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【发明授权】一种减毒棒状病毒的制备方法及应用_睿丰康生物医药科技(浙江)有限公司_201810913350.5 

申请/专利权人:睿丰康生物医药科技(浙江)有限公司

申请日:2018-08-10

公开(公告)日:2021-11-19

公开(公告)号:CN110819657B

主分类号:C12N15/86(20060101)

分类号:C12N15/86(20060101);C12N7/01(20060101);C12N15/13(20060101);C07K16/28(20060101);A61K39/395(20060101);A61P35/00(20060101);C12R1/93(20060101)

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.11.19#授权;2020.03.17#实质审查的生效;2020.02.21#公开

摘要:本公开涉及一种减毒棒状病毒的制备方法及应用。具体来说,本公开提供了一种减毒病毒载体的制备方法,通过上述方法可以制备嵌合表达针对特定靶点的抗体的减毒RNA病毒重组表达载体系统,例如靶向肿瘤微环境的减毒病毒载体系统。前述载体系统可以稳定表达针对特定靶点的相应抗体。本公开的载体的宿主细胞来源广泛,极大的提高了外源嵌合的类抗体的体内外的表达效率;与此同时,载体系统本身的基因组简单且稳定,突变率低,能够快速高效嵌合表达人源的特异性抗体。并且,本公开的载体系统由于进行了基因突变改造,使得病毒的毒性降低,在表达抗体时对宿主的正常细胞不产生明显的损伤。

主权项:1.一种减毒病毒载体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(S1)将如SEQIDNO:1所示的编码水疱性口炎病毒基质蛋白的基因的核苷酸序列和第一载体混合,加入转座酶进行转座反应;(S2)将步骤(S1)得到的转座产物和感受态细菌混合,进行转化;(S3)提取通过步骤(S2)得到的细菌的质粒,得到转座后的所述编码水疱性口炎病毒基质蛋白的基因;(S4)将步骤(S3)得到的所述基因重组至第二载体中,得到所述减毒病毒载体;其中,所述编码第二载体的序列包含水疱性口炎病毒的基因组序列;其中,所述第一载体选自具有转座功能的载体;所述第一载体包含如SEQIDNO:2所示的序列;所述第二载体包含如GENBANK编号为EU849003.1所示的序列;所述编码减毒病毒载体的序列包含如SEQIDNO:4所示的序列。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 睿丰康生物医药科技(浙江)有限公司 一种减毒棒状病毒的制备方法及应用

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