申请/专利权人：苏州西山生物技术有限公司

申请日：2022-06-14

公开（公告）日：2022-09-20

公开（公告）号：CN115074452A

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12N15/70;C12R1/01

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2022.10.11#实质审查的生效;2022.09.20#公开

摘要：本发明公开了一种检测小鼠唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的荧光定量PCRqPCR方法，步骤包括：从样本中提取DNA；配置荧光定量qPCR反应的反应体系；荧光定量qPCR反应的反应程序为：在PCR仪中预变性20‑40s，然后变性3‑6s，然后退火延伸25‑40s，采集信号，并按上述过程进行30‑60个循环；在所述整个体系扩增结束后，读取循环数Ct值以及扩增曲线，根据循环数Ct值和扩增曲线来进行检测结果的判断。本发明采用实时荧光定量方法操作简单快捷，引物设计的局限性小，且无需再设置熔解曲线检测扩增产物的特异性，数据分析更加简单直观；检测时间大大缩短；可检测低至30拷贝数反应,且探针法只与目的序列结合，显著提高了敏感性、特异性和重复性。

主权项：1.一种检测小鼠唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的荧光定量PCRqPCR方法，其特征在于：其包括以下步骤：S1、从样本中提取DNA；S2、配置荧光定量qPCR反应的反应体系，反应体系包括PremixTaq酶、上游引物、下游引物、探针、校正染料、PCR专用水和DNA模板；S3、荧光定量qPCR反应的反应程序为：在PCR仪中预变性20-40s，然后变性3-6s，然后退火延伸25-40s，采集信号，并按上述过程进行30-60个循环；S4、在所述整个体系扩增结束后，读取循环数Ct值以及扩增曲线，根据循环数Ct值和扩增曲线来进行检测结果的判断。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 苏州西山生物技术有限公司 一种检测小鼠唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的荧光定量PCR方法

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