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【发明授权】局部药物组合物_德玛万科学有限责任公司_201680029480.1 

申请/专利权人:德玛万科学有限责任公司

申请日:2016-05-19

公开(公告)日:2021-09-21

公开(公告)号:CN107666902B

主分类号:A61K9/06(20060101)

分类号:A61K9/06(20060101);A61K9/107(20060101);A61K9/113(20060101);A61K31/05(20060101);A61K47/06(20060101);A61K47/08(20060101);A61K47/10(20060101);A61K47/22(20060101);A61K47/44(20170101);A61K47/34(20170101);A61K47/14(20060101);A61K47/26(20060101);A61P17/06(20060101);A61P17/10(20060101);A61P17/00(20060101)

优先权:["20150521 US 62/165,097","20160419 US 62/324,450"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.09.21#授权;2018.03.09#实质审查的生效;2018.02.06#公开

摘要:本发明涉及局部药物乳液组合物,其包含治疗有效量的3,5‑二羟基‑4‑异丙基‑反式‑均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,其中所述乳液组合物是均质的和或所述活性物质溶于油相中。本发明还涉及通过将本发明的组合物施用于患者皮肤来治疗患者的皮肤病症或障碍的方法。

主权项:1.局部药物水包油乳液组合物,其包含:3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐,基于组合物的总重量,其量为按重量计0.05%至2%;油相,其包含碳链长度为六到十二个碳的中链甘油三酯,基于组合物的总重量,其量为按重量计5%至35%;水相;非离子性表面活性剂,基于组合物的总重量,其量为按重量计1%至20%;和抗氧化剂,其选自没食子酸丙酯、丁羟甲苯、生育酚及其组合,其中乳液组合物是均质的,且其中所述油相含有小于1%的凡士林油。

全文数据:局部药物组合物技术领域[0001]本发明涉及局部药物组合物。背景技术[0002]对制剂化学家的挑战是制备物理上稳定的局部药物组合物,其中还发现活性成分是化学上稳定的。这种药物组合物应该:[0003]⑴不刺激皮肤,[0004]ii特别适于将活性成分递送到皮肤上或皮肤中,以便治疗特定的皮肤病症或障碍,[0005]iii美观优雅的,以确保患者顺应规定的治疗方案,[0006]iv使活性成分渗透到皮肤的适当层并且接合期望的靶点,[0007]V在实现局部皮肤表皮递送的同时最大限度地减少全身暴露。[0008]被配制在物理上和化学上稳定的局部组合物中的一种感兴趣的活性成分是3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯,其具有下式:[0009][0010]该化合物也被称为5-[E-2-苯基乙烯基]-2-丙-2-基苯-1,3—二醇或2-α-甲基乙基-5-[IE-2-苯基乙烯基]-1,3-苯二醇.[0011]3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯据信最初由Paul等人,JournalofChemicalEcology198173:589-597作为抗生素公开。Li等人,AppliedandEnvironmentalMicrobiology19956112:4329-4333也分离了该化合物,但是是从不同的细菌菌株中分离的,且进一步证实了其杀真菌活性。该化合物的杀真菌活性也描述于WO1995003695Agro-BiotechCorporation中。该化合物在WO2001042231WelichemBiotechInc.和US7,868,047中进一步描述,并且适用于治疗包括银肩病和炎症在内的各种重要皮肤病症。美国专利7,868,047的实施例3描述了活性成分被制备在Galax基质中的乳膏制剂。申请人无法确定名为“Galax”的商业乳膏基质的任何药典注释(compendialnotations或可用性,因此其组成仍是未知的。[0012]已知3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯对氧化和光降解敏感参见例如Gao等人,JournalofPolymerResearch201118:1501-1508。因此,在本领域中仍然需要一种包含化学和物理上稳定的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的局部组合物,其将活性成分递送至表皮和或真皮中期望的作用位点,并且在使用时不刺激皮肤。附图说明[0013]图1图解说明了作为制剂2-14特征的非均一乳液的外观。[0014]图2图解说明了与制剂15-40表征的物理上稳定的制剂相比,作为制剂2-14特征的非均一乳液的外观。[0015]图3图解说明了从制剂1、12、17和21-24递送到表皮和真皮中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。[0016]图4图解说明了制剂1、12、17和21-24历时15小时递送到接收流体中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。[0017]图5图解说明了制剂12和21在3、6、9、12和15小时递送到真皮中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。[0018]图6图解说明从制剂12和21历时72小时递送到接收流体中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。[0019]图7图解说明了通过制剂12、17、21和22进行1^17刺激后人体离体皮肤中1111?财CyplAl的变化百分比。[0020]图8图解说明了在重复给药7天后,递送到哥廷根小型猪Gottingenminipigs皮肤中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。[0021]图9图解说明了在重复给药7天后,在哥廷根小型猪血浆中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量。如本发明所述包括图8和9在内),通篇使用的“制剂122.0%”对应于制剂14。发明内容[0022]在一个实施方案中,本发明提供了局部药物乳液组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物是均质的。[0023]在另一个实施方案中,将活性物质溶解在所述乳液组合物的油相中。在另一个实施方案中,若油相含有矿物油或凡士林油,则存在第二油相组分,且若油相含有矿物油和凡士林油两者,则存在第三油相组分。在一个实施方案中,所述油相基本上不含凡士林油。在另一个实施方案中,所述油相含有50%的提高未患病或几乎未患病所需的时间,或在IGA评分中实现2点的降低所需的时间的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,其中乳液组合物是均质的。合适的比较制剂将是制剂Ιla或12类似的活性物质%«w。在一个实施方案中,实现50%减少的时间是12周。在另一个实施方案中,实现50%减少的时间是8周。[0349]在一个实施方案中,每日给药的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐的量为IOmg至100mg。在另一个实施方案中,每日给药的量为IOmg至50mg。[0350]以类似的方式,可以评估银肩病。在目前可用的许多银肩病评估工具中,最常用的是银肩病面积和严重性指数(PASI和医师全面评估(PhysicianGlobalAssessment,PGA^ASI评分用于测量银肩病的严重性和程度。[0351]PASI检查四个身体区域:i头颈部,ii手和手臂,iii胸部、腹部和背部躯干),以及iv臀部,大腿和腿部。给予每个区域一个评分,以显示该区域有多少受到银肩病影响面积),并给予每个区域一个评分以记录银肩病有多恶劣严重性)。面积评分可以从〇无银肩病到6所有皮肤受到影响)。每个区域的严重性评分通过加入发红度、厚度和量表的分数来实现,其中,评级为〇至4,最多为12AASI评分10通常用于指示患者中度至重度斑块状银肩病。[0352]PGA量表的典型用途是从未患病到严重患病的7点评分。[0353][0354]本发明的一个实施方案是通过使用本发明所述的局部乳液组合物实现PASI评分PASI50或PASI75降低50%或75%的患者百分比。这可以是一个独立的临床终点,或者可以与患者在定义的时间点(如8周,12周,16周,20或24周或超过24周的治疗也实现了PGA评分为〇或1未患病或几乎未患病组合使用。作为严重性测量的程度,患者将很有可能从自基线PGA评分多4作为开始,例如中度至严重的斑块状银肩病患者。[0355]本发明的一个实施方案获得在有需要的患者中治疗银肩病的最佳剂量的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,其中乳液组合物是均质的,以及其中继续给药直到所述患者实现PGA评分为未患病或几乎未患病。在一个实施方案中,疗程为28周或更短的治疗持续时间,或为21周或更短,或为16周或更短的治疗持续时间,或为12周或更短的治疗持续时间。在一个实施方案中,治疗后复发的时间为3个月或更长。在另一个实施方案中,治疗后复发的时间为6个月或更长。在本发明的一个实施方案中,距复发的时间不受治疗持续时间的影响。[0356]本发明的另一个实施方案是在有需要的患有银肩病的患者中减少实现PGA评分的50%提高(未患病或几乎未患病所需的时间,或在PGA评分中实现2点的降低所需的时间的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物为均质的。在一个实施方案中,达到实现50%降低的时间是在第12周。在另一个实施方案中,达到实现50%降低的时间是在第8周。在一个实施方案中,所述实现降低的时间与给药合适的比较剂如制剂Ιla或12可比的活性物进行比较。[0357]或者,存在在有需要的患有银肩病的患者中实现PASI评分降低50%或75%的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物是均质的。[0358]在一个实施方案中,疗程为28周或更短的治疗持续时间,或为21周或更短,或为16周或更短的治疗持续时间,或为12周或更短的治疗持续时间。在一个实施方案中,治疗后复发的时间为3个月或更长。在另一个实施方案中,治疗后复发的时间为6个月或更长。在本发明的一个实施方案中,距复发的时间不受治疗持续时间的影响。比较制剂将为制剂Ιla。在一个实施方案中,达到实现50%降低的时间是在第12周。在另一个实施方案中,达到实现50%降低的时间是在第8周。[0359]在另一个实施方案中,存在在有需要的患有银肩病的患者中减少实现PGA评分的〉50%提高未患病或几乎未患病所需的时间、或在PGA评分中实现2点的降低和降低至PASI50或PASI75所需的时间的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物为均质的。在一个实施方案中,所述PASI评分是PASI75。在另一个实施方案中,所述患者实现PGA评分为未患病或几乎未患病。[0360]在另一个实施方案中,存在在受银肩病影响的人中改善达到PASI50或PASI75评分的时间的方法,所述方法包括给予所述人局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中乳液组合物为均质的。在一个实施方案中,达到PASI50的时间是在第16周,或第12周,或在第8周。在另一个实施方案中,达到PASI70的时间是在第16周,或第12周,或在第8周。合适的比较剂制剂为制剂Ιla或12可比的活性物。[0361]根据一个实施方案,本发明提供了在有需要的患者中治疗皮肤病症或障碍的方法,所述方法包括给予所述患者局部药物乳液组合物,其包含有效量的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物为均质的。在另一个实施方案中,将所述3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐溶解在所述乳液组合物的油相中。在另一个实施方案中,若所述油相包含矿物油或凡士林油,则存在第二油相组分,且若油相含有矿物油和凡士林油两者,则存在第三油相组分。[0362]本发明的另一方面是局部药物乳液组合物在制备用于在患者中治疗炎性皮肤疾病或障碍的药物中的用途,所述局部药物乳液组合物包含有效量的活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物是均质的。在一个实施方案中,将所述活性成分溶解在所述乳液组合物的油相中。在另一个实施方案中,若所述油相包含矿物油或凡士林油,则存在第二油相组分,且若油相含有矿物油和凡士林油两者,则存在第三油相组分。在一个实施方案中,所述疾病或障碍是特应性皮炎、银肩病或痤疮。[0363]本发明的组合物可以局部地用于兽医学环境或医学环境中。应该认识到患者或受试者可以是动物,家畜如哺乳动物,包括马、牛、猪、羊、家禽、鱼、猫、狗和动物园动物。在一个实施方案中,所述患者是动物。在另一个实施方案中,所述患者是哺乳动物,在另一个实施方案中,所述哺乳动物是人,在另一个实施方案中,所述人是成年人或儿科患者。在一个实施方案中,所述儿科患者是儿童。在另一个实施方案中,所述儿科患者为3个月至2岁及更大的年龄。[0364]在一个实施方案中,所寻求治疗的皮肤病症或障碍是炎性皮肤病例如,慢性炎性皮肤病如皮炎例如特应性皮炎、接触性皮炎、湿瘆性皮炎或脂溢性皮炎)、痤疮、银肩病、酒渣鼻、或老化皮肤。[0365]在一些方面,所述皮肤病症或障碍选自用于治疗皮肤疾病的组,其中所述皮肤疾病包括持续炎症、细胞动力学和分化的皮肤障碍例如银肩病、银肩病关节炎、剥脱性皮炎、玫瑰糠瘆、扁平苔藓、光滑苔藓或汗孔角化病);表皮凝聚epidermalcohesion的皮肤障碍、囊泡和大疱性疾病例如、天疱疮、大疱性类天疱疮bulluouspemphigoi、获得性大疱性表皮松解症或手掌或脚底的脓疱瘆);表皮附属物的皮肤障碍和相关障碍例如毛发障碍、指甲、红斑痤疮、口周皮炎或滤泡综合征);皮肤障碍,如表皮和附属物肿瘤例如鳞状细胞癌、基底细胞癌、角化棘皮瘤、良性上皮肿瘤或梅克尔细胞癌);黑素细胞的障碍例如色素性疾病、白化病、黑色素过少症hypomelanoses和黑素增多病、黑素细胞痣或黑素瘤);真皮的炎症和肿瘤性疾病的皮肤障碍(例如、持久性隆起性红斑(erythemaelavatumdiutinum、嗜酸性粒细胞、面部肉芽肿granulomafacilae、坏疽性脓皮病、恶性萎缩性丘瘆病、真皮和软组织的纤维性损害、或卡波西肉瘤);皮下组织的障碍(例如,脂膜炎panninculitis或脂肪营养不良);涉及反应性改变的皮肤变化的皮肤障碍例如,荨麻瘆、血管性水肿angiodererma,)、移植物抗宿主病、过敏性接触性皮炎、自身敏感性皮炎、特应性皮炎或脂溢性皮炎);由于机械和物理因素引起的皮肤变化例如热损伤、辐射性皮炎、鸡眼或老茧);光损伤例如急性和慢性紫外线辐射或光敏化);或者由于微生物剂引起的皮肤障碍例如麻风病、莱姆包柔氏体螺旋病、甲真菌病、足癣、风瘆、麻瘆、单纯疱瘆、EBV爱泼斯坦-巴尔病毒)、HPV人乳头瘤病毒)(例如HPV6和7、疣、或朊病毒)。[0366]在一个实施方案中,所述炎性障碍选自银肩病、特应性皮炎和痤疮。在一个实施方案中,所述皮肤病症或障碍是银肩病。在另一个实施方案中,所述皮肤病症或障碍是特应性皮炎。在另一个实施方案中,所述皮肤病症或障碍是痤疮。[0367][0368]术语“治疗有效量”或“有效量”在本发明中用于指给药时足以具有治疗效果的活性成分的量,例如在一段时间内被重复地施用于受影响的区域时将导致病症的改善或改变的量。有效量将根据待治疗的具体病症、病症的严重性、治疗的持续时间、病症的进展阶段、受临床病症影响的体表面积以及组合物的具体组分而有所不同。用于治疗病症或障碍的活性成分的有效量可以通过标准临床技术来确定。在任何给定情况下适当的量对于本领域技术人员来说将是显而易见的,或者能够通过常规实验来确定。所述组合物通常以局部方式被施用于受影响的区域,即局部应用于显示临床异常的皮肤区域。[0369]浓度、量、溶解度和其他数值数据在本发明中可以以范围形式呈现。应当理解,这种范围形式仅仅是为了方便和简洁而使用,并且应该被灵活地解释为不仅包括明确地列举作为范围界限的数值,而且还包括涵盖在该范围内所有单个的数值或亚范围,就如同每个数值和亚范围被明确地列举一样。表述数量、百分比或比例的所有数字以及说明书中使用的其他数值应被理解为在所有情况下被术语“约”所修饰。[0370]例如,0.1至5ngml的浓度范围应被解释为不仅包括0.lngml和5ngml的明确列出的浓度限度,而且还包括单个浓度如〇·2ngml,0·8ngml,1·Ongml,2·2ngml,3·6ngmol,和亚范围如0.3-2.5ngml,1.8-3.2ngml等。无论范围的广度或描述的特征如何,这种解释都适用。[0371]术语“给药”和“施用”在本发明中用于表示在合理的医学实践中以提供期望的治疗效果的方式将药物乳液组合物递送给患者的任何方法。[0372]如本发明所用,药物乳液组合物的“局部”给药是指通过角质层的施用和扩散,包括应用于银肩病损伤和破裂的皮肤。[0373]如本发明所用,在体外皮肤渗透研究中,术语“表皮”包括通过热分离处理而被分离的角质层和直到基底膜的组织或层。[0374]如本发明所用,在以500微米+-100微米)的厚度取皮的离体人腹部皮肤进行的体外皮肤渗透研究中,术语“表皮”是通过热分离步骤获得的顶层浅层,术语“真皮”是下面的层洗涤胶带剥离步骤之后)。[0375]术语皮肤病症或障碍的“治疗”包括减轻其至少一种症状,降低其严重性,或延迟、预防或抑制其进展。治疗不一定意味着病症或障碍被完全治愈。本发明中有用的药物乳液组合物仅需要降低病症或障碍的严重性,降低与其相关的症状的严重性,提供患者的生活质量的改善,或延迟、预防或抑制病症或障碍的发作。如医学和药学领域公认的那样,治疗不需要在群体中(例如患有特应性皮炎的患者群体每个成员中都有效才能具有临床效用。[0376]术语“药学上可接受的盐”是指对于局部用于患者是安全和有效的并具有期望的药物活性的盐。这样的盐包括当酸性质子被金属离子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子代替时形成的盐。[0377]术语“药学上可接受的”和“皮肤病学上可接受的”是指可被管理机构批准,或列在药典中或其他通用认可的用于动物、特别是人类的指南中。[0378]本发明使用的术语“皮肤渗透”是指所述3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐通过角质层、并进入到皮肤的表皮和或真皮中的扩散。[0379]如本发明所使用,“患者”包括人类患者,包括成年人、青少年和儿童例如儿科患者)。儿科患者可以包括18岁以下的青少年。根据本发明目的的儿童为12岁以下。[0380]如本发明所用,“溶解”是指以基于制备的最终组合物的重量百分比的彡50%ww或^60%ww或^70%ww或^80%ww或^90%ww或^95%ww的量的溶解在特定相中。[0381]如本发明所用,“均质的”是指一个相在另一个相中均匀分散。在ow乳液的情况下,这是指油相在水相中的均匀分散。[0382]除非另有说明,本发明所述的任何浓度范围、百分比范围或比例范围应被理解为包括该范围内的任何整数的浓度、百分比或比例及其分数,如为整数的十分之一和百分之〇[0383]除非另有说明,所有百分比是基于制备的最终组合物的重量百分比,以及所有总和等于100%按重量计)。[0384]应当理解,本发明所用的术语“一个”是指所列举组分中的“一个或多个”。本领域普通技术人员将清楚,除非另有特别说明,否则使用单数时也包括复数。[0385]在整个申请中,各种实施方案的描述使用语言“包含(comprising”,然而在一些具体情况下,可以替代地使用“基本上由...组成”或“由...组成”来描述实施方案。[0386]“基本上不含”指定组分是指具有小于约1%按重量计)的所述指定组分的组合物。“不含”指定组分是指其中所述指定组分不存在的组合物。[0387]作为生物学特征,或3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐的pKpD,取决于不存在降解产物并以有效量将所述活性成分递送到皮肤层的合适层,本发明所述的组合物为患者提供了各种炎性皮肤病症的新型治疗选择。[0388]本发明使用的其它术语旨在通过其本领域熟知的含义来定义。列出以下实施例是对本发明的说明,并不意图以任何方式限制本发明的范围。以下实施例说明了本发明。这些实施例并不旨在限制本发明的范围,而是为本领域技术人员制备和使用本发明的化合物、组合物和方法提供指导。[0389]虽然描述了本发明的特定实施方案,但是本领域技术人员将理解,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,可以进行各种改变和修改。实施例[0390]实施例1-制备乳膏,其包含0.5ww3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙稀[0391]制备了以下乳膏组合物:[0392]表1:[0393][0394]由于在该制剂的稳定性试验中观察到的所述活性成分的化学降解,然后制备了替代制剂,其中加入了抗氧化剂,并使用替代的防腐剂和缓冲体系。此外,Crodex™也可被Polawax™替代。见以下实施例2-4。[0395]实施例2-制备乳膏组合物,其包含0.5%ww3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯[0396]随后制备了以下乳膏组合物:[0397]表2:[0398][0399]实施例3-其他乳膏组合物,其包含0.5%ww3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯[0400]表3:[0401][0402]实施例4-进一步的乳膏组合物,其包含0.5%ww3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯[0403]根据实施例2和3的发现,选择制剂10-14用于进一步开发。制剂10-14除了存在不同水平的活性成分范围从〇%_2%ww以外彼此相同,对水的浓度进行相应调整。[0404]表4:[0405][0406]实施例5-制备方法[0407]使用以下一般方法制备实施例1-4中所述的乳膏组合物:[0408]油相:[0409]1.向合适大小的容器中加入油相成分(例如,白凡士林油、硬脂醇聚醚2和硬脂醇聚醚20,开始混合并加热至70-80°C。[0410]2·—旦油相处于70_80°C时,缓慢加入PolawaXTM、Cr〇deX或鲸蜡硬脂醇(视情况而定)。混合直到所有物质熔化溶解,所述油相外观均匀。[0411]活性相:[0412]3.向合适大小的容器中加入活性相成分(例如,丙二醇和二乙二醇单乙醚)。加热至50-60°C,同时混合。[0413]4.一旦达到温度,将所述活性成分慢慢加入活性相中同时混合。保持温度在50-60°C,混合直到均匀且不含未溶解的颗粒,且所述活性相外观均匀。[0414]水相:[0415]5.将水相成分如水和缓冲液加入主混合容器。开始混合并加热至70_80°C。混合直到所有物质完全溶解,所述水相外观均匀。[0416]乳化:[0417]6.—旦水和油相不含不溶性颗粒、外观均匀且达到70-80°C,缓慢将油相真空转移到含有所述水相的主容器中。从油相容器中刮下油相并转移到主容器。[0418]7.—旦转移和刮除完成,维持混合器设置并混合5-10分钟,同时保持产物温度在70-80°C之间。验证产物外观均匀。[0419]8.—旦均匀,保持混合并冷却至50_60°C。[0420]9.一旦产物和活性相温度在50-60°C,增加混合,并将活性相缓慢地真空转移到主容器中。使用保留的丙二醇刮下并冲洗活性相容器并转移到主容器。[0421]10.转移和刮除完成后,提高真空水平并维持混合器的设置并混合5-10分钟,同时保持产物温度在50-60°C之间。验证产物外观均匀。[0422]11.混合完成,保持混合并将批料冷却至30°C25_35°C。[0423]12.—旦达到温度,减少混合并将批料冷却至25°C。[0424]13.—旦产物温度〈25°C,高速混合15分钟。维持产物温度〈25°C。[0425]14.一旦混合完成,降低混合速度,并验证产物外观均匀。如有必要,在排出产物前先将产物冷却至〈25°C。[0426]15.—旦均匀且产物温度25°C,将产物排出至适当的储存容器中,必要时取样。[0427]将水相加入到油相中的另一种方法(即与上述方法相反导致产物物理外观不佳,化学稳定性差。[0428]实施例6-物理和化学稳定性[0429]将制剂2-5的样品在25°C、30°C和40°C下储存3个月,并进行视觉分析。制剂2-4在3个月的时间段内无变色或物理分离。然而,制剂5有非均质的迹象。[0430]对所述样品也通过HPLC进行化学稳定性分析,使用以下条件:[0431]ZorbaxBonus反相柱:150x4.6mm,3·5μηι粒度,具有4.0mm保护滤头guardfrit[0432]柱温:25Γ[0433]自动进样器温度:环境温度[0434]流速:1.0mlmin[0435]注射体积:15μ1[0436]检测:235nm[0437]运行时间:50分钟[0438]流动相A:0.1%TFA的水溶液[0439]流动相B:乙腈[0440]表5:HPLC洗脱梯度[0441][0442]制剂2-5在标准ICH条件下储存长达3个月时,满足化学稳定性的规范。制剂6-9显示相似的物理和化学稳定性。根据这些发现,选择制剂10-14用于进一步开发。然而,在制剂10-14的开发过程中,从显微镜分析可以看出,这些制剂的乳液结构不均匀,具有蜡状物质呈现。不均匀乳液如图1所示,并被确定为依赖于所述活性成分的浓度。换句话说,在制剂10安慰剂)中没有这样的观察,并且随着活性成分水平的增加观察到异质性水平增加。[0443]为了确定哪种半固体成分导致形成不均匀乳液,进行了实验,其中每种半固体成分被系统地取代如下:[0444]表6:[0447]观察到不含凡士林油的制剂具有均匀的乳液。使用热台光学显微镜、XRD、IR显微镜和荧光显微镜检查进行额外的表征。这些技术证实蜡状物质由凡士林油组成,并且是存在的活性成分浓度的函数。这些观察结果表明凡士林油没有充分乳化,且所述活性成分未溶于乳液的水相或油相中。[0448]实施例7-开发最终在物理和化学上稳定的乳膏制剂,其包含0.5%ww3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯以用于临床开发[0449]确定所述活性成分在不同溶剂中的溶解度。观察到所述活性成分在中链甘油三酯MCT中具有良好的溶解性,其被选择以代替乳液组合物的油相中的白凡士林油和矿物油。以下制剂用5%、10%、15%和20%MCT制备(制剂15-18。还制备了两种制剂制剂19和20,其中Polawax鲸蜡硬脂醇和乳化剂的专利共混物被替代为鲸蜡硬脂醇和另外的乳化剂。[0450]表7:[0451][0452][0453]对制剂15-20进行显微镜分析。发现所有六种制剂均是均质的,且分散的油相具有小粒度,并观察到均匀乳液。图2中显示了具有10%MCT作为油相的制剂与具有较大量白凡士林油和矿物油作为油相的制剂的外观差异。不希望受理论束缚,因为所述活性成分是两亲性的,因此认为其具有使乳液不稳定的潜力,特别是在不进行适当的溶剂选择的情况下。认为通过在油相中使用适用于所述活性成分的溶剂,可以获得更稳定的乳液。[0454]制备制剂170.5%活性成分),以及含有1%活性成分、2%活性成分分别制剂21和22和3%活性成分(制剂26的等效制剂。也制备了替代制剂,其中7.2%PoIawax被5.90%鲸蜡硬脂醇替代且具有增加的表面活性剂水平(制剂23和24。制剂17的变体具有0.1%活性成分显示为制剂25。制剂17在标准ICH条件下储存长达6个月时满足所有物理和化学稳定性的规范。由此本发明的一个实施方案是在标准ICH条件下储存长达6个月时化学和物理上稳定的药物乳液组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中将活性物质溶解在所述乳液组合物的油相中。本发明的另一实施方案是在标准ICH条件下储存长达6个月时化学和物理上稳定的药物乳液组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中所述乳液是均质的。在另一个实施方案中,将活性物质溶解在所述乳液组合物的油相中。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为1微米或更小。[0455]也制备了另外的制剂,其中改变了共溶剂,例如制剂27至29。这些数据表明,丙二醇或卡必醇Transcutol对于制剂的物理稳定性不是必要的,从而为溶解所用的活性成分的替代溶剂提供了可能。[0456]所述制剂如下表8所示:[0457]表8:[0458][0459]实施例8-制备最终制剂的方法[0460]使用以下一般方法制备实施例7所述的乳膏组合物:[0461]油相:[0462]I.向合适大小的容器中加入油相成分例如,MCT、PoIawaxtm、苯甲酸、BHT、丙二醇、二乙二醇单乙醚、聚山梨酯80、硬脂醇聚醚2、硬脂醇聚醚20和所述活性成分),开始混合并加热至70-80°C,继续混合直到所述活性成分溶解且所述相外观均匀。[0463]水相:[0464]2.将水相成分加入主混合容器(如水和柠檬酸、柠檬酸和乙二胺四乙酸二钠)。开始混合并加热至70-80°C。混合直到所有物质完全溶解,且所述水相外观均匀。[0465]乳化:[0466]3.—旦水和油相不含不溶性颗粒、外观均匀且达到70-80°C,缓慢将油相真空转移到含有所述水相的主容器中。从油相容器中刮下油相并转移到主容器。[0467]4.—旦完成转移和刮除,维持混合器设置并混合5-10分钟,同时保持产物温度在70-80°C之间。验证产物外观均匀。[0468]5.将批料转移到储存容器。冷却。[0469]由此,本发明的另一实施方案为制备乳液组合物的方法,其包括[0470]i混合并加热油相成分和所述活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐直到溶解;[0471]ii混合水相成分直到完全溶解;[0472]加入步骤(i的油相成分和步骤(ii的水相成分,混合直至外观均匀。在一个实施方案中,所得乳液组合物是均质的。在另一个实施方案中,将所述活性成分溶解在油相中。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约35微米或更小。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸小于约25微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸小于约15微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸小于约10微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸小于约5微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约1微米或小于约1微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约0.5微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约0.05至约35微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约0.05至约5微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约0.05至约1微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约〇.1至约〇.75微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸为约0.05至约35微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸D50为小于5微米。在另一个实施方案中,所述不连续相的平均液滴尺寸D50为小于1微米。[0473]在另一个实施方案中,存在制备乳液组合物的方法,其包括[0474]i混合并加热油相成分和所述活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐直到溶解;[0475]ii混合水相成分直到完全溶解;[0476]加入步骤(i的油相成分和步骤(ii的水相成分,混合直至外观均匀,以及所述乳液是均质的且任选地所述油相不连续相的平均液滴尺寸D50小于5微米。[0477]实施例9-进一步的乳膏组合物,其包含1.0%ww3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯[0478]为了辅助鉴定导致形成不均匀乳液的半固体成分,进行了另外的实验,其中将凡士林油保持在制剂中,在乳液组合物的油相中去除矿物油,并用甘油三酯MCT代替(见表9。一般来说,制剂30-32的变量是凡士林油的量的百分比和随后的水浓度。制剂33和37具有较低水平的凡士林油4%和2%,具有10%的MCT。制剂34同时具有MCT和矿物油。[0479]制剂35和36同时具有低水平的矿物油以及凡士林油与MCT,最后,制剂38和39同时具有低水平的矿物油和凡士林油,不含MCT。在制剂34-37中观察到不同规模的不均匀乳液特征。含有较低水平的凡士林油的制剂仍然导致含有所述活性成分的不均匀乳液的特性,其中所述活性成分可能仍然是稳定的,但目前尚不清楚。值得注意的是,在制剂中矿物油可以与MCT相结合加入。[0480]表9:[0483]已经注意到,美国专利U.S.7,868,047的实施例3在“Galax”乳膏基质中含有活性物质,其似乎不是药典上的或市售的基质。有一种商业产品可从WellSpringPharmaceuticals,Fla.,USA获得,名称为“Glaxal”乳膏基质,其包含水、凡士林油、鲸錯硬脂醇、液体石蜡、鲸蜡硬脂醇聚醚-2、磷酸钠、对氯间甲酚。[0484]使用实施例3作为指导,使用WellSpringGlaxal基质制备制造两种制剂。将所述活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯溶解于乙醇中,然后在混合的同时加入到Glaxal基质中。混合持续15分钟,直到制剂看起来均匀,然后用显微镜分析。[0485]含有1%活性成分的制剂41和含有2%活性成分的42用以下成分制成:[0486][0487]正如显微镜检查所证实的那样,一旦活性成分被添加到基质中,液滴粒度就会增加,并且这取决于活性物质添加量。这类似于与该制剂类似的制剂12的观察结果,制剂12也含有矿物油和凡士林油两者。[0488]实施例10-包含3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的乳膏组合物对皮肤渗透性质的影响[0489]本研究的目的是确定3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的体外皮肤渗透。[0490]特别地,测试了制剂17和21-24将所述活性成分递送到表皮和真皮中的能力,并与制剂1和12进行比较。[0491]简单地说,用皮肤渗透试验对包含3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的制剂1、12、17和21-24进行评估。该研究旨在确定药物到表皮、真皮和接受流体中的渗透。将新鲜切除的人的腹部皮肤取皮成500±IOOwii的厚度,并安装在流通扩散池上,使用供体块以提供防漏密封,暴露1.0cm2的表面积。扩散池连接至多通道栗,流速约为0.6mLhr,含有PBS。然后将每个池在加热歧管中平衡以确保皮肤表面温度为32°C在给药前至少30分钟)。以每个皮肤切片1〇μ1IOmg试验品cm2的剂量施用试验品。将试验品施用于两个单独的供体以捕获个体间差异,并且每个供体至少被施用七个皮肤切片以捕获个体内差异。施用后15小时,用棉签擦拭皮肤表面,用胶带剥离tape-stripped三次,以除去任何残留的试验品。被洗涤的皮肤在表皮和真皮连接处通过加热分开。将皮肤层置于独立的匀浆瓶中,并提取药物。从独立的试验品中提取活性成分用于评估萃取溶剂的效率。回收的药物浓度用于计算到表皮和真皮中的皮肤渗透,其为给药剂量的百分比。使用液相色谱质谱法检测3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯。[0492]3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯从制剂1、12、17和21-24中被递送到表皮、真皮施用后15小时)中的量如图3。[0493]误差棒代表每种制剂(四份皮肤供体8至14次重复的平均值标准误差SEM。注:由于扩散池的给药面积为Icm2,图3所示的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量以ygcm2表示。[0494]当比较0.5%ww3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙稀制剂时,观察到递送到表皮中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量与制剂17、制剂1和制剂12相似。然而与制剂12和制剂1相比,制剂17递送大约超过3倍的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯。另外,从制剂17、21和22的数据可以看出,所述活性成分以剂量依赖的方式递送。类似地,从制剂23和24的数据观察到所述活性成分以剂量依赖的方式递送。[0495]历时15小时递送到接收流体中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量表现出相反的关系,其中制剂17与制剂12和制剂1相比显示低2-4倍的量。类似于递送到皮肤层表皮和真皮的量,从制剂17、21和22的数据观察到,所述活性成分以剂量依赖的方式递送到接受流体中。类似地,从制剂23和24的数据观察到,所述活性成分以剂量依赖的方式递送到接受流体中。[0496]实施例11-包含3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的乳膏组合物对皮肤沉积的影响[0497]先前的研究表明,与制剂12相比,制剂17向真皮中递送铬镍钢高量的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯,而较低的量被分配到接受流体中。为了进一步探索这一观察结果,在人类离体皮肤中进行研究以每三小时0-15小时和在24小时测量真皮水平,并与接受流体中测量的浓度进行比较。[0498]用离体人皮肤渗透试验对分别包含0.5%和1.0%的3,5-二羟基-4-异丙基_反式_均二苯乙稀的制剂12和21进行评估。设计该研究以确定药物到表皮、真皮和接受流体中的渗透,并对皮肤沉积进行额外的取样。将新鲜切除的人体腹部皮肤取皮成500±100μπι的厚度,并安装在流通扩散池上,使用供体块以提供防漏密封,暴露1.0cm2的表面积。将扩散池连接到多通道栗,流速约为〇.6mlhr,含有PBS。为了保持皮肤的完整性和防止细菌生长,72小时研究的接受流体含有1%抗生素-抗真菌剂。然后将每个池在加热歧管中平衡以确保皮肤表面温度为32°C在给药前至少30分钟)。试验品以10μ1每皮肤切片(IOmg试验品cm2的剂量施用。将试验品施用于两个独立的供体以捕获个体间差异,并且每个供体至少被施用七个皮肤切片以捕获个体内差异。每小时收集接受流体,收集72小时,以测量渗透通过皮肤的活性成分。在施用后3、6、9、12和15小时,用棉签擦拭皮肤表面并用胶带剥离三次以除去任何被认为不渗透皮肤的残留试验品。被洗涤的皮肤在表皮和真皮连接处加热分开。将皮肤层置于独立的匀浆瓶中,并使用Omni珠匀浆器提取药物。回收的药物浓度用于计算到表皮和真皮中的皮肤渗透,其为给药剂量的百分比。使用前述的液相色谱质谱法检测3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯。[0499]制剂21显示出与先前观察到的相同的趋势,其中递送到真皮中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的浓度与制剂12相比更高。见图5。制剂21中增加皮肤沉积或组织驻留的趋势早在施用后3小时出现,并持续超过给药后15小时。[0500]随着皮肤开始失去其完整性,后来的时间点(即大于15小时不被考虑用于组织分析表皮和真皮),这可导致活性成分的测量水平不准确。[0501]观察到递送到接收流体中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的量表现出同样的相反关系,其中制剂12的量为制剂21的1.4倍(图6。在整个72小时的给药中,递送至接受流体的较低量的这种趋势是一致的,因为在12小时滞后期后,两种制剂都处于稳态。尽管制剂21l%ww的活性成分浓度为制剂120.5%ww的浓度的两倍,但制剂21不能将相等的量递送到接受流体中。这表明制剂21能够改变组织驻留,防止所述活性成分从皮肤分配到接受流体中。[0502]本发明的一个实施方案是如上所述的制剂的用途,其可以在使用过程中向患者提供活性成分的较低全身性暴露。在另一个实施方案中,对受影响区域的给药频率可比先前预想的少。本发明组合物的施用可以以本发明的任一实施方案表示的剂量每日两次、每日一次、每隔一天一次;每周两次;每周三次或每周一次应用于受影响的区域。在另一个实施方案中,治疗可以分两个阶段施用,初始阶段给药频率如每天一次或两次,随后是维持阶段如每隔一天;每周两次;每周二次,或每周一次。[0503]实施例12-包含3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的乳膏组合物在离体人皮肤中的生物活性[0504]靶点分析显示3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯是肠道人结肠腺癌中AhR通路的激活剂。BioMAP®是一种在长时间和昂贵的动物或临床研究之前可以提供关于化合物的生理学相关见解的系统,其证实Ahr可以是3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的主要革E点。3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙稀也被证明诱导初级primary人角化细胞和人或啮齿动物的白细胞中AhR靶基因cyplal的表达。已经开发了使用新鲜切除的人皮肤的模型来探索活性成分的内在功效(即靶点接合)。该模型允许应用局部制剂来探索皮肤的药效学活性。本研究比较了与制剂12相比,来自制剂17、21和22的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的诱导CyplAl的生物活性。[0505]使用静态单元进行组织培养:将新鲜切除的健康人皮肤取皮至750μπι,用1%Gibco™Antibiotic-Antimycotic100Χ、0·1%庆大霉素在IXDulbecco磷酸盐缓冲盐水中的抗生素抗真菌溶液清洗。使用一次性单次使用活检穿孔器切割直径为12mm的活组织检查物,并在抗生素抗真菌溶液中洗涤5-10分钟。将皮肤活组织检查物放置在具有2ml受体体积的高压灭菌的7mm0.38cm2无夹套的静态单元上,并使用金属夹和供体室保持防漏密封。受体室充满角质化培养基,在取样口使用巴斯德吸管分配。然后将静态单元置于37°C的加湿培养箱中。在第1天第-1天)局部施用试验品(向暴露的干的表皮)。二十四小时后第〇天),受体室中的培养基被激活混合物cocktai1替代,所述激活混合物被设计用于刺激皮肤驻留的免疫活性细胞。24小时后第1天),移除组织,切碎至小于IXIXImm的片,稍后储存在10倍体积的具有300μ1补充有1%2-β-巯基-乙醇的RNeasy裂解缓冲液的RNA中,以用于RNA分离。[0506]角质化培养基:培养基由237毫升Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM、237mlHam’sF-12K培养基、Iml90mM腺嘌呤、ImL0.94MCaClUmlIOnM三碘化甲腺氨酸、Iml胰岛素-转铁蛋白-硒-乙醇胺(ITS-X100X、5mlAntibiotic-AntimycoticIOOX、10ml胎牛血清师3、51111611^嫩乂1¥补充剂、0.111115〇1^1111庆大霉素组成。[0507]激活混合物:最初开发离体人皮肤靶点接合模型以模拟损伤性银肩病皮肤的促炎状态。该模型可以在Smith等人,PLOS0陬,001:10.1371」〇11«^14〇116.0147979,2016年2月12日中发现,在本发明中被称为sRICA皮肤驻留的免疫细胞激活测定。因此,使用lygml纯化的ΝΑLE小鼠抗人CD3、2ygmlCD28、lygml抗人IFN-γ、lygml抗人IL-4抗体和1〇1^!111重组人(1'1111^-11311^-1卩2、10即11111'1111^-61?035^七61118、11^11111'1116卩-131和1·]!IL-21的组合原位激活皮肤驻留的免疫活性细胞。将所有组分与角质化培养基结合在单一混合物(即激活混合物)中。[0508]RNA分离定量:将约40mg切碎的组织加入到含有2.8和1.4mm陶瓷珠的匀浆管中。使用高通量珠粒研磨匀浆机在6300rpm下将组织破碎30秒,并进行10个循环,其间具有2分钟用冰块冷却的间隙。通过在55°C下加入含有10μ1蛋白酶K的490μ1水对匀浆消化15分钟。将消化的组织以10,OOOxg旋转沉降3分钟以沉淀细胞碎片,并且使用Qiagen的MiniRNA分离试剂盒根据制造商的方案将上清液用于RNA分离。使用Nanodrop2000定量总的RNA。在20μΐPCR体积中,使用InvitrogenSuperscriptVILOcDNA合成试剂盒,将来自皮肤组织的分离的RNA1.4yg用作的模板以产生cDNA模板。将cDNA以1:25稀释以用于随后的qPCR,针对待定量的每个基因使用特定的TaqMan探针。LifeTechnologiesAVii7PCR机用于qPCR40扩增循环。使用DeltaDeltaCT公式计算Cyplal相对表达的RNA水平,并相对未处理的皮肤切片进行归一化。[0509]如通过CyplAlmRNA间接测定的那样,制剂17,21和22以及制剂12显示了3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯在人皮肤中的生物活性。这些制剂之间的生物活性没有差异。制剂17、21和22缺乏剂量响应表明,这种上调已经达到最大或平台,这可以是通过含有〇.5%或更少的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯制剂实现的。这些数据证实在体外皮肤渗透研究中量化的浓度是生物可利用的并且能够接合人皮肤内的靶点。已经发现,该测定没有提供在制剂之间和或制剂中的活性物质的浓度之间的统计学显著的差异。[0510]实施例13-局部给药至哥廷根小型猪7天后3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的全身暴露和皮肤浓度[0511]为了评估组织浓度和全身暴露,在哥廷根小型猪中进行了的毒代动力学研究,历时7天用3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯进行重复局部给药。为了比较全身暴露与局部皮肤组织水平,收集组织活组织检查物,切片并分析活性成分,并与第1天和第7天的血浆浓度进行比较。文献中描述了在小型猪中类似的皮肤活组织检查方法,如MitraA等人,UseofMinipigSkinBiopsyModelasanInnovativeTooltoDesignTopicalFormulationtoAchieveDesiredPharmacokineticsinHumans.JPharmSci.2015年2月17日。[0512]制剂222%的活性成分和制剂122.0%,例如制剂14以每日(约23小时的时间段2%的剂量施用于小型猪3只雄性组的非擦伤的皮肤,施用7天。这些组的皮肤施用部位为总体表面积的10%。剂量重量为2gkg天,如通过在开始给药之前进行的制剂可行性测试所确定的(将适当的载体施用于上述每个剂量组中第一只迷你猪的总体表面积的10%,达约23小时)。在研究期间第1、7和14天,根据需要,将每只动物的背部和侧腹部的毛发移除。施用部位用纱布贴片半封闭,用胶带和管状网将贴片保持在适当位置。在暴露期结束时,取出网和贴片,并用温热的反渗透处理的水和棉纱布擦拭所有部位。[0513]对以下终点参数进行评估:临床观察、皮肤刺激使用Draize法评分)、体重、和肉眼以及显微镜观察经处理和未经处理的皮肤)。对在第1和第7天收集的样品进行血浆和皮肤浓度的毒代动力学评价。[0514]在第7天,小型猪被安乐死,并通过几个洗涤步骤的组合清洁皮肤表面,包括温和的清洁剂、溶剂、剃毛和胶带剥离,以确保从皮肤表面除去残留的制剂。然后将皮肤切除并将表皮侧朝下放置在干净的表面上。从给药区域收集皮肤活组织检查物8_,置于冻存管cryotubes中,立即冷冻直到分析。在仍然冷冻的同时,使用剃刀刀片去除下皮,然后将样品的上部切片(表皮和上部真皮,〇至500μπι的部分)从真皮中切出。因此,表皮是指由角质层、表皮和上部真皮(约500μπι组成的皮肤样品的上部切片,真皮代表深层真皮约1,500μm,意味着中间真皮与皮下脂肪的切割部分)。然后将表皮和真皮部分称重并在Iml含有0.1%甲酸的75:25的水:乙腈溶液中匀化。使用含0.1%甲酸和内标5ngml的100%乙腈溶液通过蛋白质沉淀进一步处理勾楽。将来自蛋白质沉淀步骤的上清液通过Ostro96孔板以除去磷脂。[0515]与制剂12相比(含有2%活性成分,这里也称为制剂14,制剂22导致3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯在上部500μπι和下部1,500μπι部分中的较高的皮肤沉积。在第1天观察到皮肤负荷的增加,并且在重复给药7天后继续。该数据表明制剂22具有在单次施用后改变皮肤微环境的能力,但也可以在更长的给药期间段保持这种效果。[0516]令人惊讶的是,通过AUC测量,与制剂12含有2%活性成分,例如制剂14相比,在第1天和第7天制剂22的全身暴露更低。在第7天,制剂22的血浆浓度进一步降低,而制剂12含有2%活性成分,例如制剂14的水平为制剂22的约2.5倍。该数据与体外人皮肤渗透研究中观察到的数据相关,其中制剂22显示较高的皮肤沉积,而较低浓度的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯被递送至接受流体。该数据的组合表明制剂22能够将更高的组织量递送到靶点,同时使全身暴露最小化。[0517]基于体外皮肤渗透通量和人类数据,预测的人类AUC值预期低于50ng*hmL,或低于42·5ng*hmL,预测的Cmax预期低于15ngml或12·5ngmL。[0518]表1〇:[0519][0520]基于小型猪体内数据和人类数据,预测的人类AUC预期低于30.0ng*hmL,或低于23.5ng*hmL。基于小型猪体内数据和人类数据,预测的Cmax预期低于15ngm或低于11.3ngmL〇[0521]当前基于有限的人类数据,人类AUC0-8h预期低于16.0ng*hmL,或低于14ng*hmL,或低于llng*hmL。在另一个实施方案中,Cmax预期低于5ngml,或低于4ngml,或低于3ngml〇[0522]表11:[0523][0524]实施例14-局部给药至哥廷根小型猪28天后3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的全身暴露和皮肤浓度[0525]7天局部给药制剂22中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯显示出在哥廷根小型猪的皮肤中具有显著浓度的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯。该研究的全身水平从第1天至第7天下降,表明制剂22能够将更高的组织量递送到靶点,同时使全身暴露最小化。为了观察这一趋势是否会在更长的给药时间段内持续,历时28天重复进行3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的局部给药,以评估制剂22的组织浓度、皮肤毒性、皮肤刺激性和毒代动力学。[0526]将制剂每天两次涧隔10±1小时)局部施用于哥廷根小型猪(3只性别组)的背部皮肤约占总体表面积的10%,持续28天,确定3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的皮肤毒性、皮肤刺激性。初始日剂量为〇载体),1〇、20或6〇11^1^天的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯浓度分别为〇、〇.5、1.0和3.0%ww,给药制剂重量为lgkg剂量2gkg天)。在每个给药日施用剂量后,从第一剂量开始将给药部位半封闭约20±1小时,然后在施用下一剂量之前轻轻洗涤。[0527]表12:向雄性和雌性哥廷根小型猪每日进行两次制剂22中的3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的真皮给药后的平均血浆和皮肤毒代动力学参数[0528][0529]NA:不适用。NR:由于数据有限而未报告;NQ:不可量化,浓度低于定量底限(血浆0·300ngmL,皮肤0·25ngmL[0530]a以母体化合物表示的剂量。[0531]在第1天和第28天,5mgkg剂量和10mgkg剂量(10mgkg天和20mgkg天)的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯在血浆中不能量化,除了第28天的2个时间点(第一剂量后3和24小时),其中以5mgkg剂量(10mgkg天给药的雌性猪在这个时间点都具有1个浓度值。在第1天和第28天,30mgkg剂量60mgkg天)的3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯在给药第一或第二剂量后3小时在血浆中可量化。[0532]在第1天和第28天,在60mgkg天的剂量水平,给药后(第一或第二剂量Tmax值范围为1至3小时。雄性猪和雌性猪的Cmax值范围为0.306至1.81ngml。通常,由于大多数浓度值低于定量底限,因此无法报告AUC0-t。[0533]雄性猪和雌性猪的表皮上部真皮中的3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯的浓度一般高于下部真皮中的浓度。在尸检时性别平均gender-averaged的个体动物皮肤浓度在60mgkg天的组中是最高的,其在表皮上部真皮中为8265ngg,在下部真皮为1830ngg。由于第28天24小时血浆浓度低于定量底限,所以不能评估皮肤中的浓度与血浆中的浓度的比较结果。[0534]所有的动物都存活到它们预定的尸检时间。基于给药部位的皮肤评估,没有与试验品相关的皮肤刺激。基于临床观察、心血管ECG和检眼镜评估、体重、食物消耗、临床病理学和死后评估器官重量、肉眼和显微镜检查的病理),不存在全身毒性。由此本发明的一个实施方案是与具有1或12的组成的制剂具有可比的活性物相比,一种无刺激性或刺激性减少的药物组合物,其包含3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐。[0535]总之,在实施例710、20mgkg天和实施例8分别为60mgkg天)中描述的本发明制剂中,向小型猪η=3性别组总体表面积的〜10%以0载体)、0.5、1.0和3.0%ww动物研究)的剂量每日两次局部给药3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯达28天,未导致皮肤刺激或全身毒性。因此,针对皮肤刺激或全身毒性的“未观察到不良反应的水平”NOAEL为3%ww或60mgkg天,即测试的最高剂量。3,5-二轻基-4-异丙基-反式-均二苯乙稀在60mgkg天组的皮肤表皮上部真皮)中达到了8265ngg的峰值平均浓度,而在所有治疗组中全身暴露都相对较低或者经常低于定量底限。[0536]本说明书中引用的所有出版物,包括但不限于专利和专利申请,在此并入本发明作为参考,就如同每篇单独的出版物被具体和单独地指出通过引用并入本发明,如同完全阐述一样。[0537]以上描述完全公开了本发明,包括其优选的实施方案。本发明具体公开的实施方案的修改和改进在以下权利要求的范围内。没有进一步的阐述,相信本领域技术人员可以使用前面的描述最大限度地利用本发明。因此,本发明的实施例将被解释为只是说明性的,而不是以任何方式限制本发明的范围。其中要求保护的独占性质或特权的本发明的实施方案定义如下。

权利要求:1.局部药物乳液组合物,其包含:活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且其中乳液组合物是均质的。2.根据权利要求1的局部组合物,其中若油相含有矿物油或凡士林油,则存在第二油相组分,且若油相含有矿物油和凡士林油两者,则存在第三油相组分。3.根据权利要求1或2的乳液组合物,其中所述油相基本上不含凡士林油或含有3%、或彡2%、或彡1%的凡士林油。4.根据权利要求1至3的乳液组合物,其中,基于组合物的总重量,所述活性成分存在的量按重量计为约0.05%至约2%。5.根据权利要求1至4的乳液组合物,其中所述抗氧化剂选自没食子酸丙酯、丁羟甲苯和生育酚。6.根据权利要求1至5中任一项的乳液组合物,其中所述油相包含至少一种油和或脂肪,其为酯和或甘油的酯。7.根据权利要求6的乳液组合物,其中所述甘油的酯为中链甘油三酯。8.根据权利要求1至7中任一项的乳液组合物,其中所述表面活性剂是非离子性表面活性剂。9.根据权利要求1或8的乳液组合物,其中所述表面活性剂选自乙氧基化脂肪醇醚、PEG蓖麻油、PEG酯、丙二醇酯、甘油酯和衍生物、聚合醚、脱水山梨糖醇衍生物、脂肪醇和乳化蜡、及其混合物。10.根据权利要求9的乳液组合物,其中所述表面活性剂包含至少一种乙氧基化脂肪醇醚。11.根据权利要求10的乳液组合物,其中所述乙氧基化脂肪醇醚是硬脂醇聚醚-2和硬脂醇聚醚-20的混合物。12.根据权利要求1至11中任一项的乳液组合物,其中所述表面活性剂包含乙氧基化脂肪醇醚和脱水山梨糖醇衍生物的混合物。13.根据权利要求12的乳液组合物,其中所述乙氧基化脂肪醇醚和脱水山梨糖醇衍生物的混合物是硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20和聚山梨酯80的混合物。14.根据权利要求1至13中任一项的乳液组合物,其中所述表面活性剂是乙氧基化脂肪醇醚、脱水山梨糖醇衍生物和脂肪醇的混合物。15.根据权利要求14的乳液组合物,其中所述乙氧基化脂肪醇醚、脱水山梨糖醇衍生物和脂肪醇的混合物是硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、聚山梨酯80和鲸蜡硬脂醇的混合物。16.根据权利要求1至15中任一项的乳液组合物,其中所述表面活性剂是乙氧基化脂肪醇醚、脱水山梨糖醇衍生物和非离子性乳化蜡的混合物。17.根据权利要求16的乳液组合物,其中所述乙氧基化脂肪醇醚、脱水山梨糖醇衍生物和乳化蜡的混合物是硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、聚山梨酯80和乳化蜡NF的混合物。18.根据权利要求1至17中任一项的乳液组合物,其中所述组合物是水包油乳液。19.根据前述权利要求中任一项的乳液组合物,其还包含防腐剂、pH调节剂、螯合剂和共溶剂。20.根据权利要求1至19中任一项的乳液组合物,其中所述组合物是水包油乳膏。21.根据前述权利要求中任一项的乳液,其中所述不连续相的平均液滴尺寸为约5微米或更小。22.根据权利要求1至21中任一项的组合物,其用于在人类患者中治疗或预防皮肤病症或障碍。23.在有需要的患者中治疗炎性疾病或障碍的方法,所述方法包括给予所述患者根据权利要求1至21中任一项的局部药物乳液组合物。24.根据权利要求23的方法,其中所述疾病或障碍是银肩病、特应性皮炎或痤疮。25.局部药物乳液组合物在制备用于在患者中治疗炎性皮肤疾病或障碍的药物中的用途,所述局部药物乳液组合物包含:均质的组合物,其含有活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂。26.根据权利要求23至25中任一项的方法或用途,其中施用于受影响的区域的组合物的单独剂量可以每天两次、每天一次、每隔一天一次、每周两次、每周三次或每周一次进行施用。27.降低含有活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐的局部药物乳液组合物在有需要的患者中使用时的刺激性的方法,所述方法包括给予所述患者均质的乳液组合物,所述乳液组合物包含所述活性成分、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且任选地其中所述乳液组合物与制剂1或12进行比较。28.用含有活性成分3,5_二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐的组合物提高其在患者中使用时在有需要的患者的皮肤中的驻留时间的方法,所述方法包括给予所述患者均质的乳液组合物,所述乳液组合物包含所述活性成分、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且任选地其中所述乳液组合物与制剂1或12进行比较。29.降低在给药含有活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐的组合物时患者中的副作用的方法,所述方法包括给予患者均质的乳液组合物,所述乳液组合物包含所述活性成分、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,且任选地其中所述乳液组合物与制剂1或12进行比较。30.用于局部给药的药物组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中所述组合物是均质的,且给药至皮肤时在人中产生低于23.5ng*hml的AUCO-τ。31.根据权利要求29的组合物,其中所述AUC低于16.0ng*hmL。32.用于局部给药的药物组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中所述组合物是均质的,且在给药至皮肤时在人中产生小于11.3ngmL的最大血楽水平Cmax。33.根据权利要求32的组合物,其中所述最大血楽水平Cmax小于4ngml。34.用于局部给药的药物组合物,其包含活性成分3,5-二羟基-4-异丙基-反式-均二苯乙烯或其药学上可接受的盐、油相、水相、表面活性剂和抗氧化剂,以及其中所述组合物是均质,且其中,使用新鲜切除的腹部人皮肤,在体外系统中给药时,在稳态测量的真皮量ng与归一化通过活性物质强度表示的皮肤通量ng*cm2hr的比例为1000至5000。

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