申请/专利权人：江西丝科生物科技有限公司

申请日：2017-12-04

公开（公告）日：2022-06-07

公开（公告）号：CN109865161B

主分类号：A61L31/04

分类号：A61L31/04;A61L31/14;A61L31/16;C12P21/00;C07K1/16;C07K1/14

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.06.07#授权;2019.07.05#实质审查的生效;2019.06.11#公开

摘要：本发明涉及生物医学技术领域。本发明提供了一种蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，所述蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法包括以下步骤：（1）制备蜘蛛丝蛋白溶液；（2）将所述蜘蛛丝蛋白溶液注入模具，甲醇或乙醇处理和干燥，获得蜘蛛丝蛋白骨钉。本发明提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法操作简单、可以工业化生产，其制备的蜘蛛丝蛋白骨钉具有高强度、高韧性、以及轻盈、耐紫外线、生物可降解等优点，其在人体降解之后是氨基酸和多肽，对人体无毒害作用。

主权项：1.一种蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法包括以下步骤：1制备蜘蛛丝蛋白溶液；所述蜘蛛丝蛋白为基因重组蜘蛛丝蛋白，所述步骤1包括：将表达基因重组蜘蛛丝蛋白的工程菌置于第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，并进行菌体破碎处理，得到第一混合液；所述第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围为1-10mM；将第一混合液离心，取上清液，获得第一上清液；将第一上清液在60～80℃恒温水浴中保持预设时间，离心，取上清液，获得第二上清液；将第二上清液加入镍层析柱，使用第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液去除杂质蛋白，然后使用第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液洗脱，获得基因重组蜘蛛丝第一初始溶液；所述第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围为40-60mM；所述第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围为200-300mM；对所述基因重组蜘蛛丝蛋白洗脱液进行透析，获得基因重组蜘蛛丝第二初始溶液；将基因重组蜘蛛丝第二初始溶液离心，去上清液，得到基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液；将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥，得到无水基因重组蜘蛛丝蛋白；所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥的步骤包括：将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液在-80～0℃的环境中冷冻；在冷冻干燥机中真空冷冻处理1～500小时；其中，所述冷冻干燥机的真空压强为0.001～1mBar，温度为-80～0℃；将所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶于溶剂，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；所述蜘蛛丝蛋白溶液为蜘蛛丝蛋白六氟异丙醇HFIP溶液或蜘蛛丝蛋白水溶液；所述步骤1包括：将1重量份的无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶于0.5～10重量份的六氟异丙醇或1～10重量份的水，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白和所述六氟异丙醇的温度为5～50℃，所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白和所述水的温度为5～50℃；2将所述蜘蛛丝蛋白溶液注入模具，甲醇或乙醇处理和干燥，获得蜘蛛丝蛋白骨钉；所述步骤2中，经所述甲醇或乙醇处理和干燥后，获得蜘蛛丝蛋白棒材；再将所述蜘蛛丝蛋白棒材切屑获得蜘蛛丝蛋白骨钉。

全文数据：一种蜘蛛丝蛋白骨钉及其制备方法技术领域本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及一种蜘蛛丝蛋白骨钉及其制备方法。背景技术骨钉是骨修复过程中常用的骨固定器械。传统的骨钉由不锈钢、钛及其合金材料等金属材料制成，这些材料虽然具有强度高、韧性好的优点，但是待患者康复后还要进行二次手术以取出金属骨钉，给患者带来二次痛苦，而且在二次手术后留下的空洞也会给患者留下潜在的骨折危险。目前，已开始采用聚乳酸PLA、聚乙交酯-丙交酯PLGA等可降解材料应用于骨修复临床。可吸收高分子材料制备的骨钉虽然能克服传统骨钉材料的诸多缺陷。但聚乳酸PLA等材料降解会形成些酸性产物，给人体组织带来负面影响。此类材料降解时会引起酸性积累，且无骨传导性，从而不能促进骨细胞的生长。此类材料降解速度较快，不适合主要承力骨的修复。另外，此类材料的力学性能不能完全满足骨修复临床需求，需要通过添加加强纤维等方式提高其力学性能。同时，也有用PLA增韧陶瓷基材料制备骨内置材料，使骨钉的力学性能达到的同时也增加了生物相容性，但是此种骨钉不能完全降解。另外，虽然磷酸钙骨材料制备的骨钉具有可降解性、良好的骨传导性、生物相容性，并且磷酸钙骨钉可以承受压缩载荷，但是具有低断裂强度、脆性、易疲劳性。发明内容鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种蜘蛛丝蛋白骨钉及其制备方法，提供的蜘蛛丝蛋白骨钉具有高强度、高韧性、以及轻盈、耐紫外线、生物可降解等优点，其在人体降解之后是氨基酸和多肽，对人体无毒害作用。本发明第一方法提供了一种蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，所述制备方法包括以下步骤：1制备蜘蛛丝蛋白溶液；2将所述蜘蛛丝蛋白溶液注入模具，甲醇或乙醇处理和干燥，获得蜘蛛丝蛋白骨钉。于本发明的一个实施例中，所述步骤2中，经所述甲醇或乙醇处理或干燥后，获得蜘蛛丝蛋白棒材；再将所述蜘蛛丝蛋白棒材切屑获得蜘蛛丝蛋白骨钉。于本发明的一个实施例中，所述蜘蛛丝蛋白溶液为蜘蛛丝蛋白六氟异丙醇HFIP溶液或蜘蛛丝蛋白水溶液。于本发明的一个实施例中，所述蜘蛛丝蛋白溶液中的蜘蛛丝蛋白浓度为0.01mgmL～300mgmL。于本发明的一个实施例中，所述蜘蛛丝蛋白选自天然蜘蛛丝蛋白或基因重组蜘蛛丝蛋白。于本发明的一个实施例中，当所述蜘蛛丝蛋白为基因重组蜘蛛丝蛋白时，所述步骤1包括：将表达基因重组蜘蛛丝蛋白的工程菌置于第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，并进行菌体破碎处理，得到第一混合液；将第一混合液离心，取上清液，获得第一上清液；将第一上清液在60～80℃恒温水浴中保持预设时间，离心，取上清液，获得第二上清液；将第二上清液加入镍层析柱，使用第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液去处杂质蛋白，然后使用第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液洗脱，获得基因重组蜘蛛丝第一初始溶液；对所述基因重组蜘蛛丝蛋白洗脱液进行透析，获得基因重组蜘蛛丝第二初始溶液；将基因重组蜘蛛丝第二初始溶液离心，去上清液，得到基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液；将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥，得到无水基因重组蜘蛛丝蛋白；将所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶于溶剂，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。于本发明的一个实施例中，所述第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围1-10mM。所述第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围40-60mM。所述第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围200-300mM。于本发明的一个实施例中，所述将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥的步骤包括：将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液在-80～0℃的环境中冷冻；在冷冻干燥机中真空冷冻处理1～500小时；其中，所述冷冻干燥机的真空压强为0.001～1mBar，温度为-80～0℃。于本发明的一个实施例中，所述步骤1包括：将1重量份的无水蜘蛛丝蛋白溶于0.5～10重量份的六氟异丙醇，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水蜘蛛丝蛋白和所述六氟异丙醇的温度为5～50℃。于本发明的一个实施例中，所述步骤1包括：将1重量份的无水蜘蛛丝蛋白溶于01～10重量份的水，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水蜘蛛丝蛋白和所述水的温度为5～50℃。于本发明的一个实施例中，在所述步骤2中，所述甲醇处理包括：将注有所述蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态甲醇中，并每隔1～50小时更换一次甲醇溶液，更换次数为1～50次，获得蜘蛛丝蛋白蛋固体；将所述蜘蛛丝蛋白蛋白固体从所述模具中取出并继续使用甲醇浸泡，并每隔1～50小时更换一次甲醇溶液，更换次数为1～50次。于本发明的一个实施例中，在所述步骤2中，所述乙醇处理包括：将注有所述蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态乙醇中，并每隔1～50小时更换一次乙醇溶液，更换次数为1～50次，获得蜘蛛丝蛋白蛋固体；将所述蜘蛛丝蛋白固体从所述模具中取出并继续使用乙醇浸泡，并每隔1～50小时更换一次乙醇溶液，更换次数为1～50次。于本发明的一个实施例中，在所述步骤2中，所述干燥包括：通风环境下使蜘蛛丝蛋白中的甲醇或乙醇挥发并风干，所述通风环境温度为10～50℃。于本发明的一个实施例中，还包括：3将步骤2获得的蜘蛛丝蛋白骨钉在活性药物溶液中浸泡，获得含有所述活性药物的蜘蛛丝蛋白骨钉；其中，所述活性药物溶液中的药物浓度为0.001μgmL～5mgmL，浸泡时间为1分钟～500小时。于本发明的一个实施例中，所述活性药物包括促进骨骼生长的活性因子；其中，所述促进骨骼生长的活性因子包括以下任一种或多种：BMP、FGF、PDGF、VEGF、TGF、IGF。于本发明的一个实施例中，所述活性药物包括抗菌消炎类药物；其中，所述抗菌消炎类药物包括以下任一种或多种：青霉素类、头抱菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类。于本发明的一个实施例中，所述步骤1包括：将0.5重量份抗菌消炎类药物和或促进骨骼生长的活性因子加入到0.5～10重量份溶剂中，获得药物溶剂；将1重量份蜘蛛丝蛋白加入到所述药物溶剂，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述抗菌消炎类药物包括以下任一种或多种：青霉素类、头抱菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类；所述促进骨骼生长的活性因子包括以下任一种或多种：BMP、FGF、PDGF、VEGF、TGF、IGF。于本发明的一个实施例中，所述步骤1中，先将蜘蛛丝蛋白制备成无水蜘蛛丝蛋白，再将获得的无水蜘蛛丝蛋白溶解于溶剂中，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。于本发明的一个实施例中，所述步骤1中，先制备蜘蛛丝蛋白溶水溶液，然后进行冷冻干燥，获得无水蜘蛛丝蛋白，再将获得的无水蜘蛛丝蛋白溶解于溶剂中，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。本发明第二方面还提供了一种蜘蛛丝蛋白骨钉，采用第一方面所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备而成。本发明的第三方面提供前述蜘蛛丝蛋白骨钉在制备骨固定器械中的用途。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：通过本发明的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。附图说明图1为本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法的流程示意图。图2为本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉的结构示意图。图3为本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法中蜘蛛丝蛋白骨钉在活性药物溶液中的浸泡时间和活性药物载入深度的关系。图4为本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学特性曲线。图5为本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉对细菌的抑制作用效果图。具体实施方式在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围；在本发明说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。实施例1本发明实施例1提供了一种蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，如图1所示，所述蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法包括以下步骤。步骤1、制备蜘蛛丝蛋白溶液。该蜘蛛丝蛋白溶液可以为天然蜘蛛丝蛋白的溶液，也可以为基因重组蜘蛛丝蛋白的溶液。接下来基因重组蜘蛛丝蛋白为例进行介绍。首先将经过高密度发酵并表达基因重组蜘蛛丝蛋白的工程菌溶解在第一Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液Tris-HCl浓度20mM，NaCl浓度150mM，Imidazole范围5mM中，利用破菌仪破碎细菌。将破碎的细菌进行离心，收集上清液；然后在80℃恒温水浴下保温上清液24小时，离心，收集上清液；将上清液加入镍层析柱，使用第二Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液Tris-HCl浓度20mM，NaCl浓度150mM，Imidazole范围50mM洗去杂蛋白，再使用第三Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液Tris-HCl浓度20mM，NaCl浓度150mM，Imidazole范围250mM洗脱目标基因重组蜘蛛丝蛋白，并收集；将收集的基因重组蜘蛛丝蛋白溶液装入透析袋中，置于磷酸缓冲液中梯度透析24小时后转移至超纯水中透析48小时；将透析过的基因重组蜘蛛丝蛋白溶液离心分离，收集上层清液，得到所需的基因重组蜘蛛丝蛋白初始溶液。可以对基因重组蜘蛛丝蛋白初始溶液进行干燥，得到无水基因重组蜘蛛丝蛋白，然后将无水基因重组蛋白溶于溶剂，获得蜘蛛丝蛋白溶液。也可以将基因重组蜘蛛丝蛋白初始溶液进行浓缩，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。对基因重组蜘蛛丝蛋白初始溶液进行的干燥可以为冷冻干燥，具体地，所述基因重组蜘蛛丝蛋白初始溶液先在-80℃的环境中冷冻12小时，然后在冷冻干燥机中真空冷冻处理100小时，所述冷冻干燥机的真空压强为0.02mBar，温度为-20℃。所述蜘蛛丝蛋白溶液可以为基因重组蜘蛛丝蛋白六氟异丙醇HFIP溶液。可以将无水基因重组蛋白溶解于六氟异丙醇HFIP中，获得所述基因重组蜘蛛丝蛋白六氟异丙醇溶液。具体地，无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶解时，无水基因重组蜘蛛丝蛋白和六氟异丙醇质量比为1:4，温度为25℃，溶解时间48小时。同时预先添加低浓度消炎药物氨苄西林，氨苄西林与无水基因重组蜘蛛丝蛋白质量配比为0.5mg:1g。所述蜘蛛丝蛋白溶液可以为基因重组蜘蛛丝蛋白水溶液。制备所述蜘蛛丝蛋白溶液具体为将1重量份的无水蜘蛛丝蛋白溶于1重量份的水，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水蜘蛛丝蛋白和所述水的温度为5℃。步骤2、将所述蜘蛛丝蛋白溶液注入模具，甲醇处理和干燥，获得蜘蛛丝蛋白骨钉。模具可以为骨钉模具，通过骨钉模具可以直接制备蜘蛛丝蛋白骨钉；模具也可以为圆筒状模具，可以先制备蜘蛛丝蛋白棒材，然后切削成蜘蛛丝蛋白骨钉。接下来，以模具为圆筒状模具、蜘蛛丝为基因重组蜘蛛丝为例，对步骤2进行具体介绍。模具为直径为10mm圆筒状模具表面有100微米直径的通孔。将蜘蛛丝蛋白溶液注入模具后，置于甲醇环境中进行处理。甲醇处理的过程为：将含有蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态甲醇中，并每隔12小时更换一次甲醇溶液，换液次数为10次，获得基因重组蜘蛛丝蛋白固体；然后将所述基因重组蜘蛛丝蛋白固体从模具中取出并继续使用甲醇浸泡，并每隔24小时更换一次甲醇溶液，换液次数5次。将基因重组蜘蛛丝蛋白棒材，即上述所述的基因重组蜘蛛丝蛋白骨钉切削成骨钉形状。具体地，可以根据具体的骨修复临床要求，将所述基因重组蜘蛛丝蛋白棒材切削成骨钉，如图2所示。将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在活性药物的水溶液中，骨钉表面一定深度内包含具有促进骨生长和或抗菌消炎作用的药物。具体的，活性药物的水溶液为氨苄西林溶液，浓度为5mgmL，浸泡时间为24小时，药物载药深度约为100微米。浸泡时间和药物载药深度的关系如图3所示。蜘蛛丝蛋白骨钉在通风环境下晾干，灭菌后包装。具体地址，通风环境为通风橱中晾干，温度为24℃室温，晾干时间12小时，灭菌方法为Co60放射线灭菌方法。通过本发明实施例1提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例1提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，结果如图4所示，其弹性模量值3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；其中，氨苄西林药物水溶液的浓度5mgmL，蜘蛛丝蛋白骨钉在其中的浸泡时间24小时；将骨钉表面残留的药物溶液擦拭干净后，通风环境下晾干12小时，然后在大肠杆菌凝胶板上插入并培养24小时。结果如图5所示，可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例1提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例2在步骤1中，第一Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液为Tris-HCl浓度5mM，NaCl浓度200mM，Imidazole范围10mM的溶液；第二Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液为Tris-HCl浓度5mM，NaCl浓度200mM，Imidazole范围40mM溶液；第三Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液为Tris-HCl浓度50mM，NaCl浓度200mM，Imidazole范围300mM的溶液。其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例2提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例2提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例2提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例3，在步骤1中，将天然蜘蛛丝蛋白溶于水，进行-40℃冷冻，在真空冷冻干燥机中真空冷冻处理250小时，真空压强为0.001mBar，温度为-80℃；获得无水天然蜘蛛丝蛋白，再将1重量份无水天然蜘蛛丝蛋白溶于0.5重量份的六氟异丙醇，溶解温度为27.5摄氏度获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。其他步骤与实施例1相同。通过本发明实施例3提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例3提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例3提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例4在步骤1中，将蜘蛛丝蛋白溶于水，进行0℃冷冻，在真空冷冻干燥机中真空冷冻处理500小时，真空压强为1mBar，温度为-40℃；获得无水蜘蛛丝蛋白，再将1重量份无水天然蜘蛛丝蛋白溶于5重量份的六氟异丙醇，溶解温度为50℃，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。其他步骤与实施例1相同。通过本发明实施例4提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例4提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例4提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例5在步骤1中，1重量份经过冷冻干燥处理的无水蜘蛛丝蛋白溶于10重量份的六氟异丙醇，溶解温度为5℃，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。其他步骤与实施例1相同。通过本发明实施例5提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例5提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例5提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例6在步骤1中，将1重量份经过冷冻干燥处理的无水蜘蛛丝蛋白溶于5.5重量份水，溶解温度为27.5℃，获得蜘蛛丝蛋白溶液，其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例6提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例6提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例6提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例7在步骤1中，将1重量份经过冷冻干燥处理的无水蜘蛛丝蛋白溶于10重量份水，溶解温度为50℃，获得蜘蛛丝蛋白溶液，其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例7提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例7提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例7提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例8在步骤2中，使用乙醇代替甲醇，其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例8提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例8提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例8提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例9在步骤2中，将蜘蛛丝蛋白溶液注入模具后，置于甲醇环境中进行处理。甲醇处理的过程为：将含有蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态甲醇中，并每隔1小时更换一次甲醇溶液，换液次数为26次，获得基因重组蜘蛛丝蛋白固体；然后将所述基因重组蜘蛛丝蛋白固体从模具中取出并继续使用甲醇浸泡，并每隔50小时更换一次甲醇溶液，换液次数1次。其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例9提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例9提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例9提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例10在步骤2中，将蜘蛛丝蛋白溶液注入模具后，置于甲醇环境中进行处理。甲醇处理的过程为：将含有蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态甲醇中，并每隔50小时更换一次甲醇溶液，换液次数为50次，获得基因重组蜘蛛丝蛋白固体；然后将所述基因重组蜘蛛丝蛋白固体从模具中取出并继续使用甲醇浸泡，并每隔1小时更换一次甲醇溶液，换液次数50次。其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例10提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例10提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例10提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例11在步骤2中，通风环境温度为50。其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例11提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例11提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例11提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例12在步骤2中，通风环境温度为10。其他操作与实施例1相同。通过本发明实施例12提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例12提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例12提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例13活性药物的水溶液为青霉素溶液，浓度为1mgmL，浸泡时间为50小时，其他操作实施例1相同。通过本发明实施例13提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例13提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例13提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。实施例14活性药物的水溶液为氨苄西林溶液，浓度为0.001μgmL，浸泡时间为500小时，其他操作实施例1相同。通过本发明实施例14提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备的蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；本发明实施例提供的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法通过在蜘蛛丝蛋白溶解阶段添加功能药物，或者将蜘蛛丝蛋白骨钉浸泡在药物水溶液中，可以对骨钉内部和表面载药，可以实现药物治疗功能。另外，可以通过蜘蛛丝蛋白的分子量、力学基因基团、结晶度等参数，可以骨钉的力学性能和降解速度，以满足不同的临床需要。对本发明实施例14提供的蜘蛛丝蛋白骨钉的力学性能进行测试，其弹性模量值约为3.5GPa，与人体骨骼弹性模量4～6GPa更为接近，在骨骼植入和愈合过程中不会造成应力屏蔽效应，克服了金属材料在这方面的缺陷。对本发明实施例提供的负载了氨苄西林药物的蜘蛛丝蛋白骨钉进行细菌抑制效果实验；结果可以在大肠杆菌凝胶板上发现，载有氨苄西林药物的骨钉具有良好的细菌抑制作用。本发明实施例14提供蜘蛛丝蛋白骨钉与人体亲和性好、无免疫排斥反应，在人体组织具有良好的兼容性，对人体无毒害作用；其力学性能接近人体骨骼，避免了骨骼植入和愈合过程中的应力屏蔽效应；其内部或表面载药，实现了药物治疗功能。综上所述，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

权利要求：1.一种蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法包括以下步骤：1制备蜘蛛丝蛋白溶液；2将所述蜘蛛丝蛋白溶液注入模具，甲醇或乙醇处理和干燥，获得蜘蛛丝蛋白骨钉。2.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤2中，经所述甲醇或乙醇处理和干燥后，获得蜘蛛丝蛋白棒材；再将所述蜘蛛丝蛋白棒材切屑获得蜘蛛丝蛋白骨钉。3.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述蜘蛛丝蛋白溶液为蜘蛛丝蛋白六氟异丙醇HFIP溶液或蜘蛛丝蛋白水溶液。4.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述蜘蛛丝蛋白溶液中的蜘蛛丝蛋白浓度为0.01mgmL～300mgmL。5.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述蜘蛛丝蛋白选自天然蜘蛛丝蛋白或基因重组蜘蛛丝蛋白。6.根据权利要求5所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，当所述蜘蛛丝蛋白为基因重组蜘蛛丝蛋白时，所述步骤1包括：将表达基因重组蜘蛛丝蛋白的工程菌置于第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，并进行菌体破碎处理，得到第一混合液；将第一混合液离心，取上清液，获得第一上清液；将第一上清液在60～80℃恒温水浴中保持预设时间，离心，取上清液，获得第二上清液；将第二上清液加入镍层析柱，使用第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液去处杂质蛋白，然后使用第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液洗脱，获得基因重组蜘蛛丝第一初始溶液；对所述基因重组蜘蛛丝蛋白洗脱液进行透析，获得基因重组蜘蛛丝第二初始溶液；将基因重组蜘蛛丝第二初始溶液离心，去上清液，得到基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液；将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥，得到无水基因重组蜘蛛丝蛋白；将所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶于溶剂，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。7.根据权利要求6所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：1所述第一浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围1-10mM；2所述第二浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围40-60mM；3所述第三浓度Tris-HClPH＝8NaClImidazole溶液中，Tris-HCl浓度范围为5-50mM，NaCl浓度范围为50～200mM，Imidazole浓度范围200-300mM。8.根据权利要求6所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液干燥的步骤包括：将所述基因重组蜘蛛丝蛋白第三初始溶液在-80～0℃的环境中冷冻；在冷冻干燥机中真空冷冻处理1～500小时；其中，所述冷冻干燥机的真空压强为0.001～1mBar，温度为-80～0℃。9.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤1包括：将1重量份的无水蜘蛛丝蛋白溶于0.5～10重量份的六氟异丙醇，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水蜘蛛丝蛋白和所述六氟异丙醇的温度为5～50℃。10.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤1包括：将1重量份的无水蜘蛛丝蛋白溶于1～10重量份的水，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述无水蜘蛛丝蛋白和所述水的温度为5～50℃。11.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，在所述步骤2中，所述甲醇处理包括：将注有所述蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态甲醇中，并每隔1～50小时更换一次甲醇溶液，更换次数为1～50次，获得蜘蛛丝蛋白蛋固体；将所述蜘蛛丝蛋白固体从所述模具中取出并继续使用甲醇浸泡，并每隔1～50小时更换一次甲醇溶液，更换次数为1～50次；在所述步骤2中，所述乙醇处理包括：将注有所述蜘蛛丝蛋白溶液的模具浸没于液态乙醇中，并每隔1～50小时更换一次乙醇溶液，更换次数为1～50次，获得蜘蛛丝蛋白蛋固体；将所述蜘蛛丝蛋白固体从所述模具中取出并继续使用乙醇浸泡，并每隔1～50小时更换一次乙醇溶液，更换次数为1～50次。12.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，在所述步骤2中，所述干燥包括：通风环境下使蜘蛛丝蛋白中的甲醇或乙醇挥发并风干，所述通风环境温度为10～50℃。13.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，还包括：3将步骤2获得的蜘蛛丝蛋白骨钉在活性药物溶液中浸泡，获得含有所述活性药物的蜘蛛丝蛋白骨钉；其中，所述活性药物溶液中的药物浓度为0.001μgmL～5mgmL，浸泡时间为1分钟～500小时。14.根据权利要求13所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述活性药物包括促进骨骼生长的活性因子；其中，所述促进骨骼生长的活性因子包括以下任一种或多种：BMP、FGF、PDGF、VEGF、TGF、IGF。15.根据权利要求13所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述活性药物包括抗菌消炎类药物；其中，所述抗菌消炎类药物包括以下任一种或多种：青霉素类、头抱菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类。16.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤1包括：将0.5重量份抗菌消炎类药物和或促进骨骼生长的活性因子加入到0.5～10重量份溶剂中，获得药物溶剂；将1重量份蜘蛛丝蛋白加入到所述药物溶剂，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液；其中，所述抗菌消炎类药物包括以下任一种或多种：青霉素类、头抱菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类；所述促进骨骼生长的活性因子包括以下任一种或多种：BMP、FGF、PDGF、VEGF、TGF、IGF。17.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤1中，先将蜘蛛丝蛋白制备成无水蜘蛛丝蛋白，再将获得的无水蜘蛛丝蛋白溶解于溶剂中，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。18.根据权利要求1所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法，其特征在于，所述步骤1中，先制备蜘蛛丝蛋白水溶液，然后进行冷冻干燥，获得无水蜘蛛丝蛋白，再将获得的无水蜘蛛丝蛋白溶解于溶剂中，获得所述蜘蛛丝蛋白溶液。19.一种蜘蛛丝蛋白骨钉，其特征在于，采用权利要求1～18任一项所述的蜘蛛丝蛋白骨钉制备方法制备而成。20.如权利要求1～18任一项或如权利要求19所述的蜘蛛丝蛋白骨钉在制备骨固定器械中的用途。

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