申请/专利权人：锦州奥鸿药业有限责任公司

申请日：2020-12-30

公开（公告）日：2021-10-12

公开（公告）号：CN113493825A

主分类号：C12Q1/686(20180101)

分类号：C12Q1/686(20180101)

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的驳回

法律状态：2023.04.14#发明专利申请公布后的驳回;2021.10.29#实质审查的生效;2021.10.12#公开

摘要：本发明属于生化药物检测领域，具体提供一种小牛血清动物源性成分种属的检测方法，所述动物源性成分为牛源性成分、猪源性成分或羊源性成分，所述方法包括：1模板DNA制备：提取样品的基因组DNA，测定浓度，稀释，作为样品模板DNA；2PCR扩增：取步骤1中所得样品模板DNA，鉴别引物为SEQIDNO：1和SEQIDNO：2；或为SEQIDNO：3和SEQIDNO：4；或为SEQIDNO：5和SEQIDNO：6；3酶切反应：取步骤2所得样品模板DNA扩增产物，限制性内切酶为DpnII酶、MnlI酶、或Sau3AI酶；4琼脂糖凝胶电泳测定：取步骤3所得酶切产物，制胶，点样，电泳。本发明方法专属性好、灵敏度高、操作简便。

主权项：1.一种小牛血清动物源性成分种属的检测方法，其特征在于，所述动物源性成分为牛源性成分、猪源性成分或羊源性成分，所述方法包括如下步骤：1模板DNA制备：提取样品的基因组DNA，测定浓度，稀释，作为样品模板DNA；2PCR扩增：取步骤1中所得样品模板DNA，鉴别引物为SEQIDNO：1和SEQIDNO：2；或为SEQIDNO：3和SEQIDNO：4；或为SEQIDNO：5和SEQIDNO：6；PCR扩增反应体系为样品模板DNA、鉴别引物混合液、PCR扩增试剂、无菌水，扩增条件为：94℃预变性1-5分钟，然后94-95℃变性30-60秒、50-60℃退火30-45秒、72℃延伸30-60秒，循环30-35次，72℃延伸5min，4℃保温结束反应；3酶切反应：取步骤2所得样品模板DNA扩增产物，限制性内切酶为DpnII酶、MnlI酶、或Sau3AI酶；酶切反应体系为扩增产物、限制性内切酶、酶反应缓冲液、无菌水；酶切反应条件为：37℃60-120分钟，65℃5-20分钟，4℃保温结束反应；4琼脂糖凝胶电泳测定：取步骤3所得酶切产物，制胶，点样，电泳。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 锦州奥鸿药业有限责任公司 小牛血清动物源性成分种属的检测方法

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