申请/专利权人:中国科学院苏州生物医学工程技术研究所;天津国科医工科技发展有限公司
申请日:2021-05-28
公开(公告)日:2021-10-12
公开(公告)号:CN113495091A
主分类号:G01N27/26(20060101)
分类号:G01N27/26(20060101);G01N27/327(20060101);C12Q1/6816(20180101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.01.23#授权;2021.10.29#实质审查的生效;2021.10.12#公开
摘要:本发明公开了一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法,包括以下步骤:1在电极表面修饰ProbeA;2将电极置于样品中;3向步骤2的样品中再加入ProbeB和ProbeC;4将电极浸泡到表面修饰有DNA探针ProbeD的金纳米颗粒溶液中;5对电极进行电化学分析,通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度。本发明利用目标miRNA在电极界面诱导的茎环结构DNA开环,释放杂交链式反应的触发链,实现电极表面的原位DNA纳米结构生长,同时在产物侧链捕获修饰有互补DNA序列的金纳米颗粒,最终通过检测纳米颗粒表面DNA末端修饰的电信号分子,能实现对靶miRNA浓度的高灵敏检测。
主权项:1.一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1在电极表面修饰DNA探针ProbeA;2将步骤1得到的电极置于需检测miRNA浓度的样品中;3向步骤2的样品中再加入DNA探针ProbeB和ProbeC;4将步骤3得到的电极浸泡到表面修饰有DNA探针ProbeD的金纳米颗粒溶液中;5对步骤4得到的电极进行电化学分析,通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度;其中,ProbeA、ProbeB和ProbeC均为茎环结构DNA,ProbeA的环状部分的序列与待检测的miRNA互补配对,待检测的miRNA可打开ProbeA的茎部;ProbeA的茎部打开后释放的单链DNA序列可以依次打开ProbeB、ProbeC的茎环结构,发生杂交链式反应;ProbeB和ProbeC上暴露有相同序列的单链区域,ProbeD上具有与该单链区域互补配对的DNA序列,使得ProbeA、ProbeB和ProbeC反应形成的长链能够捕获修饰有ProbeD的金纳米颗粒,从而能够利用反应后的电化学信号来表征待检测的miRNA的浓度。
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权利要求:
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