料的实例在美国专利号4，017，528、6，528，167、6,686,035和7，175,913,以及在国际公开号W02008103423中显示，其内容以其整体通过引用并入本文。表面多孔材料包括那些在美国专利号20130112605、20070189944和2010061367中描述的，其内容以其整体通过引用并入本文。用于球面的、粒状的或不规则材料的粒径可以从5-500μπι;更优选15-100μπι;更优选20-80μπι;更优选40-60μπι变化。这些材料的AH可以从30至2，000Α;更优选40至200Α;更优选50至150A变化。这些材料的SSA可以从20至1000m2g;更优选90至800m2g;更优选150至600m2g;更优选300至550m2g变化。这些材料的TPV可以从0.3至1.5cm3g;更优选0.5至1.4cm3g;更优选0.7至1.3cm3g变化。整体料的大孔直径可以从0.1至30μπι，更优选0.5至25μπι，更优选1至20μπι变化。[0187]实施例6应用在实施例4中详述的用于颗粒的键合官能化的一般方法，以多种比例使用硅烷的混合物。特别地，该方法应用于硅烷混合物，其中组分之一是Sl，并且其它一种或更多种组分由如在说明书中通过T和Q定义的硅烷组成。[0188]实施例7应用在实施例2中详述的用于颗粒连接官能化的一般方法，以多种比例使用不同硅烷的混合物。特别地，该方法应用于硅烷混合物，其中组分之一是Sl，并且其它一种或多种组分由如在说明书中通过T和Q定义的硅烷组成。[0189]实施例8——来自实施例2、3和4的材料的保留改变平均%保留改变通过对从第3、10或30天色谱测试测量的平均绝对峰保留与第一天色谱测试测量的平均绝对峰保留的百分比差异来计算。对每天的测试，柱在Mix1测试条件下平衡20分钟，随后三次注射Mix1并且随后在Mix2测试条件下平衡10分钟，随后三次注射Mix2。条件在表7中显示，结果在表8、9和10中显示。[0190]减少的保留%通过为取从第一天对Mixl和Mix2测量的平均绝对峰保留和在实例IA上对于Mixl和Mix2测量的第一天的平均绝峰保留的百分比差异来计算。[0191]表7—一用于保留改变测量的色谱测试条件[0192]表8—一来自实施例2的材料随时间的保留改变指的是对于该材料没有进行该测试。[0193]表9一一来自实施例3的材料随时间的保留改变指的是对于该材料没有进行该测试。[0194]表1〇——来自实施例4的材料随时间的保留改变[0195]实施例9:使用环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷GPTMS和2-氨甲基吡啶的有机-无机杂化颗粒的表面官能化GPTMS和2-氨甲基吡啶的结构在图1中显示。图IA显示了GPTMS的结构，一种硅烷表面改性剂。105部分显示了GPTMS的表面反应基团（三烷氧基硅烷），而110部分显示了反应基团（环氧化物）。图Ib显示了选择性配体2-氨甲基吡啶）。[0196]首先允许GPTMS通过在20mM醋酸钠缓冲液pH5.0中在70°C预孵育预先形成低聚物。在孵育过程中水解的硅烷的小的低聚物形成。在合适的预孵育阶段后待修饰的颗粒作为干粉加入。低聚物和任何剩余的单体与材料表面反应以产生共价地连接到材料表面的硅烷改性剂的高表面覆盖范围，如图2所显示的。[0197]图2显示硅烷偶联试剂与有机-无机杂化材料表面的反应。为了简便，将硅烷205描绘为单体。预先形成的低聚硅烷可以以与表面反应基团（210相同的方式偶联。在反应条件下，丢失甲醇215以给出表面改性的颗粒220。[0198]在硅烷与色谱材料反应后，过量的试剂和缓冲盐通过MiIliQH20洗涤去除，并且材料被转移至有机溶剂例如，1，4_二噁烧）中，并且添加2-氨甲基吡啶。2-氨甲基吡啶的氨基基团通过GPTMS的侧链环氧化物基团与表面偶联。环氧基团转化为2-氨甲基吡啶基团的比例可以通过有限制2-氨甲基吡啶的添加量进行控制。偶联的材料随后在0.5M醋酸中洗涤并且未反应的环氧化物基团水解为相应的二醇，如图3显示的。[0199]所获得的吡啶基二醇表面含有分布一致的吡啶基基团，并且提供优秀的选择性，而二醇屏蔽表面硅醇与分析物的相互作用。多成分的表面优于单一的二醇表面或单一的吡啶基表面。[0200]图3显示表面修饰的颗粒305与选择性配体310的反应。给出反应条件315,并且包含使用异丙醇和0.5M醋酸在70°C处理。结果为用于色谱分离的具有多组分的表面的固定相颗粒320。[0201]可选地，多组分表面可以在这样的条件下生产，其通过使用硅烷偶联剂与侧链反应基团产生聚合的表面，键合相在反应条件下同时键合基础材料的表面，侧链反应基团部分反应以形成惰性的侧链基团，并还在邻近硅烷偶联剂分子的侧链反应基团之间产生有限的聚合。[0202]类似地，可以在通过共价键合能够与分析物相互作用的第二化学试剂产生聚合表面的条件下产生多组分表面，所述相互作用通过对色谱相引入带电的、不带电的、极性的、非极性的、亲脂性的、亲水性的特征来影响保留。可选地，在特定条件下GPTMS的环氧基团可以与相邻硅烷的羟基基团反应，形成在表面上交联GPTMS的醚桥。这样的交联可以为键合相提供稳定性并且还可以增强硅醇的保护。然而，当这样的交联的存在与这些材料的NMR分析一致时，其还没有被确凿地证实。交联表面类型的一个实施方案在图4中显示。这样的结构将显示通过表面环氧化物聚合的醚桥的形成。[0203]实施例7图5显示制备本公开的色谱固定相的两个潜在的合成途径。如方案500中显示的，未修饰的BEH颗粒（505可以以至少两个不同方式被化学修饰。因此，一个选择，化学改性剂510首先通过GPTMS与2-氨甲基吡啶反应制备。试剂510随后与BEH颗粒505反应获得官能化的色谱表面515。[0204]任选地，图5显示了不同的合成途径。在该实施方案中，颗粒505直接与GPTMS反应以获得GPTMS-修饰表面520。520表面随后可以与2-氨甲基吡啶（525反应以获得官能化的色谱表面515。总产量为约70%。[0205]在优选的实施方案中，包括使颗粒505与GPTMS首先反应，随后使用2-氨甲基吡啶525官能化的第二个反应途径相对第一个反应途径包括使颗粒505和预形成的化学改性剂510反应。[0206]实施例8:有机-无机杂化物上键合的GPTMS减轻保留漂移或改变如图6中显示，用环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷GPTMS处理桥接的乙烯杂化BEH固定相随后是给出二醇的环氧化物开环反应可以显著地减轻保留漂移效应。图形600显示了未官能化的3pnBEH颗粒605的原始保留％与二醇官能化的3卿BEH颗粒610相比较的图。原始保留％以时间函数给出，在X轴以天计数。结果指示，在至少一些优选的实施方案中，用GPTMS的色谱表面的官能化和随后给出二醇的环氧化物开环反应可以减轻保留漂移。结果还显示单独涂覆的GPTMS解决了保留漂移的问题并且还提供了显著的保留。[0207]除非有其它指示，所有技术，包括试剂盒和试剂的使用，可以根据生产商的信息、本领域已知的方法进行。[0208]本文数值范围的记载仅仅旨在作为个别地指每一单独的值落入所述范围内的简写方法。除非本文另有说明，每一个别的值如同其被本文个别地描述一样并入说明书中。每一本文引用的文件包括全部专利、专利申请、科学出版物、生产商的说明书和指导），在此以其整体通过引用并入本文。[0209]本说明书应当理解为公开并涵盖所述方面、实施方案和实施例的全部可能的排列与组合，除非文中另有说明。本领域普通技术人员会理解本发明可以通过其表达用于说明目的而不是限制性目的的总结和描述的方面、实施方案和实施例之外进行实践。

权利要求：1.制备色谱固定相材料的方法，所述色谱固定相材料只有二醇基团存在，所述方法包括：使芯表面与具有侧链反应基团的硅烷偶联剂反应；使包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应;并且中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，由此产生只有二醇基团存在的色谱固定相材料。2.权利要求1的方法，其中所述芯表面包括杂化多孔材料。3.权利要求1的方法，其中所述硅烷偶联剂是环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷甲醇。4.权利要求1的方法，其中所述第二化学试剂是水。5.权利要求1的方法，其中所述第二化学试剂与所述侧链反应基团反应的步骤还包括酸催化剂。6.权利要求1的方法，其中中和步骤包括相继使用水和甲醇过滤和洗涤。7.权利要求1的方法，其中来自硅烷的色谱固定相材料的总覆盖范围为至少0.93μπι〇1m2〇8.—种用于在超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱中减轻或防止漂移保留的方法，其包括:使用色谱装置色谱地分离样本，所述色谱装置包括由权利要求1的方法制备的只有二醇基团存在的色谱固定相材料。9.制备色谱固定相材料的方法，所述色谱固定相材料没有明显的来自环氧化物的覆盖范围，所述方法包括：使芯表面与具有侧链反应基团的硅烷偶联剂反应；使包含一个或更多个亲水的、极性的、可电离的和或带电荷的官能团的第二化学试剂与侧链反应基团反应;并且中和任何剩余的未反应的侧链反应基团，由此产生没有明显的来自环氧化物的覆盖范围的色谱固定相材料。10.权利要求9的方法，其中所述芯表面包括杂化多孔材料。11.权利要求9的方法，其中所述硅烷偶联剂是环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷甲醇。12.权利要求9的方法，其中所述第二化学试剂是水。13.权利要求9的方法，其中所述第二化学试剂与所述侧链反应基团反应的步骤还包括酸催化剂。14.权利要求9的方法，其中中和步骤包括相继使用水和甲醇过滤和洗涤。15.权利要求9的方法，其中来自硅烷的色谱固定相材料的总覆盖范围为至少0.93μmolm2〇16.—种用于在超临界流体色谱、亚临界流体色谱、基于二氧化碳的色谱中减轻或防止漂移保留的方法，其包括:使用色谱装置色谱地分离样本，所述色谱装置包括由权利要求9的方法制备的没有明显的来自环氧化物的覆盖范围的色谱固定相材料。17.—种色谱固定相材料，其包括只有二醇基团存在的、总表面覆盖范围为至少0.93μmo1m2的有机-无机杂化孔材料，其中所述色谱固定相材料在超临界流体色谱、亚临界流体色谱、或基于二氧化碳的色谱中减轻或防止漂移保留。

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